中文摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略词表 | 第11-17页 |
第一章 前言 | 第17-39页 |
一、研究背景 | 第17-26页 |
1.1 结直肠癌研究现状 | 第17-23页 |
1.2 衣被蛋白研究现状 | 第23-25页 |
1.3 常山酮抗肿瘤研究进展 | 第25-26页 |
二、研究目的 | 第26页 |
三、研究内容 | 第26-27页 |
四、技术路线 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-39页 |
第二章 结直肠癌细胞株及结直肠肿瘤组织中COPB2的表达 | 第39-57页 |
一、实验材料 | 第39-42页 |
1.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
1.2 仪器与设备 | 第40-41页 |
1.3 试剂配制 | 第41-42页 |
二、实验方法 | 第42-47页 |
2.1 RT-qPCR检测结直肠癌细胞株中COPB2的表达 | 第42-46页 |
2.2 免疫组化检测COPB2在结直肠癌患者癌组织及癌旁组织中的表达 | 第46-47页 |
三、统计学方法 | 第47-48页 |
四、实验结果 | 第48-54页 |
4.1 结直肠癌细胞株中COPB2的表达 | 第48页 |
4.2 COPB2在结直肠癌及癌旁组织中的表达 | 第48-54页 |
五、讨论 | 第54页 |
六、小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第三章 慢病毒介导的siRNA沉默结直肠癌细胞中COPB2基因 | 第57-72页 |
一、实验材料 | 第57-62页 |
1.1 试剂与材料 | 第57-58页 |
1.2 设备与仪器 | 第58-59页 |
1.3 主要试剂配制 | 第59-62页 |
二、实验方法 | 第62-65页 |
2.1 实验分组 | 第62页 |
2.2 载体构建及病毒包装 | 第62-63页 |
2.3 慢病毒包装的COPB2 siRNA感染目的细胞 | 第63页 |
2.4 RT-qPCR及Western blot检测目的细胞慢病毒感染后COPB2表达 | 第63-65页 |
三、统计学方法 | 第65页 |
四、实验结果 | 第65-68页 |
4.1 荧光显微镜观察RKO及HCT116细胞中慢病毒感染 | 第65-67页 |
4.2 RT-qPCR和Western blot检测RKO及HCT116细胞中慢病毒感染 | 第67-68页 |
五、讨论 | 第68-69页 |
六、小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-72页 |
第四章 COPB2对结直肠癌细胞增殖及细胞周期的影响 | 第72-92页 |
一、实验材料 | 第72-75页 |
1.1 材料及试剂 | 第72-73页 |
1.2 设备及仪器 | 第73-74页 |
1.3 主要试剂配制 | 第74-75页 |
二、实验方法 | 第75-78页 |
2.1 COPB2对细胞增殖的影响 | 第75-77页 |
2.2 COPB2对细胞克隆形成能力的影响 | 第77页 |
2.3 流式细胞仪检测COPB2对细胞周期的影响 | 第77-78页 |
2.4 Western Blot检测COPB2对细胞周期相关蛋白的影响 | 第78页 |
三、统计学方法 | 第78-79页 |
四、实验结果 | 第79-86页 |
4.1 COPB2基因沉默对结直肠癌细胞增殖能力的影响 | 第79-82页 |
4.2 COPB2基因沉默对结直肠癌细胞克隆形成能力的影响 | 第82-84页 |
4.3 COPB2基因沉默诱导结直肠癌细胞周期阻滞 | 第84页 |
4.4 COPB2基因沉默影响结直肠癌细胞周期相关蛋白表达 | 第84-86页 |
五、讨论 | 第86-88页 |
六、小结 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
第五章 COPB2基因对结直肠癌细胞凋亡及相关信号通路的影响 | 第92-114页 |
一、实验材料 | 第92-94页 |
1.1 材料及试剂 | 第92-93页 |
1.2 设备及仪器 | 第93-94页 |
二、实验方法 | 第94-98页 |
2.1 COPB2基因沉默对结直肠癌细胞凋亡的影响 | 第94-95页 |
2.2 COPB2基因对结直肠癌细胞凋亡相关通路的影响 | 第95-98页 |
三、统计学方法 | 第98页 |
四、实验结果 | 第98-107页 |
4.1 COPB2基因沉默影响结直肠癌细胞凋亡 | 第98-102页 |
4.2 COPB2基因对结直肠癌细胞JNK/c-Jun信号通路的影响 | 第102-107页 |
五、讨论 | 第107-109页 |
六、小结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-114页 |
第六章 COPB2基因沉默对常山酮抑制结直肠癌细胞增殖敏感性的影响 | 第114-130页 |
一、实验材料 | 第114-115页 |
1.1 材料与试剂 | 第114-115页 |
1.2 设备及仪器 | 第115页 |
1.3 主要试剂配制 | 第115页 |
二、实验方法 | 第115-117页 |
2.1 常山酮对结直肠癌细胞增殖的影响 | 第115-116页 |
2.2 MTT及CCK8检测结直肠癌细胞对常山酮抑制增殖作用的敏感性 | 第116-117页 |
2.3 流式细胞仪检测常山酮对结直肠癌细胞周期的影响 | 第117页 |
三、统计学方法 | 第117页 |
四、实验结果 | 第117-125页 |
4.1 常山酮对结直肠癌细胞增殖的影响 | 第117-119页 |
4.2 COPB2基因沉默提高结直肠癌细胞对常山酮抑制增殖的敏感性 | 第119-124页 |
4.3 COPB2基因沉默后常山酮对结直肠癌细胞细胞周期的影响 | 第124-125页 |
五、讨论 | 第125页 |
六、小结 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-130页 |
第七章 结论 | 第130-132页 |
一、主要结论 | 第130页 |
二、特色与创新 | 第130页 |
三、局限性与不足 | 第130-131页 |
四、研究展望 | 第131-132页 |
攻博士学位期间发表论文及参与课题 | 第132-133页 |
致谢 | 第133页 |