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盐芥磷酸转运蛋白基因的克隆和功能分析

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第1章 综述第9-19页
    1.1 土壤中磷的存在状态第9-10页
    1.2 有效磷对植物的生物学作用第10页
    1.3 植物在低磷条件下的响应第10-13页
        1.3.1 形态学上的响应第11页
        1.3.2 生理生化上的响应第11-12页
        1.3.3 分子水平上的响应第12-13页
    1.4 植物体内磷的传输机制第13-14页
        1.4.1 磷从环境介质到植物体内的传输过程第13页
        1.4.2 磷在植物体内的传输过程第13-14页
    1.5 磷酸转运蛋白家族的研究第14-17页
        1.5.1 磷酸转运蛋白PHT1第14-15页
        1.5.2 磷酸转运蛋白PHT2第15-16页
        1.5.3 磷酸转运蛋白PHT3第16页
        1.5.4 叶绿体中磷酸转运蛋白第16页
        1.5.5 其它磷酸转运蛋白第16-17页
    1.6 本文研究目的及意义第17-19页
        1.6.1 研究目的第17页
        1.6.2 研究意义第17-19页
第2章 盐芥PHT1 基因对磷胁迫的应答第19-33页
    2.1 材料与设备第19页
        2.1.1 材料与试剂第19页
        2.1.2 设备第19页
    2.2 方法第19-22页
        2.2.1 实验材料的处理第19-20页
        2.2.2 盐芥总RNA的提取及cDNA的合成第20-21页
        2.2.3 引物的设计第21-22页
        2.2.4 实时定量PCR第22页
    2.3 结果与分析第22-33页
        2.3.1 实时定量PCR引物第22-24页
        2.3.2 盐芥PHT1 基因对磷胁迫应答的定量分析第24-33页
第3章 盐芥TsPHT1;1、TsPHT1;8 基因的克隆第33-43页
    3.1 材料与方法第33页
        3.1.1 材料与试剂第33页
        3.1.2 设备第33页
    3.2 方法第33-38页
        3.2.1 基因克隆第33-37页
        3.2.2 农杆菌C58 工程菌株的制备第37-38页
    3.3 结果与分析第38-43页
        3.3.1 克隆结果第38-42页
        3.3.2 TsPHT1;1、TsPHT1;8 工程农杆菌的验证第42-43页
第4章 TsPHT1;8 基因在拟南芥中的功能验证第43-51页
    4.1 材料与方法第43页
        4.1.1 材料与试剂第43页
        4.1.2 设备第43页
    4.2 方法第43-47页
        4.2.1 农杆菌介导拟南芥的遗传转化第43-44页
        4.2.2 TsPHT1;8 转基因拟南芥的筛选及半定量PCR鉴定第44页
        4.2.3 TsPHT1;8 基因在磷胁迫下的生物学功能分析第44-47页
    4.3 结果与分析第47-51页
        4.3.1 TsPHT1;8 转基因拟南芥的PCR鉴定第47页
        4.3.2 磷胁迫下TsPHT1;8 转基因拟南芥的根系变化第47-49页
        4.3.3 磷胁迫下TsPHT1;8 转基因拟南芥生理指标的测定第49-51页
第5章 TsPHT1;1 基因在拟南芥、大豆中的功能验证第51-69页
    5.1 材料与方法第51页
        5.1.1 材料与试剂第51页
        5.1.2 设备第51页
    5.2 方法第51-57页
        5.2.1 农杆菌介导拟南芥、大豆材料遗传转化第51-52页
        5.2.2 TsPHT1;1 转基因阳性苗的筛选及PCR检测第52-54页
        5.2.3 TsPHT1;1 转基因大豆的Southern blot分析第54-56页
        5.2.4 TsPHT1;1 基因在磷胁迫下的生物学功能分析第56-57页
    5.3 结果与分析第57-69页
        5.3.1 TsPHT1;1 转基因拟南芥、大豆的筛选和鉴定第57-59页
        5.3.2 TsPHT1;1 转基因大豆Southern blot第59-60页
        5.3.3 TsPHT1;1 基因能够提高转基因拟南芥的耐低磷能力第60-63页
        5.3.4 TsPHT1;1 基因能够提高转基因大豆的耐低磷能力第63-69页
第6章 结论、讨论与展望第69-75页
    6.1 结论第69-70页
    6.2 讨论第70-72页
    6.3 展望第72-75页
参考文献第75-83页
附录 A第83-85页
发表论文和参加科研情况说明第85-87页
致谢第87页

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