| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 材料与方法 | 第19-40页 |
| (一) 实验材料 | 第19-24页 |
| 1. 细胞系与培养基 | 第19页 |
| 2. 质粒 | 第19-20页 |
| 3. 菌株 | 第20-21页 |
| 4. 抗体与重组蛋白 | 第21-22页 |
| 5. 工具酶 | 第22页 |
| 6. 试剂盒 | 第22-23页 |
| 7. 生化试剂 | 第23-24页 |
| (二) 仪器设备 | 第24-25页 |
| (三) 实验方法 | 第25-40页 |
| 1. 细胞培养 | 第25页 |
| 2. 氨基酸点突变实验 | 第25-27页 |
| 3. 免疫荧光实验 | 第27页 |
| 4. CaptureELISA | 第27-28页 |
| 5. HIV-1假病毒制备及病毒滴度测定 | 第28-29页 |
| 6. IgG1形式的HIV-1中和抗体的表达与纯化 | 第29-30页 |
| 7. 基于HIV-1假病毒的中和实验 | 第30-31页 |
| 8. 表达HIV-1中和抗体的AAV8载体质粒构建 | 第31页 |
| 9. 载体质粒的基因表达功能验证 | 第31-32页 |
| 10. Fc结构域M428L/N434S位点突变的载体质粒构建 | 第32-34页 |
| 11. 重组AAV8病毒载体包装与纯化 | 第34-35页 |
| 12. 重组AAV载体滴度,纯度测定 | 第35-36页 |
| 13. 纯化AAV载体的体外活性鉴定 | 第36-37页 |
| 14. 实验动物血浆中AAV载体介导表达的抗体浓度测定 | 第37-38页 |
| 15. 恒河猴对AAV8载体颗粒的体液免疫反应 | 第38-39页 |
| 16. 数据统计分析 | 第39-40页 |
| 实验结果 | 第40-77页 |
| (一) Y498抗体表位预测 | 第40-43页 |
| (二) 点突变验证预测的表位氨基酸 | 第43-47页 |
| (三) CD4结合区靶向的中和抗体Y498与VRC01中和活性分析及比较 | 第47-49页 |
| (四) AAV8载体质粒构建 | 第49-50页 |
| (五) AAV8载体质粒功能验证 | 第50-52页 |
| (六) 纯化AAV载体的滴度、纯度测定及体外细胞水平功能验证 | 第52-56页 |
| (七) AAV载体介导的中和抗体在BALB/c小鼠体内的表达 | 第56-61页 |
| (八) BALB/c小鼠血浆的HIV-1病毒中和能力分析 | 第61-67页 |
| (九) AAV介导表达的中和抗体在恒河猴体内的免疫治疗作用 | 第67-74页 |
| (十) 恒河猴对AAV8载体颗粒体液免疫反应分析 | 第74-77页 |
| 结果分析与讨论 | 第77-86页 |
| 小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 英文缩略语 | 第96-98页 |
| 发表论文 | 第98-99页 |
| 附录 | 第99-110页 |
| 综述 | 第110-124页 |
| 参考文献 | 第118-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
