摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
前言 | 第10-13页 |
第一部分 miR-551b-3p在胃癌中的表达及临床意义 | 第13-26页 |
1 材料 | 第13-16页 |
1.1 细胞株 | 第13页 |
1.2 胃癌组织标本 | 第13页 |
1.3 主要试剂 | 第13-14页 |
1.4 主要仪器 | 第14-15页 |
1.5 主要溶液的配制 | 第15-16页 |
2 方法 | 第16-20页 |
2.1 贴壁细胞的培养 | 第16-17页 |
2.2 细胞和组织总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.3 实时荧光定量PCR检测胃癌细胞和组织中miR-551b-3p的表达 | 第18-19页 |
2.4 统计学处理 | 第19-20页 |
3 结果 | 第20-23页 |
3.1 miR-551b-3p在胃癌细胞中低表达 | 第20页 |
3.2 miR-551b-3p在胃癌组织中低表达 | 第20-21页 |
3.3 miR-551b-3p表达与患者临床病理参数的相关性 | 第21-23页 |
4 讨论 | 第23-26页 |
第二部分 miR-551b-3p对胃癌生物学行为的调控作用 | 第26-43页 |
1 材料 | 第26-28页 |
1.1 慢病毒载体 | 第26-27页 |
1.2 细胞株 | 第27页 |
1.3 实验动物 | 第27页 |
1.4 主要试剂 | 第27页 |
1.5 主要仪器 | 第27-28页 |
1.6 主要溶液的配制方法 | 第28页 |
2 方法 | 第28-33页 |
2.1 构建miR-551b-3p功能获得的细胞模型 | 第28-30页 |
2.2 过表达miR-551b-3p后的体外功能实验 | 第30-32页 |
2.3 过表达miR-551b-3p后的体内实验 | 第32页 |
2.4 统计学处理 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-40页 |
3.1 胃癌细胞miR-551b-3p过表达模型的构建 | 第33-34页 |
3.2 miR-551b-3p抑制胃癌细胞体外增殖 | 第34-36页 |
3.3 miR-551b-3p促进胃癌细胞凋亡 | 第36-37页 |
3.4 miR-551b-3p抑制胃癌细胞体外迁移和侵袭 | 第37-39页 |
3.5 miR-551b-3p抑制胃癌细胞体内生长 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第三部分 miR-551b-3p参与胃癌发生发展的机制研究 | 第43-68页 |
1 材料 | 第43-49页 |
1.1 质粒 | 第43-45页 |
1.2 细胞株 | 第45页 |
1.3 主要试剂 | 第45-47页 |
1.4 主要仪器 | 第47页 |
1.5 主要溶液的配制方法 | 第47-49页 |
2 方法 | 第49-54页 |
2.1 miR-551b-3p靶基因的筛选 | 第49页 |
2.2 荧光素酶报告基因系统检测miR-551b-3p与TMPRSS4的结合 | 第49-51页 |
2.3 Westernblot检测miR-551b-3p对胃癌细胞中TMPRSS4表达的影响 | 第51-52页 |
2.4 生物信息学预测miR-551b-3p相关的lncRNA | 第52页 |
2.5 荧光素酶报告基因系统检测lncRNASMARCC2与miR-551b-3p的结合 | 第52页 |
2.6 实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中lncRNASMARCC2的表达.. | 第52-53页 |
2.7 Westernblot检测lncRNASMARCC2对胃癌细胞TMPRSS4表达的影响 | 第53页 |
2.8 LncRNASMARCC2对胃癌细胞增殖、迁移的影响 | 第53页 |
2.9 统计学处理 | 第53-54页 |
3 结果 | 第54-63页 |
3.1 miR-551b-3p的可能靶基因-TMPRSS | 第54-55页 |
3.2 TMPRSS4是miR-551b-3p的靶基因 | 第55-56页 |
3.3 miR-551b-3p负性调控TMPRSS4的表达 | 第56页 |
3.4 生物信息学筛选miR-551b-3p相关的lncRNA | 第56-57页 |
3.5 LncRNASMARCC2在胃癌细胞中高表达 | 第57页 |
3.6 LncRNASMARCC2与miR-551b-3p相互结合 | 第57-58页 |
3.7 LncRNASMARCC2负性调控miR-551b-3p的表达 | 第58-59页 |
3.8 LncRNASMARCC2调控TMPRSS4的表达 | 第59-61页 |
3.9 LncRNASMARCC2促进胃癌细胞体外增殖和迁移 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
附录 | 第79-81页 |
英文缩略词索引 | 第81-83页 |
在学期间主要科研工作 | 第83-84页 |
文献回顾 | 第84-106页 |
参考文献 | 第96-106页 |
致谢 | 第106页 |