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miRNA-338-5p抑制胶质瘤增殖、侵袭的作用及靶向CTBP2蛋白的核素显像研究

前言第4-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
英文缩略词表第16-18页
第1章 研究背景第18-32页
    1.1 引言第18页
    1.2 miRNA的基因结构及生物合成第18-22页
        1.2.1 miRNA基因转录和转录产物剪切第19-21页
        1.2.2 miRNA前体的转运出核第21页
        1.2.3 miRNA转运出核后PRE-miRNA分子剪切和miRNA成熟过程第21-22页
    1.3 miRNA分子发挥生物学作用的潜在分子机制第22-23页
    1.4 miRNA与肿瘤第23-27页
        1.4.1 miRNA与肿瘤的发生第23-24页
        1.4.2 miRNA与肿瘤干细胞(CSC)的潜在关联第24页
        1.4.3 肿瘤相关的miRNA信号传导第24-25页
        1.4.4 miRNA在肿瘤血管生成中的作用第25-26页
        1.4.5 miRNA在肿瘤播散转移过程中的作用第26页
        1.4.6 miRNA在肿瘤耐药进程中的作用和地位第26-27页
    1.5 miRNA分子用药肿瘤诊断和治疗评价第27-28页
        1.5.1 miRNA分子与恶性肿瘤诊断第27-28页
        1.5.2 miRNA分子与恶性肿瘤精准治疗第28页
    1.6 脑胶质瘤与miRNA第28-32页
        1.6.1 miRNA分子在恶性神经胶质瘤中的表达情况第28-29页
        1.6.2 miRNA分子在脑胶质瘤分子病理诊断中的作用第29-30页
        1.6.3 miRNA分子在胶质瘤治疗中的作用第30-31页
        1.6.4 miRNA分子在胶质瘤预后判断中的作用第31-32页
第2章 miRNA3885P在脑胶质瘤中的表达与临床意义第32-42页
    2.1 实验材料第33-34页
        2.1.1 主要实验耗材和常规试剂第33-34页
        2.1.2 实验仪器及设备第34页
    2.2 常规检测技术第34-38页
        2.2.1 临床标本的组织病理学检测第34-35页
        2.2.2 临床标本样本的收集与保存第35页
        2.2.3 临床样本总RNA提取第35页
        2.2.4 实时荧光定量PCR第35-37页
        2.2.5 统计学分析第37-38页
    2.3 实验结果第38-39页
        2.3.1 RT-PCR分析第38-39页
    2.4 讨论第39-42页
第3章 miRNA3885P调控胶质瘤増殖与侵袭的体外机制研究第42-64页
    3.1 实验材料第42-43页
        3.1.1 主要试剂第42-43页
        3.1.2 实验仪器及设备第43页
    3.2 实验方法第43-54页
        3.2.1 细胞培养第43-45页
        3.2.2 细胞转染第45页
        3.2.3 细胞克隆形成实验第45-47页
        3.2.4 胶质瘤细胞增殖检测(CCK-8 染色法)第47-48页
        3.2.5 细胞周期的单染检测方法第48-49页
        3.2.6 胶质瘤细胞侵袭实验第49-50页
        3.2.7 结合位点预测分析第50页
        3.2.8 荧光素酶报告基因实验第50-51页
        3.2.9 WESTERN BLOT第51-53页
        3.2.10 统计学分析第53-54页
    3.3 实验结果第54-60页
        3.3.1 miR3385P对胶质瘤细胞增殖能力的影响生长情况第54页
        3.3.2 MIR3385P影响胶质瘤的细胞周期第54-56页
        3.3.3 细胞侵袭实验结果第56-57页
        3.3.4 作用位点预测及双荧光素酶报告基因实验结果第57页
        3.3.5 WESTERN BLOT检测靶基因CTBP2的表达水平和变化趋势第57-59页
        3.3.6 胶质瘤细胞内的MIR3385P诱导CTBP2介导细胞增殖和侵袭的抑制第59-60页
    4 讨论第60-64页
第4章 应用噬菌体展示技术筛选CTBP2特异性亲和多肽第64-78页
    4.1 实验材料和研究方法第66-73页
        4.1.1 实验材料和检测仪器第66-67页
        4.1.2 实验试剂和配液第67-68页
        4.1.3 实验方法第68-73页
    4.2 实验检测结果第73-76页
        4.2.1 合成CTBP2亲和短肽第73-74页
        4.2.2 应用CTBP2亲和肽进行噬菌体肽库筛选第74-75页
        4.2.3 特异性亲和短肽的氨基酸序列分析第75-76页
        4.2.4 噬菌体肽段和CTBP2特异序列肽解离常数(KD值)的测定第76页
    4.3 结果分析与讨论第76-78页
第5章 多肽核素标记及SPECT显像研究第78-86页
    5.1 实验材料与方法第78页
        5.1.1 实验材料与试剂第78页
    5.2 实验材料和研究方法第78-80页
        5.2.1 ~(99M)Tc-HYNIC-TCB(TRICINE)(TPPTS)的制备第78-79页
        5.2.2 荷瘤鼠模型的SPECT扫描显像第79页
        5.2.3 荷瘤裸鼠体内~(99M)Tc标记HYNIC-TCB的放射性分布(生物学分布)第79-80页
    5.3 体内和体外实验结果第80-82页
        5.3.1 高效液相方法测定放射性药物标记率第80页
        5.3.2 荷瘤鼠SPECT扫描结果第80-81页
        5.3.3 ~(99M)Tc-HYNIC-TCB在荷瘤裸鼠体内生物分布第81-82页
    5.4 讨论第82-84页
    第6章 结论第84-86页
参考文献第86-96页
作者简介第96-98页
攻读博士期间科研成果第98-100页
致谢第100页

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