摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第15-34页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第15页 |
1.2 多酚的类型与结构特征 | 第15-18页 |
1.2.1 非黄酮类多酚 | 第16-17页 |
1.2.2 黄酮类多酚 | 第17-18页 |
1.3 多酚的生物活性 | 第18-21页 |
1.3.1 抗氧化性 | 第18-19页 |
1.3.2 抗辐射性 | 第19-20页 |
1.3.3 抗癌活性 | 第20-21页 |
1.3.4 增强机体免疫性 | 第21页 |
1.3.5 其他生物活性 | 第21页 |
1.4 多酚的分离纯化及结构鉴定 | 第21-29页 |
1.4.1 多酚类化合物的提取 | 第21-24页 |
1.4.2 多酚类化合物的纯化工艺 | 第24-26页 |
1.4.3 结构鉴定 | 第26-29页 |
1.5 氧化诱导损伤的产生机制和预防机制 | 第29-32页 |
1.5.1 多酚类化合物抗氧化途径 | 第29-30页 |
1.5.2 多酚类抗辐射作用及修复途径 | 第30-31页 |
1.5.3 多酚类化合物抗菌、抗癌机制及作用途径 | 第31页 |
1.5.4 天然多酚类物质抗氧化性质与抗癌作用的相关性 | 第31-32页 |
1.6 主要研究内容 | 第32-34页 |
2 酶法辅助松多酚提取工艺优化 | 第34-43页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第34-35页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第34页 |
2.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-36页 |
2.2.1 工艺流程 | 第35页 |
2.2.2 红松树皮多酚提取工艺的单因素试验 | 第35页 |
2.2.3 红松树皮多酚提取工艺的优化试验 | 第35页 |
2.2.4 松树皮多酚得率的测定 | 第35-36页 |
2.3 数据处理 | 第36页 |
2.4 单因素试验结果及分析 | 第36-38页 |
2.4.1 加酶量对多酚得率的影响 | 第36页 |
2.4.2 酶解时间对多酚得率的影响 | 第36-37页 |
2.4.3 酶解温度对多酚得率的影响 | 第37-38页 |
2.4.4 乙醇添加量对多酚得率的影响 | 第38页 |
2.5 响应面优化试验 | 第38-41页 |
2.6 本章小结 | 第41-43页 |
3 松多酚分离纯化及结构鉴定 | 第43-59页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第43-44页 |
3.1.1 实验材料与试剂 | 第43-44页 |
3.1.2 实验仪器 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-47页 |
3.2.1 红松多酚样品溶液的制备 | 第44页 |
3.2.2 大孔树脂预处理和装柱 | 第44-45页 |
3.2.3 大孔树脂的筛选 | 第45-46页 |
3.2.4 D101大孔树脂吸附分离红松多酚条件优化 | 第46页 |
3.2.5 红松多酚二级纯化 | 第46-47页 |
3.2.6 红松多酚结构鉴定 | 第47页 |
3.3 实验结果与分析 | 第47-57页 |
3.3.1 不同大孔树脂静态吸附、解吸红松多酚性能比较 | 第47-48页 |
3.3.2 不同大孔树脂对红松多酚静态吸附和解吸动力学 | 第48-49页 |
3.3.3 D101大孔树脂吸附分离红松多酚条件优化 | 第49-53页 |
3.3.4 制备型高效液相色谱法纯化PK-40 | 第53页 |
3.3.5 结构的鉴定 | 第53-57页 |
3.4 本章小结 | 第57-59页 |
4 PKB对氧化应激的防御作用 | 第59-74页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第59-60页 |
4.1.1 实验材料 | 第59-60页 |
4.2 实验方法 | 第60-65页 |
4.2.1 PKB对DPPH·自由基的清除能力 | 第60-61页 |
4.2.2 PKB对ABTS+自由基体系的清除能力 | 第61-62页 |
4.2.3 PKB对羟基自由基体系的清除能力 | 第62页 |
4.2.4 PKB对超氧阴离子自由基体系的清除能力 | 第62-63页 |
4.2.5 PKB总还原力的测定 | 第63页 |
4.2.6 辐射诱导氧化损伤实验动物分组及模型建立 | 第63-64页 |
4.2.7 体内MDA及氧化还原酶系实验 | 第64-65页 |
4.3 结果与分析 | 第65-73页 |
4.3.1 PKB对非生理性自由基的清除活性 | 第65-66页 |
4.3.2 PKB对生理性自由基的清除活性 | 第66-68页 |
4.3.3 PKB总还原力的测定结果 | 第68-69页 |
4.3.4 PKB对体内相关氧化酶活力的影响 | 第69-73页 |
4.4 本章小结 | 第73-74页 |
5 PKB对氧化损伤小鼠免疫功能的影响 | 第74-82页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第74-75页 |
5.1.1 实验材料 | 第74页 |
5.1.2 实验试剂 | 第74页 |
5.1.3 实验仪器 | 第74-75页 |
5.2 实验方法 | 第75-76页 |
5.2.1 实验动物分组及模型建立 | 第75页 |
5.2.2 外周血象和白细胞损伤分析 | 第75页 |
5.2.3 免疫脏器指数的测定 | 第75页 |
5.2.4 小鼠碳廓清指数的测定 | 第75-76页 |
5.2.5 小鼠脾淋巴细胞周期分析 | 第76页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第76-81页 |
5.3.1 PKB对体重的影响 | 第76-77页 |
5.3.2 PKB对60Co辐射小鼠外周血象影响 | 第77页 |
5.3.3 PKB对小鼠免疫器官指数的影响 | 第77-78页 |
5.3.4 PKB对巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第78-79页 |
5.3.5 PKB对小鼠脾细胞周期的影响 | 第79-81页 |
5.4 本章小结 | 第81-82页 |
6 PKB对癌细胞增殖的抑制作用 | 第82-105页 |
6.1 实验材料与仪器 | 第82-84页 |
6.1.1 材料与试剂 | 第82-83页 |
6.1.2 实验仪器 | 第83页 |
6.1.3 溶液配制 | 第83-84页 |
6.2 实验方法 | 第84-88页 |
6.2.1 细胞复苏及培养 | 第84页 |
6.2.2 细胞传代 | 第84-85页 |
6.2.3 细胞冻存方法 | 第85页 |
6.2.4 台盼蓝排斥法检测活细胞百分率 | 第85页 |
6.2.5 PKB抗癌能力测定方法 | 第85-86页 |
6.2.6 透射电镜观察PKB作用后癌细胞变化 | 第86页 |
6.2.7 扫描电镜观察PKB作用后癌细胞变化 | 第86页 |
6.2.8 琼脂糖凝胶电泳检测HT29细胞DNA损伤 | 第86-87页 |
6.2.9 Annexin V-FITC/PI双染法检测HT29细胞凋亡 | 第87-88页 |
6.2.10 流式细胞仪检测HT29细胞周期 | 第88页 |
6.3 实验结果与讨论 | 第88-104页 |
6.3.1 MTT法测定PKB对癌细胞增殖的影响 | 第88-91页 |
6.3.2 PKB对四种癌细胞增殖作用的比较 | 第91-92页 |
6.3.3 PKB对HT29细胞形态的影响 | 第92-95页 |
6.3.4 琼脂糖凝胶电泳检测PKB对HT29细胞DNA损伤结果 | 第95-96页 |
6.3.5 Annexin V-FTIC/PI双染法测定PKB对HT29细胞凋亡结果 | 第96-97页 |
6.3.6 PKB对HT29细胞周期分布的影响 | 第97-99页 |
6.3.7 PKB抗氧化和抗癌细胞增殖相关性分析 | 第99-101页 |
6.3.8 PKB增强免疫功能和抗癌细胞增殖相关性分析 | 第101-103页 |
6.3.9 PKB抗人结肠癌细胞增殖和细胞周期阻滞相关性分析 | 第103-104页 |
6.4 本章小结 | 第104-105页 |
结论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-125页 |
附录 | 第125-126页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第126-127页 |
致谢 | 第127-128页 |