中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
缩写词表 | 第13-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 磷脂酶D(PLD)研究进展 | 第14-19页 |
1.1.1 植物中的PLD | 第14-15页 |
1.1.2 PLD的生化特性 | 第15-16页 |
1.1.3 PLD基因的克隆、亚细胞定位定位及组织分布 | 第16页 |
1.1.4 PLD在植物逆境胁迫中的分子生物学机理 | 第16-19页 |
1.1.4.1 PLD参与膜脂降解过程 | 第17页 |
1.1.4.2 PLD能够与功能蛋白相互作用 | 第17页 |
1.1.4.3 PLD参与植物逆境信号转导过程 | 第17-18页 |
1.1.4.4 PLDγ基因在植物逆境信号转导过程中的作用 | 第18-19页 |
1.2 ABA对环境胁迫的响应 | 第19页 |
1.3 干旱胁迫对植物的影响 | 第19-21页 |
1.4 高山冰缘植物高山离子芥研究进展 | 第21-22页 |
1.5 立题依据及研究的目的意义 | 第22-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料培养 | 第24页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第24页 |
2.1.3 酶及各种生化试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第25页 |
2.1.5 实验中PCR引物 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-35页 |
2.2.1 高山离子芥总RNA的提取及反转录 | 第25-26页 |
2.2.2 高山离子芥磷脂酶Dγ基因CbPLDγ的克隆 | 第26-31页 |
2.2.2.1 CbPLDγ中间片段第一次克隆 | 第26-27页 |
2.2.2.2 CbPLDγ中间片段第二次克隆 | 第27页 |
2.2.2.3 3′RACE | 第27-29页 |
2.2.2.4 5′RACE | 第29-31页 |
2.2.3 CbPLDγ基因生物信息学分析 | 第31-32页 |
2.2.4 CbPLDγ基因组织特异性表达分析 | 第32页 |
2.2.5 不同的胁迫处理 | 第32页 |
2.2.6 CbPLDγ基因在多种胁迫下的表达分析 | 第32-33页 |
2.2.7 高山离子芥磷脂酶D活性的测定 | 第33-34页 |
2.2.8 高山离子芥ABA含量的测定 | 第34页 |
2.2.9 相对电导率的测定 | 第34页 |
2.2.10 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第34-35页 |
2.2.11 脯氨酸(Pro)含量的测定 | 第35页 |
2.2.12 可溶性蛋白(SP)含量的测定 | 第35页 |
2.3 数据统计及分析 | 第35-36页 |
第3章 结果与分析 | 第36-61页 |
3.1 高山离子芥磷脂酶Dγ基因克隆及表达分析 | 第36-51页 |
3.1.1 高山离子芥总RNA的提取 | 第36页 |
3.1.2 高山离子芥CbPLDγ中间片段的克隆 | 第36-38页 |
3.1.2.1 第一次扩增 | 第36-37页 |
3.1.2.2 第二次扩增 | 第37页 |
3.1.2.3 拼接CbPLDγ部分片段序列 | 第37-38页 |
3.1.3 高山离子芥CbPLDγ基因3′RACE扩增结果 | 第38页 |
3.1.4 高山离子芥CbPLDγ基因5′RACE扩增结果 | 第38-39页 |
3.1.5 高山离子芥CbPLDγ全长基因的扩增 | 第39-40页 |
3.1.6 CbPLDγ基因生物信息学分析 | 第40-46页 |
3.1.6.1 CbPLDγ基因与多种植物的PLD基因预测氨基酸序列的比对 | 第40-41页 |
3.1.6.2 CbPLDγ基因系统进化树分析 | 第41-42页 |
3.1.6.3 CbPLDγ蛋白二级结构预测 | 第42页 |
3.1.6.4 CbPLDγ蛋白结构域预测 | 第42-43页 |
3.1.6.5 CbPLDγ蛋白等电点及分子量计算预测 | 第43-44页 |
3.1.6.6 CbPLDγ蛋白其他指标分析预测 | 第44-45页 |
3.1.6.7 CbPLDγ蛋白三级结构预测 | 第45-46页 |
3.1.7 CbPLDγ基因组织特异性表达分析 | 第46页 |
3.1.8 不同胁迫处理下CbPLDγ基因相对表达分析 | 第46-49页 |
3.1.9 讨论 | 第49-51页 |
3.2 干旱胁迫下高山离子芥PLD与ABA关系的研究 | 第51-57页 |
3.2.1 干旱胁迫对高山离子芥叶片膜系统的影响 | 第51-52页 |
3.2.2 干旱胁迫对高山离子芥PLD活性及ABA含量的影响 | 第52页 |
3.2.3 干旱胁迫下ABA与PLD之间的关系研究 | 第52-55页 |
3.2.3.1 干旱胁迫下PLD/PA对高山离子芥内源ABA含量的影响.. | 第52-53页 |
3.2.3.2 干旱胁迫下外源ABA对高山离子芥PLD活性的影响 | 第53-54页 |
3.2.3.3 干旱胁迫下外源ABA及Ca2+对高山离子芥PLD活性影响 | 第54-55页 |
3.2.4 讨论 | 第55-57页 |
3.3 干旱胁迫下PLDγ对拟南芥生理生化代谢的调控作用研究 | 第57-61页 |
3.3.1 拟南芥pldγ纯合突变体的鉴定 | 第57页 |
3.3.2 PLDγ及ABA对拟南芥种子萌发的影响 | 第57-58页 |
3.3.3 PLDγ及ABA对干旱胁迫下拟南芥膜系统的影响 | 第58页 |
3.3.4 PLDγ及ABA对干旱胁迫下拟南芥渗透调节物质的影响 | 第58-59页 |
3.3.5 讨论 | 第59-61页 |
第4章 结论与展望 | 第61-62页 |
附录1 :中间片段第一次测序结果 | 第62页 |
附录2 :中间片段第二次测序结果 | 第62页 |
附录3 :中间片段拼接序列 | 第62-63页 |
附录4 :3′RACE测序结果 | 第63-64页 |
附录5 :5′RACE测序结果 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
攻读硕士研究生期间取得的科研成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |