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红松多酚分离鉴定及抗氧化抗癌功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第15-34页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第15页
    1.2 多酚的类型与结构特征第15-18页
        1.2.1 非黄酮类多酚第16-17页
        1.2.2 黄酮类多酚第17-18页
    1.3 多酚的生物活性第18-21页
        1.3.1 抗氧化性第18-19页
        1.3.2 抗辐射性第19-20页
        1.3.3 抗癌活性第20-21页
        1.3.4 增强机体免疫性第21页
        1.3.5 其他生物活性第21页
    1.4 多酚的分离纯化及结构鉴定第21-29页
        1.4.1 多酚类化合物的提取第21-24页
        1.4.2 多酚类化合物的纯化工艺第24-26页
        1.4.3 结构鉴定第26-29页
    1.5 氧化诱导损伤的产生机制和预防机制第29-32页
        1.5.1 多酚类化合物抗氧化途径第29-30页
        1.5.2 多酚类抗辐射作用及修复途径第30-31页
        1.5.3 多酚类化合物抗菌、抗癌机制及作用途径第31页
        1.5.4 天然多酚类物质抗氧化性质与抗癌作用的相关性第31-32页
    1.6 主要研究内容第32-34页
2 酶法辅助松多酚提取工艺优化第34-43页
    2.1 实验材料与仪器第34-35页
        2.1.1 材料与试剂第34页
        2.1.2 实验仪器第34-35页
    2.2 实验方法第35-36页
        2.2.1 工艺流程第35页
        2.2.2 红松树皮多酚提取工艺的单因素试验第35页
        2.2.3 红松树皮多酚提取工艺的优化试验第35页
        2.2.4 松树皮多酚得率的测定第35-36页
    2.3 数据处理第36页
    2.4 单因素试验结果及分析第36-38页
        2.4.1 加酶量对多酚得率的影响第36页
        2.4.2 酶解时间对多酚得率的影响第36-37页
        2.4.3 酶解温度对多酚得率的影响第37-38页
        2.4.4 乙醇添加量对多酚得率的影响第38页
    2.5 响应面优化试验第38-41页
    2.6 本章小结第41-43页
3 松多酚分离纯化及结构鉴定第43-59页
    3.1 实验材料与仪器第43-44页
        3.1.1 实验材料与试剂第43-44页
        3.1.2 实验仪器第44页
    3.2 实验方法第44-47页
        3.2.1 红松多酚样品溶液的制备第44页
        3.2.2 大孔树脂预处理和装柱第44-45页
        3.2.3 大孔树脂的筛选第45-46页
        3.2.4 D101大孔树脂吸附分离红松多酚条件优化第46页
        3.2.5 红松多酚二级纯化第46-47页
        3.2.6 红松多酚结构鉴定第47页
    3.3 实验结果与分析第47-57页
        3.3.1 不同大孔树脂静态吸附、解吸红松多酚性能比较第47-48页
        3.3.2 不同大孔树脂对红松多酚静态吸附和解吸动力学第48-49页
        3.3.3 D101大孔树脂吸附分离红松多酚条件优化第49-53页
        3.3.4 制备型高效液相色谱法纯化PK-40第53页
        3.3.5 结构的鉴定第53-57页
    3.4 本章小结第57-59页
4 PKB对氧化应激的防御作用第59-74页
    4.1 实验材料与试剂第59-60页
        4.1.1 实验材料第59-60页
    4.2 实验方法第60-65页
        4.2.1 PKB对DPPH·自由基的清除能力第60-61页
        4.2.2 PKB对ABTS+自由基体系的清除能力第61-62页
        4.2.3 PKB对羟基自由基体系的清除能力第62页
        4.2.4 PKB对超氧阴离子自由基体系的清除能力第62-63页
        4.2.5 PKB总还原力的测定第63页
        4.2.6 辐射诱导氧化损伤实验动物分组及模型建立第63-64页
        4.2.7 体内MDA及氧化还原酶系实验第64-65页
    4.3 结果与分析第65-73页
        4.3.1 PKB对非生理性自由基的清除活性第65-66页
        4.3.2 PKB对生理性自由基的清除活性第66-68页
        4.3.3 PKB总还原力的测定结果第68-69页
        4.3.4 PKB对体内相关氧化酶活力的影响第69-73页
    4.4 本章小结第73-74页
5 PKB对氧化损伤小鼠免疫功能的影响第74-82页
    5.1 实验材料与仪器第74-75页
        5.1.1 实验材料第74页
        5.1.2 实验试剂第74页
        5.1.3 实验仪器第74-75页
    5.2 实验方法第75-76页
        5.2.1 实验动物分组及模型建立第75页
        5.2.2 外周血象和白细胞损伤分析第75页
        5.2.3 免疫脏器指数的测定第75页
        5.2.4 小鼠碳廓清指数的测定第75-76页
        5.2.5 小鼠脾淋巴细胞周期分析第76页
    5.3 实验结果与讨论第76-81页
        5.3.1 PKB对体重的影响第76-77页
        5.3.2 PKB对60Co辐射小鼠外周血象影响第77页
        5.3.3 PKB对小鼠免疫器官指数的影响第77-78页
        5.3.4 PKB对巨噬细胞吞噬能力的影响第78-79页
        5.3.5 PKB对小鼠脾细胞周期的影响第79-81页
    5.4 本章小结第81-82页
6 PKB对癌细胞增殖的抑制作用第82-105页
    6.1 实验材料与仪器第82-84页
        6.1.1 材料与试剂第82-83页
        6.1.2 实验仪器第83页
        6.1.3 溶液配制第83-84页
    6.2 实验方法第84-88页
        6.2.1 细胞复苏及培养第84页
        6.2.2 细胞传代第84-85页
        6.2.3 细胞冻存方法第85页
        6.2.4 台盼蓝排斥法检测活细胞百分率第85页
        6.2.5 PKB抗癌能力测定方法第85-86页
        6.2.6 透射电镜观察PKB作用后癌细胞变化第86页
        6.2.7 扫描电镜观察PKB作用后癌细胞变化第86页
        6.2.8 琼脂糖凝胶电泳检测HT29细胞DNA损伤第86-87页
        6.2.9 Annexin V-FITC/PI双染法检测HT29细胞凋亡第87-88页
        6.2.10 流式细胞仪检测HT29细胞周期第88页
    6.3 实验结果与讨论第88-104页
        6.3.1 MTT法测定PKB对癌细胞增殖的影响第88-91页
        6.3.2 PKB对四种癌细胞增殖作用的比较第91-92页
        6.3.3 PKB对HT29细胞形态的影响第92-95页
        6.3.4 琼脂糖凝胶电泳检测PKB对HT29细胞DNA损伤结果第95-96页
        6.3.5 Annexin V-FTIC/PI双染法测定PKB对HT29细胞凋亡结果第96-97页
        6.3.6 PKB对HT29细胞周期分布的影响第97-99页
        6.3.7 PKB抗氧化和抗癌细胞增殖相关性分析第99-101页
        6.3.8 PKB增强免疫功能和抗癌细胞增殖相关性分析第101-103页
        6.3.9 PKB抗人结肠癌细胞增殖和细胞周期阻滞相关性分析第103-104页
    6.4 本章小结第104-105页
结论第105-107页
参考文献第107-125页
附录第125-126页
攻读学位期间发表的学术论文第126-127页
致谢第127-128页

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