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辅阻遏子LUH调控铝胁迫抑制拟南芥根伸长的机理分析

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第12-32页
    1. 酸性土壤和铝毒害第12-13页
    2. 植物的铝毒害第13-15页
        2.1 植物铝毒害的症状第13-14页
        2.2 植物铝毒害的作用位点第14-15页
    3. 植物对铝的耐受机制第15-22页
        3.1 植物耐铝的内部忍耐机制第17-20页
        3.2 植物耐铝的外部排斥机制第20-22页
    4. 细胞壁与铝毒害第22-26页
        4.1 铝毒害对细胞壁的影响第22-24页
        4.2 细胞壁在植物抗铝中的作用第24-26页
    5. LUH (MUM1)基因在植物体内的角色和作用第26-28页
        5.1 LUH基因调节种子黏胶的释放和甲酯化的程度第26-27页
        5.2 LUH和SLK、SEU在非生物胁迫中的互作第27-28页
    6. 果胶甲酯酶抑制子对果胶甲酯化的影响第28-30页
    7. 研究目的与意义第30-32页
第二章 材料和方法第32-52页
    1. 实验材料和试剂第32-38页
        1.1 植物材料和生长条件第32页
        1.2 菌株和载体第32页
        1.3 药品试剂和相关配制第32-38页
    2. 实验方法第38-52页
        2.1 T-DNA插入突变体的PCR鉴定第38-39页
        2.2 拟南芥种子的灭菌第39-40页
        2.3 载体构建第40-45页
        2.4 农杆菌介导的拟南芥转化第45-46页
        2.5 转基因植株的筛选第46页
        2.6 RNA的提取和反转录成第一链cDNA第46-49页
        2.7 对根系进行的染色实验第49-50页
        2.8 拟南芥根系总铝含量测定和铝分级测定第50页
        2.9 果胶甲酯化程度的免疫荧光分析第50页
        2.10 拟南芥根系细胞壁的提取第50-51页
        2.11 果胶糖醛酸含量测定第51页
        2.12 果胶甲酯化程度测定第51-52页
第三章 实验结果和分析第52-84页
    1. 突变体的鉴定第52-54页
        1.1 luh4和luh3突变体的鉴定第52页
        1.2 其它突变体纯系的鉴定第52页
        1.3 luh4和luh3突变体的插入位点分析第52-53页
        1.4 其它突变体的插入位点分析第53页
        1.5 LUH基因在不同突变体中的表达分析第53-54页
    2. LUH超表达转基因系的构建第54-55页
    3. luh突变体的表型分析第55-61页
        3.1 luh突变体对铝具有明显的抗性第55-57页
        3.2 luh突变体在其它金属离子胁迫下没有明显的表型第57-58页
        3.3 luh突变体没有依赖于pH的表型第58-59页
        3.4 LUH基因受铝胁迫抑制表达下调第59-60页
        3.5 35S:GFP:LUH转基因植株对铝处理没有明显表型第60-61页
    4. luh突变体在铝胁迫条件下结合了更少的铝第61-65页
        4.1 铝处理后的Morin染色实验显示luh突变体结合铝含量较低第61-62页
        4.2 铝处理后的苏木精染色实验显示luh突变体结合铝含量较低第62-63页
        4.3 铝处理后,Col野生型和luh突变体的Al含量测定第63-64页
        4.4 luh结合铝较少的原因是细胞壁结合的铝明显低于野生型第64-65页
    5. 黏胶的量并不是导致luh突变体铝抗性较高的原因第65-68页
        5.1 luh突变体和野生型中黏胶的量没有明显差异第65-66页
        5.2 mum2突变体和mum4突变体没有抗铝胁迫的表型第66-68页
    6. LUH基因突变导致突变体中果胶甲酯化程度增强第68-71页
        6.1 免疫荧光分析显示luh突变体中果胶甲酯化程度增强第68-69页
        6.2 定量检测显示luh突变体中果胶甲酯化程度高于野生型第69-71页
    7. luh突变体的表达谱分析第71-75页
        7.1 luh突变体中与Al抗性相关的基因表达分析第71-72页
        7.2 luh突变体表达谱分析及验证第72-75页
    8. pme46突变体的表型分析和铝含量测定第75-78页
        8.1 pme46突变体对铝更为敏感第75页
        8.2 pme46突变体对铝敏感因为其细胞壁结合的铝比Col野生型更多第75-78页
    9. LUH与SLK调控PME46基因的表达第78-84页
        9.1 slk突变体的表型分析第78-82页
        9.2 slk2-1突变体中PME46的表达上升第82-84页
第四章 讨论第84-86页
附录第86-88页
参考文献第88-98页
致谢第98-99页
学位论文评阔及答辩情况表第99页

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