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核地杖菌漆酶基因ShLAC1和桑树几丁质识别受体的功能研究

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 文献综述第16-30页
    1.1 概述第16-17页
    1.2 桑椹菌核病第17-19页
        1.2.1 桑椹肥大性菌核病第17-18页
        1.2.2 桑椹小粒性菌核病第18-19页
        1.2.3 桑椹缩小性菌核病第19页
    1.3 真菌黑色素第19-21页
        1.3.1 黑色素性质和作用第19-20页
        1.3.2 黑色素的分类第20页
        1.3.3 黑色素与病原菌的致病性相关第20-21页
        1.3.4 DHN黑色素生物合成第21页
    1.4 桑椹菌核病的发生和防治第21-23页
        1.4.1 桑椹菌核病的发生第21-22页
        1.4.2 桑椹菌核病的防控第22-23页
    1.5 菌核类病原菌的致病因子—草酸第23页
    1.6 植物先天免疫反应第23-29页
        1.6.1 PTI反应第25-26页
        1.6.2 PRRs识别信号的传递第26-28页
        1.6.3 ETI反应第28-29页
    1.7 结语第29-30页
第二章 引言第30-32页
    2.1 研究目的和意义第30页
    2.2 主要研究内容第30页
    2.3 研究路线第30-32页
第三章 核地杖菌黑色素生物合成相关基因ShLAC1的功能研究第32-56页
    3.1 材料,试剂和仪器第32-34页
        3.1.1 菌株第32页
        3.1.2 质粒载体第32页
        3.1.3 主要试剂第32-33页
        3.1.4 主要的培养基和溶剂配制第33-34页
        3.1.5 主要仪器第34页
    3.2 实验方法第34-42页
        3.2.1 丝状真菌基因组DNA的提取(CTAB提取法)第34-35页
        3.2.2 丝状真菌总RNA的提取第35-36页
        3.2.3 cDNA第一链的合成第36页
        3.2.4 基因克隆第36-38页
        3.2.5 黑色素提取第38-39页
        3.2.6 黑色素产量(滤液中)的测定第39页
        3.2.7 GC-MS鉴定核地杖菌黑色素类型第39页
        3.2.8 农杆菌感受态细胞的制备第39-40页
        3.2.9 农杆菌感受态细胞的转化步骤如下第40页
        3.2.10 农杆菌介导的核地杖菌转化第40页
        3.2.11 草酸色谱分析第40页
        3.2.12 ShLAC1基因沉默载体构建第40-41页
        3.2.13 本部分内容所用到的引物第41-42页
        3.2.14 基因的生物信息学分析第42页
    3.3 结果与分析第42-54页
        3.3.1 核地杖菌的形态特征第42-45页
        3.3.2 核地杖菌的黑色素的鉴定第45页
        3.3.3 核地杖菌ShLAC1的克隆第45-47页
        3.3.4 ShLAC1沉默转化子的分析第47-51页
        3.3.5 ShLAC1沉默转化子对致病性的影响第51-54页
    3.4 总结与讨论第54-56页
第四章 感染桑椹菌核病桑椹的转录组分析第56-72页
    4.1 实验材料和试剂第56页
        4.1.1 桑树材料第56页
        4.1.2 菌种第56页
    4.2 实验方法第56-57页
        4.2.1 接种和取材第56-57页
        4.2.2 RNA提取第57页
        4.2.3 测序分析第57页
    4.3 结果与分析第57-69页
        4.3.1 转录组的测序和组装第57-58页
        4.3.2 转录组的功能注释与基因本体(GeneOntology,GO)分类第58-60页
        4.3.3 差异表达基因(DEGs)的分析第60-63页
        4.3.4 防御相关KEGG代谢途径中DEGs分析第63-65页
        4.3.5 植物—病原物互作相关基因的表达第65-69页
    4.4 总结与讨论第69-72页
第五章 桑树几丁质识别受体的功能研究第72-100页
    5.1 材料第72-76页
        5.1.1 植物第72页
        5.1.2 菌株第72页
        5.1.3 载体第72页
        5.1.4 主要试剂第72-73页
        5.1.5 主要培养基和溶剂配制第73-76页
        5.1.6 主要仪器第76页
    5.2 实验方法第76-84页
        5.2.1 红果二号幼苗处理第76页
        5.2.2 植物总RNA提取第76-77页
        5.2.3 cDNA第一链的合成第77页
        5.2.4 酵母双杂交(Y2H)检测第77-78页
        5.2.5 亚细胞定位第78页
        5.2.6 双分子荧光互作(BiFC)第78页
        5.2.7 MmLYP1和MmLYK2多克隆抗体制备第78-80页
        5.2.8 植物蛋白提取第80-81页
        5.2.9 Westernblotting第81页
        5.2.10 多糖亲和沉淀分析第81-82页
        5.2.11 免疫共沉淀(Co-IP)第82-83页
        5.2.12 本部分内容所用到的引物第83-84页
        5.2.13 生物信息学分析第84页
    5.3 结果与分析第84-98页
        5.3.1 LysM受体蛋白的鉴定第84-85页
        5.3.2 MmLYP1是几丁质识别受体第85-87页
        5.3.3 MmLYK2可能是MmLYP1识别的几丁质信号的下游蛋白第87-91页
        5.3.4 MmLYP1和MmLYK2亚细胞定位第91-93页
        5.3.5 MmLYP1和MmLYK2的相互作用第93-95页
        5.3.6 MmLYK2的LysM1是MmLYP1和MmLYK2互作的关键基序第95-98页
    5.4 总结与讨论第98-100页
第六章 综合与结论第100-103页
论文创新点第103-105页
参考文献第105-117页
缩略词表第117-119页
附录第119-123页
在读期间发表文章及参研课题第123-125页
致谢第125页

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