摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词中英文对照 | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-32页 |
·植物启动子的基本结构 | 第11-13页 |
·转录起始位点 | 第11-12页 |
·TATA-box | 第12页 |
·起始因子 | 第12-13页 |
·一般上游元件 | 第13页 |
·CAAT-box | 第13页 |
·GC-box | 第13页 |
·植物基因启动子的分类 | 第13-28页 |
·组成型启动子 | 第13-16页 |
·CaMV 35S启动子 | 第14页 |
·CsVMV启动子 | 第14-15页 |
·Nos和Ocs启动了 | 第15页 |
·Actin启动子 | 第15-16页 |
·组织特异型启动子 | 第16-22页 |
·根特异启动子 | 第16-17页 |
·茎特异启动子 | 第17页 |
·叶特异启动子 | 第17-18页 |
·花特异启动子 | 第18-19页 |
·果实、种子特异启动子 | 第19-20页 |
·维管组织特异启动子 | 第20-22页 |
·诱导型启动子 | 第22-28页 |
·光诱导启动子 | 第22-24页 |
·温度诱导启动子 | 第24-25页 |
·水诱导启动子 | 第25页 |
·激素诱导启动子 | 第25-28页 |
·启动子功能研究方法 | 第28-30页 |
·生物信息学分析 | 第28-29页 |
·实验方法分析 | 第29-30页 |
·启动子研究前景 | 第30-31页 |
·本研究技术路线 | 第31-32页 |
第二章 建立以OsPDCD5基因为报告基因的启动子分析策略 | 第32-50页 |
·材料、试剂及器材 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·菌株和载体 | 第32页 |
·主要分子生物学试剂及测序 | 第32页 |
·主要化学试剂 | 第32页 |
·水稻组织培养的培养基配方 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-38页 |
·水稻DNA大量提取方法 | 第33-34页 |
·LRK6启动子的扩增及分割 | 第34页 |
·克隆实验步骤 | 第34-36页 |
·PCR扩增产物回收 | 第34-35页 |
·T载体连接 | 第35页 |
·载体转化 | 第35页 |
·质粒提取 | 第35-36页 |
·植物表达载体的构建 | 第36页 |
·基因枪法转化水稻 | 第36-37页 |
·愈伤诱导及相关处理 | 第36-37页 |
·基因枪转化 | 第37页 |
·水稻花粉绒毡层特异启动子驱动OsPDCD5基因转化籼稻93-11 | 第37-38页 |
·I_2-KI染色法测定花粉活力 | 第38页 |
·结果 | 第38-47页 |
·水稻93-11基因组的提取 | 第38-39页 |
·水稻93-11 LRK6基因启动子的扩增 | 第39页 |
·93-11的LRK6基因启动子的连续5'递减分割构建表达载体 | 第39-42页 |
·连续5'递减的LRK6启动子驱动OsPDCD5在转基因水稻中的表达 | 第42-44页 |
·连续5'递减的LRK6启动子驱动OsPDCD5基因不同表型的分析 | 第44-45页 |
·水稻花粉绒毡层特异启动子驱动OsPDCD5基因的研究 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
第三章 转录因子及其互作的顺势元件的确定 | 第50-75页 |
·材料 | 第50-51页 |
·水稻材料 | 第50页 |
·菌株及载体 | 第50页 |
·酵母培养基 | 第50-51页 |
·酵母基础培养基 | 第50-51页 |
·酵母缺陷培养基 | 第51页 |
·主要使用的试剂盒 | 第51页 |
·方法与步骤 | 第51-58页 |
·鱼饵质粒的构建 | 第51-53页 |
·水稻总RNA的提取 | 第53-54页 |
·籼稻93-11 cDNA准备 | 第54-56页 |
·cDNA第一链的合成 | 第54-55页 |
·cDNA的LD-PCR的扩增 | 第55页 |
·cDNA的纯化 | 第55-56页 |
·酵母感受态的制备 | 第56页 |
·酵母转化 | 第56-57页 |
·酵母质粒提取 | 第57-58页 |
·酵母质粒检验及测序 | 第58页 |
·实验结果 | 第58-72页 |
·鱼饵质粒的确定 | 第58-60页 |
·籼稻93-11 RNA的提取 | 第60页 |
·鱼饵质粒的构建及cDNA文库的筛选 | 第60-61页 |
·酵母质粒的提取及扩增鉴定 | 第61-63页 |
·获得一个AP2/ERF转录因了的全序列 | 第63-64页 |
·重复酵母单杂交实验验证互作 | 第64页 |
·确定酵母单杂交获得的AP2/ERF蛋白 | 第64-67页 |
·OsERF3基因的功能分析 | 第67-70页 |
·通过分割和突变分析确定LRK6启动子上的顺式元件 | 第70-72页 |
·检测OsERF3蛋白与GCC-box的互作 | 第72页 |
·讨论 | 第72-75页 |
第四章 OsERF3基因功能及影响LRK6等位基因表达差异的初步研究 | 第75-85页 |
·材料与方法 | 第75-79页 |
·植物材料 | 第75页 |
·激素处理 | 第75页 |
·RNA快速微量提取 | 第75-76页 |
·RNA反转录 | 第76-77页 |
·Real Time PCR引物设计 | 第77页 |
·Real Time PCR反应及数据处理 | 第77-78页 |
·OsERF3植物表达载体的构建 | 第78-79页 |
·实验结果 | 第79-83页 |
·激素处理实验中OsERF3和LRK6的表达 | 第79页 |
·植物表达载体pCAMIBIA 1304-OsERF3转化籼稻93-11 | 第79-81页 |
·OsERF3过量表达导致籼稻93-11生长抑制且花粉畸形 | 第81页 |
·OsERF3基因对LRK6等位基因表达差异的影响 | 第81-83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-105页 |
附录 | 第105-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
在读期间论文发表 | 第111-112页 |