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B-3多糖对RAW264.7细胞免疫调节活性的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 研究背景第12-18页
        1.1.1 多糖简介第12页
        1.1.2 不同来源多糖生物活性的研究概况第12-14页
        1.1.3 多糖的分离提取与结构分析第14-15页
        1.1.4 多糖免疫调节活性的研究进展第15-17页
        1.1.5 多糖抗肿瘤研究的研究进展第17页
        1.1.6 多糖作为免疫佐剂的研究进展第17-18页
    1.2 课题来源第18页
    1.3 本研究的目的与意义第18-20页
第2章 RAW264.7细胞增殖和吞噬能力的变化第20-26页
    2.1 前言第20页
    2.2 实验材料和仪器第20-21页
        2.2.1 实验材料第20-21页
        2.2.2 实验仪器第21页
    2.3 实验方法第21-24页
        2.3.1 RAW264.7细胞的培养第21-23页
        2.3.2 MTT法测定B-3多糖刺激的RAW264.7细胞的增殖第23页
        2.3.3 流式细胞仪测定RAW264.7细胞的吞噬能力第23-24页
    2.4 实验结果与分析第24-25页
        2.4.1 RAW264.7细胞的增殖变化第24页
        2.4.2 RAW264.7细胞吞噬能力的变化第24-25页
    2.5 本章小结第25-26页
第3章 培养上清细胞因子和NO的变化第26-34页
    3.1 前言第26页
    3.2 实验材料和仪器第26-27页
        3.2.1 实验材料第26-27页
        3.2.2 实验仪器第27页
    3.3 实验方法第27-29页
        3.3.1 RAW264.7细胞培养上清NO含量的测定第27页
        3.3.2 RAW264.7细胞培养上清TNFα和IL10含量的测定第27-28页
        3.3.3 TLR4抑制剂对NO分泌量的影响第28页
        3.3.4 小鼠腹腔巨噬细胞培养上清TNFα和IL10含量的测定第28-29页
    3.4 实验结果与分析第29-32页
        3.4.1 RAW264.7细胞培养上清NO分泌量的变化第29-30页
        3.4.2 RAW264.7细胞培养上清TNFα和IL10含量变化第30-31页
        3.4.3 小鼠腹腔巨噬细胞培养上清TNFα和IL10含量变化第31-32页
    3.5 本章小结第32-34页
第4章 Westernblot检测NF-κB的激活第34-40页
    4.1 前言第34页
    4.2 实验材料和仪器第34-35页
        4.2.1 实验材料第34-35页
        4.2.2 实验仪器第35页
    4.3 实验方法第35-38页
        4.3.1 B-3多糖处理RAW264.7细胞第35页
        4.3.2 提取蛋白样品第35-36页
        4.3.3 测定蛋白浓度第36页
        4.3.4 配制缓冲液和SDS-PAGE凝胶第36-37页
        4.3.5 制样、电泳、转膜以及抗体孵育第37-38页
        4.3.6 成像第38页
    4.4 实验结果与分析第38-39页
    4.5 本章小结第39-40页
第5章 RAW264.7细胞与B16细胞的共培养第40-44页
    5.1 前言第40页
    5.2 实验材料和仪器第40-41页
        5.2.1 实验材料第40页
        5.2.2 实验仪器第40-41页
    5.3 实验方法第41页
        5.3.1 RAW264.7细胞与B16细胞共培养第41页
        5.3.2 检测共培养的B16细胞的凋亡第41页
    5.4 实验结果与分析第41-43页
    5.5 本章小结第43-44页
第6章 荧光定量PCR检测Fas和FasL的表达第44-52页
    6.1 前言第44页
    6.2 实验材料和仪器第44-45页
        6.2.1 实验材料第44-45页
        6.2.2 实验仪器第45页
    6.3 实验方法第45-50页
        6.3.1 确定内参基因第45页
        6.3.2 设计合成相应基因的特异性引物第45-46页
        6.3.3 准备模板cDNA第46-47页
        6.3.4 普通PCR扩增内参基因GAPDH第47-48页
        6.3.5 确定内参基因和目标基因的最佳扩增条件第48-50页
        6.3.6 样品基因的扩增表达第50页
    6.4 实验结果与分析第50-51页
    6.5 本章小结第51-52页
第7章 数字基因表达谱第52-62页
    7.1 前言第52页
    7.2 实验材料和仪器第52-53页
        7.2.1 实验材料第52-53页
        7.2.2 实验仪器第53页
    7.3 实验方法第53-55页
        7.3.1 B-3多糖处理RAW264.7细胞第53页
        7.3.2 总RNA的提取第53-54页
        7.3.3 RNA质量的鉴定第54页
        7.3.4 测序第54-55页
        7.3.5 结果处理分析与功能注释第55页
    7.4 实验结果与分析第55-61页
        7.4.1 RNA质量的鉴定结果第55-56页
        7.4.2 DGE测序数据结果与差异表达基因第56-58页
        7.4.3 差异表达基因的GO富集分析第58-60页
        7.4.4 KEGG对信号通路的富集分析第60-61页
    7.5 本章小结第61-62页
结论第62-64页
参考文献第64-68页
攻读硕士学位期间所发表的论文第68-70页
致谢第70页

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