| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-36页 |
| 1.1 植物花药发育 | 第15-20页 |
| 1.1.1 水稻花药发育分期 | 第15-16页 |
| 1.1.2 控制花药绒毡层发育的关键基因 | 第16-19页 |
| 1.1.3 控制植物花粉壁发育的关键基因 | 第19-20页 |
| 1.2 减数分裂机制研究的意义 | 第20-33页 |
| 1.2.1 减数分裂时期及特点 | 第20-23页 |
| 1.2.2 减数分裂重要事件 | 第23-24页 |
| 1.2.3 植物减数分裂同源重组机制 | 第24-25页 |
| 1.2.4 植物减数分裂相关重组蛋白 | 第25-28页 |
| 1.2.5 同源重组双链断裂修复模型 | 第28-29页 |
| 1.2.6 交叉形成 | 第29-31页 |
| 1.2.7 联会复合体 | 第31-32页 |
| 1.2.8 减数分裂进程 | 第32-33页 |
| 1.3 AAA蛋白的研究进展 | 第33-36页 |
| 1.3.1 AAA蛋白结构 | 第33-34页 |
| 1.3.2 微管切割活性的AAA蛋白 | 第34页 |
| 1.3.3 Fidgetin功能研究进展 | 第34-36页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
| 3 材料与方法 | 第37-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 3.1.2 田间种植 | 第37页 |
| 3.1.3 主要分子生物学试剂和仪器 | 第37页 |
| 3.1.4 载体和菌株 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-58页 |
| 3.2.1 育性调查 | 第38页 |
| 3.2.2 减数分裂染色体压片观察 | 第38-39页 |
| 3.2.3 中恢8015和fignl1突变体不同发育时期花药的半薄切片 | 第39-40页 |
| 3.2.4 扫描电镜观察 | 第40-41页 |
| 3.2.5 透射电镜观察 | 第41页 |
| 3.2.6 激光共聚焦观察胚囊的发育 | 第41-42页 |
| 3.2.7 水稻总DNA的提取 | 第42-43页 |
| 3.2.8 水稻各组织总RNA的提取 | 第43页 |
| 3.2.9 cDNA第一条链的合成 | 第43页 |
| 3.2.10 定量PCR | 第43-44页 |
| 3.2.11 分子标记的选择和开发 | 第44页 |
| 3.2.12 水稻隐性核不育基因的精细定位 | 第44-45页 |
| 3.2.13 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第45页 |
| 3.2.14 银染和结果记录 | 第45-46页 |
| 3.2.15 候选基因预测及测序分析 | 第46-47页 |
| 3.2.16 遗传转化载体的构建及遗传转化 | 第47-49页 |
| 3.2.16.1 互补载体的构建 | 第47页 |
| 3.2.16.2 GFP载体构建 | 第47-48页 |
| 3.2.16.3 Crispr/Cas9载体构建 | 第48页 |
| 3.2.16.4 原核表达载体的构建 | 第48页 |
| 3.2.16.5 酵母双杂载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.2.16.6 双分子荧光载体的构建 | 第49页 |
| 3.2.16.7 农杆菌介导的遗传转化 | 第49页 |
| 3.2.17 转基因植株的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.18 OsFIGNL1的进化分析 | 第50页 |
| 3.2.19 AAA结构域的原核表达及纯化 | 第50-51页 |
| 3.2.20 ATPase活性测定 | 第51页 |
| 3.2.21 亚细胞定位 | 第51-52页 |
| 3.2.22 烟草瞬时转化 | 第52-53页 |
| 3.2.23 酵母感受态细胞的制备 | 第53页 |
| 3.2.24 酵母双杂的转化 | 第53-58页 |
| 4 结果与分析 | 第58-87页 |
| 4.1 突变体fignl1和中恢8015的主要表型特征 | 第58-59页 |
| 4.2 雌蕊育性调查 | 第59页 |
| 4.3 野生型和fignl1突变体胚囊发育过程观察 | 第59-61页 |
| 4.4 fignl1花药发育过程半薄切片观察 | 第61-63页 |
| 4.5 fignl1成熟花药扫描电镜观察 | 第63-64页 |
| 4.6 fignl1花药透射电镜观察 | 第64-65页 |
| 4.7 fignl1突变体雄配子减数分裂染色体观察 | 第65-68页 |
| 4.8 fignl1突变体减数分裂进程延长 | 第68-69页 |
| 4.9 fignl1突变体的遗传分析 | 第69页 |
| 4.10 OsFIGNL1基因的初定位和精细定位 | 第69-71页 |
| 4.11 候选区域测序、基因的功能预测及筛选 | 第71-73页 |
| 4.12 OsFIGNL1同源蛋白ATPase结构域具有较高的保守性 | 第73-74页 |
| 4.13 转基因功能互补试验 | 第74-75页 |
| 4.14 转基因敲除植株的表型鉴定 | 第75-77页 |
| 4.15 OsFIGNL1基因的表达谱分析 | 第77-78页 |
| 4.16 OsFIGNL1的亚细胞定位 | 第78-79页 |
| 4.17 水稻AAA结构域的ATP酶活分析 | 第79-80页 |
| 4.18 OsFIGNL1进化分析 | 第80-81页 |
| 4.19 野生型和fignl1突变体减数分裂相关基因的表达 | 第81-82页 |
| 4.20 OsFIGNL1与RAD51和DMC1在体内互作 | 第82-87页 |
| 5 讨论 | 第87-94页 |
| 5.1 fignl1雄配子败育的时期和原因分析 | 第87-88页 |
| 5.2 OsFIGNL1控制雄配子减数分裂的进程 | 第88-89页 |
| 5.3 OsFIGNL1同源蛋白的功能特性 | 第89-90页 |
| 5.4 fignl1突变体在减数分裂过程中形成大量的染色体碎片 | 第90-91页 |
| 5.5 OsFIGNL1参与减数分裂同源重组 | 第91-94页 |
| 6 全文总结与展望 | 第94-97页 |
| 6.1 全文总结 | 第94-95页 |
| 6.2 展望 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-112页 |
| 附录1 | 第112-114页 |
| 附录2 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
