| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 一.前言 | 第11-25页 |
| ·OsPDCD5 | 第11-22页 |
| ·PCD概述 | 第11-12页 |
| ·植物PCD | 第12-14页 |
| ·动物PCD相关基因的植物同源基因 | 第13-14页 |
| ·植物特有的PCD基因 | 第14页 |
| ·PDCD5 | 第14-15页 |
| ·线粒体与PCD | 第15-17页 |
| ·MPTP | 第15页 |
| ·细胞色素c | 第15-16页 |
| ·ROS | 第16-17页 |
| ·caspases | 第17页 |
| ·类caspases | 第17-20页 |
| ·VPEs | 第18页 |
| ·metacaspases | 第18-19页 |
| ·saspases | 第19-20页 |
| ·钙离子与植物PCD | 第20页 |
| ·植物PCD检测方法 | 第20-22页 |
| ·Bn-csRRM2 | 第22-25页 |
| ·FCA的RRM结构域具有使细胞增大的功能 | 第22-24页 |
| ·棉花概述 | 第24-25页 |
| 二. 材料与方法 | 第25-51页 |
| ·水稻品种 | 第25页 |
| ·质粒及菌株 | 第25页 |
| ·试剂盒 | 第25-26页 |
| ·水稻cDNA的获取 | 第26-28页 |
| ·水稻总RNA的提取和纯化 | 第26-27页 |
| ·反转录反应 | 第27-28页 |
| ·水稻基因组DNA的小量提取 | 第28页 |
| ·棉花基因组DNA的小量提取 | 第28-29页 |
| ·目的片段的克隆 | 第29-32页 |
| ·引物设汁及片段扩增 | 第29-30页 |
| ·回收PCR产物条带 | 第30页 |
| ·将目的片段连接至pGEM-T载体 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第31-32页 |
| ·载体构建 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA的制备及纯化 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA目的片段的酶切 | 第33页 |
| ·目的片段的回收与连接 | 第33页 |
| ·水稻基因枪转化 | 第33-35页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·试剂与器具 | 第34页 |
| ·转化方法 | 第34-35页 |
| ·棉花基因枪转化 | 第35-36页 |
| ·转基因再生苗的获取 | 第35-36页 |
| ·嫁接及种子的获取 | 第36页 |
| ·转基因阳性植株的鉴定 | 第36-39页 |
| ·利用PCR方法鉴定转基因植株 | 第36-37页 |
| ·Southern杂交分析 | 第37-39页 |
| ·石蜡切片 | 第39-40页 |
| ·载玻片和盖玻片处理 | 第39页 |
| ·材料固定与包埋 | 第39-40页 |
| ·切片的展片和粘片 | 第40页 |
| ·脱蜡、染色、脱水 | 第40页 |
| ·封片 | 第40页 |
| ·RNA原位杂交 | 第40-42页 |
| ·切片准备 | 第40页 |
| ·原位杂交程序 | 第40-42页 |
| ·DeadEnd~(TM)荧光法TUNEL检测系统 | 第42-44页 |
| ·检测原理 | 第42页 |
| ·器材与试剂 | 第42-43页 |
| ·实验步骤 | 第43-44页 |
| ·实时定量PCR(RT-qPCR) | 第44-45页 |
| ·植物细胞过氧化氢(H_2O_2)的测定 | 第45页 |
| ·透射电镜(TEM) | 第45-46页 |
| ·基因芯片(Agilent Rice Oligo Microarrays) | 第46-51页 |
| 三. 结果与讨论 | 第51-83页 |
| ·OsPDCD5 | 第51-75页 |
| ·构建OsPDCD5的热激诱导表达系统 | 第51-52页 |
| ·转基因植株热激诱导OsPDCD5转录的表型 | 第52-55页 |
| ·OsPDCD5诱导的细胞死亡具有多种PCD的特性 | 第55-60页 |
| ·基因组DNA断裂 | 第55页 |
| ·ROS生成 | 第55-57页 |
| ·线粒体膨大 | 第57-58页 |
| ·OsPDCD5与绒毡层发育过程中的PCD | 第58-60页 |
| ·幼嫩植株可以抑制OsPDCD5诱导的细胞死亡 | 第60-63页 |
| ·芯片分析 | 第63-67页 |
| ·三叶期 | 第63-64页 |
| ·二叶期 | 第64-67页 |
| ·反义表达OsPDCD5可提高水稻产量 | 第67-70页 |
| ·OsPDCD5诱导表达用于筛选无标记转基因植株 | 第70-75页 |
| ·转基因作物的安全隐患 | 第70-71页 |
| ·无标记转基因作物的获取 | 第71-73页 |
| ·OsPDCD5诱导表达用于筛选无标记转基因植株 | 第73-75页 |
| ·Bn-csRRM2 | 第75-83页 |
| ·Bn-csRRM2棉花转基因植株的获取 | 第75-77页 |
| ·Bn-csRRM2导致转基因棉花植株增大 | 第77-79页 |
| ·Bn-csRRM2导致转基因棉花器官增大 | 第79-80页 |
| ·Bn-csRRM2导致转基因棉花细胞增大 | 第80-83页 |
| ·棉纤维 | 第80-81页 |
| ·花粉细胞 | 第81页 |
| ·子叶柄细胞 | 第81-83页 |
| 四. 补充材料 | 第83-99页 |
| ·Supplemental Figure 1 | 第83-84页 |
| ·Supplemental Figure 2 | 第84-85页 |
| ·Supplemental Figure 3 | 第85-86页 |
| ·Supplemental Figure 4 | 第86-87页 |
| ·Additional file 1 | 第87-92页 |
| ·Additional file 2 | 第92-97页 |
| ·Additional file 3 | 第97-98页 |
| ·Additional file 4 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
