摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第12-32页 |
1. 酸性土壤和铝毒害 | 第12-13页 |
2. 植物的铝毒害 | 第13-15页 |
2.1 植物铝毒害的症状 | 第13-14页 |
2.2 植物铝毒害的作用位点 | 第14-15页 |
3. 植物对铝的耐受机制 | 第15-22页 |
3.1 植物耐铝的内部忍耐机制 | 第17-20页 |
3.2 植物耐铝的外部排斥机制 | 第20-22页 |
4. 细胞壁与铝毒害 | 第22-26页 |
4.1 铝毒害对细胞壁的影响 | 第22-24页 |
4.2 细胞壁在植物抗铝中的作用 | 第24-26页 |
5. LUH (MUM1)基因在植物体内的角色和作用 | 第26-28页 |
5.1 LUH基因调节种子黏胶的释放和甲酯化的程度 | 第26-27页 |
5.2 LUH和SLK、SEU在非生物胁迫中的互作 | 第27-28页 |
6. 果胶甲酯酶抑制子对果胶甲酯化的影响 | 第28-30页 |
7. 研究目的与意义 | 第30-32页 |
第二章 材料和方法 | 第32-52页 |
1. 实验材料和试剂 | 第32-38页 |
1.1 植物材料和生长条件 | 第32页 |
1.2 菌株和载体 | 第32页 |
1.3 药品试剂和相关配制 | 第32-38页 |
2. 实验方法 | 第38-52页 |
2.1 T-DNA插入突变体的PCR鉴定 | 第38-39页 |
2.2 拟南芥种子的灭菌 | 第39-40页 |
2.3 载体构建 | 第40-45页 |
2.4 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第45-46页 |
2.5 转基因植株的筛选 | 第46页 |
2.6 RNA的提取和反转录成第一链cDNA | 第46-49页 |
2.7 对根系进行的染色实验 | 第49-50页 |
2.8 拟南芥根系总铝含量测定和铝分级测定 | 第50页 |
2.9 果胶甲酯化程度的免疫荧光分析 | 第50页 |
2.10 拟南芥根系细胞壁的提取 | 第50-51页 |
2.11 果胶糖醛酸含量测定 | 第51页 |
2.12 果胶甲酯化程度测定 | 第51-52页 |
第三章 实验结果和分析 | 第52-84页 |
1. 突变体的鉴定 | 第52-54页 |
1.1 luh4和luh3突变体的鉴定 | 第52页 |
1.2 其它突变体纯系的鉴定 | 第52页 |
1.3 luh4和luh3突变体的插入位点分析 | 第52-53页 |
1.4 其它突变体的插入位点分析 | 第53页 |
1.5 LUH基因在不同突变体中的表达分析 | 第53-54页 |
2. LUH超表达转基因系的构建 | 第54-55页 |
3. luh突变体的表型分析 | 第55-61页 |
3.1 luh突变体对铝具有明显的抗性 | 第55-57页 |
3.2 luh突变体在其它金属离子胁迫下没有明显的表型 | 第57-58页 |
3.3 luh突变体没有依赖于pH的表型 | 第58-59页 |
3.4 LUH基因受铝胁迫抑制表达下调 | 第59-60页 |
3.5 35S:GFP:LUH转基因植株对铝处理没有明显表型 | 第60-61页 |
4. luh突变体在铝胁迫条件下结合了更少的铝 | 第61-65页 |
4.1 铝处理后的Morin染色实验显示luh突变体结合铝含量较低 | 第61-62页 |
4.2 铝处理后的苏木精染色实验显示luh突变体结合铝含量较低 | 第62-63页 |
4.3 铝处理后,Col野生型和luh突变体的Al含量测定 | 第63-64页 |
4.4 luh结合铝较少的原因是细胞壁结合的铝明显低于野生型 | 第64-65页 |
5. 黏胶的量并不是导致luh突变体铝抗性较高的原因 | 第65-68页 |
5.1 luh突变体和野生型中黏胶的量没有明显差异 | 第65-66页 |
5.2 mum2突变体和mum4突变体没有抗铝胁迫的表型 | 第66-68页 |
6. LUH基因突变导致突变体中果胶甲酯化程度增强 | 第68-71页 |
6.1 免疫荧光分析显示luh突变体中果胶甲酯化程度增强 | 第68-69页 |
6.2 定量检测显示luh突变体中果胶甲酯化程度高于野生型 | 第69-71页 |
7. luh突变体的表达谱分析 | 第71-75页 |
7.1 luh突变体中与Al抗性相关的基因表达分析 | 第71-72页 |
7.2 luh突变体表达谱分析及验证 | 第72-75页 |
8. pme46突变体的表型分析和铝含量测定 | 第75-78页 |
8.1 pme46突变体对铝更为敏感 | 第75页 |
8.2 pme46突变体对铝敏感因为其细胞壁结合的铝比Col野生型更多 | 第75-78页 |
9. LUH与SLK调控PME46基因的表达 | 第78-84页 |
9.1 slk突变体的表型分析 | 第78-82页 |
9.2 slk2-1突变体中PME46的表达上升 | 第82-84页 |
第四章 讨论 | 第84-86页 |
附录 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
学位论文评阔及答辩情况表 | 第99页 |