摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第10-26页 |
1.1 引言 | 第10-11页 |
1.2 核酸适配体 | 第11-12页 |
1.2.1 核酸适配体的历史与发展 | 第11页 |
1.2.2 核酸适配体的特点及优势 | 第11-12页 |
1.3 核酸适配体的筛选方法 | 第12-18页 |
1.3.1 SELEX技术简介 | 第12-13页 |
1.3.2 SELEX技术的分类 | 第13-18页 |
1.4 核酸适配体的应用 | 第18-25页 |
1.4.1 核酸适配体传感器 | 第18-21页 |
1.4.2 核酸适配体医疗 | 第21-23页 |
1.4.3 核酸适配体用于细胞代谢调控 | 第23-25页 |
1.5 研究内容与意义 | 第25-26页 |
第二章 耐药型多卵巢癌细胞A2780T的核酸适配体筛选与表征 | 第26-41页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-32页 |
2.2.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.2.2 细胞培养 | 第28页 |
2.2.3 1%琼脂糖凝胶的制备及凝胶成像 | 第28-29页 |
2.2.4 cell-SELEX筛选过程 | 第29-30页 |
2.2.5 流式细胞分析 | 第30页 |
2.2.6 激光共聚焦成像 | 第30页 |
2.2.7 核酸适配体对靶细胞结合解离常数的考察 | 第30-31页 |
2.2.8 蛋白酶消化实验 | 第31页 |
2.2.9 衣霉素对核酸适配体与细胞结合的影响实验 | 第31页 |
2.2.10 温度和二价离子对核酸适配体结合影响的考察 | 第31-32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-40页 |
2.3.1 靶细胞A2780T核酸适配体的筛选与选择性 | 第32-34页 |
2.3.2 核酸适配体HA5与HF3的序列优化 | 第34-37页 |
2.3.3 温度与二价离子对HF3-58与HA5-68的结合影响 | 第37-38页 |
2.3.4 蛋白酶和衣霉素对核酸适配体HF3-58和HA5-68结合力的影响 | 第38-39页 |
2.3.5 激光共聚焦成像 | 第39-40页 |
2.4 小结 | 第40-41页 |
第三章 核酸适配体HF3-58及HA5-68应用初探 | 第41-48页 |
3.1 前言 | 第41页 |
3.2 材料与方法 | 第41-44页 |
3.2.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.2.2 细胞培养 | 第42页 |
3.2.3 凝胶电泳成像 | 第42-43页 |
3.2.4 细胞毒性实验 | 第43页 |
3.2.5 圆二色光谱(CD光谱) | 第43页 |
3.2.6 核酸适配体在血清中的稳定性实验 | 第43页 |
3.2.7 温度对核酸适配体结合血清中靶细胞的影响 | 第43-44页 |
3.2.8 肝素对核酸适配体在血清中的结合影响实验 | 第44页 |
3.3 结果与讨论 | 第44-47页 |
3.3.1 HF3-58与HA5-68的CD光谱分析 | 第44页 |
3.3.2 血清中的稳定性实验 | 第44-46页 |
3.3.3 肝素对核酸适配体HF3-58和HA5-68的结合影响 | 第46页 |
3.3.4 HF3-58与HA5-68的细胞毒性 | 第46-47页 |
3.4 小结 | 第47-48页 |
第四章 核酸适配体的自组装“纳米火车”靶向肿瘤细胞 | 第48-56页 |
4.1 前言 | 第48-49页 |
4.2 材料与方法 | 第49-52页 |
4.2.1 实验材料 | 第49-51页 |
4.2.2 细胞培养 | 第51页 |
4.2.3 流式细胞分析 | 第51页 |
4.2.4 纳米火车HG1-7-NTrs的制备及载药 | 第51页 |
4.2.5 凝胶电泳成像 | 第51-52页 |
4.2.6 荧光光谱测定 | 第52页 |
4.2.7 细胞毒性实验 | 第52页 |
4.3 结果与讨论 | 第52-55页 |
4.3.1 纳米火车的构建及表征 | 第52-54页 |
4.3.2 纳米火车的载药及对细胞的杀伤作用 | 第54-55页 |
4.4 小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63页 |
攻读硕士期间发表或待发表的论文 | 第63页 |