| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文缩略语 | 第16-22页 |
| 第一部分：正常与肛门直肠畸形大鼠胚胎17天腰骶段脊髓全转录组对比的研究 | 第22-53页 |
| 1 前言 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-30页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第24页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 肛门直肠畸形动物模型制作及标本制备 | 第24-25页 |
| 2.2.2 高通量测序 | 第25页 |
| 2.2.3 运用RT-qPCR技术对筛查结果进行验证 | 第25-30页 |
| 3 结果 | 第30-50页 |
| 3.1 大体观察结果和标本收集分组 | 第30-31页 |
| 3.2 RNA-Seq预测差异表达RNA | 第31-46页 |
| 3.2.1 差异mRNA信息 | 第31-34页 |
| 3.2.2 DE lncRNA信息 | 第34-41页 |
| 3.2.3 DE circRNA信息 | 第41-44页 |
| 3.2.4 共表达网分析 | 第44-46页 |
| 3.3 RT-qPCR验证部分RNA-seq筛查结果 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 第二部分：Shh-Ptch1-Gli1在正常与肛门直肠畸形胎鼠腰骶髓发育中表达对比研究 | 第53-73页 |
| 5 前言 | 第53-55页 |
| 6 材料与方法 | 第55-62页 |
| 6.1 主要试剂和仪器 | 第55-56页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第55页 |
| 6.1.2 主要实验仪器 | 第55-56页 |
| 6.2 实验方法 | 第56-62页 |
| 6.2.1 肛门直肠畸形动物模型制作及标本制备 | 第56页 |
| 6.2.2 石蜡切片 | 第56-57页 |
| 6.2.3 RT-qPCR检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Shh、Ptch1和Gli1基因mRNA的表达 | 第57-59页 |
| 6.2.4 Western Blotting检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Shh、Ptch1和Gli1蛋白含量的变化 | 第59-60页 |
| 6.2.5 免疫组织化学染色检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Shh、Ptch1和Gli1蛋白含量的变化 | 第60-62页 |
| 7 结果 | 第62-71页 |
| 7.1 大体观察结果 | 第62-63页 |
| 7.2 RT-qPCR检测Shh、Ptch1和Gli1在大鼠胚胎腰骶髓中mRNA的表达 | 第63-65页 |
| 7.3 Western Blotting检测大鼠胚胎腰骶髓中Shh、Ptch1和Gli1蛋白定量表达 | 第65-66页 |
| 7.4 Shh、Ptch1和Gli1蛋白在大鼠胚胎腰骶髓中的表达情况 | 第66-71页 |
| 8 讨论 | 第71-73页 |
| 第三部分：正常与肛门直肠畸形大鼠腰骶髓神经细胞凋亡及Bcl2/Bax表达对比研究 | 第73-93页 |
| 9 前言 | 第73-75页 |
| 10 材料与方法 | 第75-83页 |
| 10.1 主要试剂和仪器 | 第75-76页 |
| 10.1.1 主要试剂 | 第75页 |
| 10.1.2 主要实验仪器 | 第75-76页 |
| 10.2 实验方法 | 第76-83页 |
| 10.2.1 肛门直肠畸形动物模型制作及标本制备 | 第76页 |
| 10.2.2 腰骶髓长度测量 | 第76-77页 |
| 10.2.3 石蜡切片 | 第77页 |
| 10.2.4 TUNEL染色 | 第77页 |
| 10.2.5 RT-qPCR检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Bcl2及Bax基因mRNA的表达 | 第77-79页 |
| 10.2.6 Western Blotting检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Bcl2及Bax蛋白含量的变化 | 第79-81页 |
| 10.2.7 免疫组织化学染色检测对照组和ARMs组腰骶髓组织中Bcl2及Bax蛋白含量的变化 | 第81-83页 |
| 11 结果 | 第83-91页 |
| 11.1 大体观察结果 | 第83页 |
| 11.2 大鼠胚胎腰骶髓长度比较 | 第83-84页 |
| 11.3 大鼠胚胎腰骶髓神经细胞凋亡情况 | 第84-86页 |
| 11.4 RT-qPCR检测Bcl2及Bax在大鼠胚胎腰骶髓中mRNA的表达 | 第86-87页 |
| 11.5 Western Blotting检测大鼠胚胎腰骶髓中Bcl2及Bax蛋白定量表达 | 第87页 |
| 11.6 Bcl2/Bax蛋白表达量的比值与凋亡指数的关系 | 第87-88页 |
| 11.7 Bcl2及Bax蛋白在大鼠胚胎腰骶髓的表达情况 | 第88-91页 |
| 12 讨论 | 第91-93页 |
| 第四部分：子宫内骨髓间充质干细胞移植修复腰骶髓发育不良的实验研究 | 第93-113页 |
| 13 前言 | 第93-95页 |
| 14 材料与方法 | 第95-104页 |
| 14.1 主要试剂和仪器 | 第95-96页 |
| 14.1.1 主要试剂 | 第95-96页 |
| 14.1.2 主要仪器 | 第96页 |
| 14.2 实验方法 | 第96-104页 |
| 14.2.1 肛门直肠畸形动物模型制作及标本制备 | 第96-97页 |
| 14.2.2 骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）分离培养 | 第97页 |
| 14.2.3 胎儿手术和显微镜下进行羊膜腔内MSCs注射 | 第97-98页 |
| 14.2.4 标本取材及固定 | 第98页 |
| 14.2.5 冰冻切片 | 第98页 |
| 14.2.6 TUNEL染色 | 第98-99页 |
| 14.2.7 RT-qPCR检测对照组、ARMs组以及ARMs+MSCs组腰骶髓中Synapsin和GFAP基因mRNA的表达 | 第99-101页 |
| 14.2.8 Western Blotting检测对照组、ARMs组以及ARMs+MSCs组腰骶髓中Synapsin和GFAP蛋白含量的变化 | 第101-103页 |
| 14.2.9 Synapsin和GFAP免疫荧光染色步骤 | 第103-104页 |
| 15 结果 | 第104-111页 |
| 15.1 MSCs的体外培养 | 第104页 |
| 15.2 大体观察结果 | 第104页 |
| 15.3 移植MSCs后大鼠胚胎腰骶髓神经细胞凋亡情况 | 第104-106页 |
| 15.4 RT-qPCR检测Synapsin和GFAP在正常组、ARMs组以及移植MSCs组大鼠胚胎腰骶髓中m RNA的表达 | 第106-107页 |
| 15.5 Western Blotting检测Synapsin和GFAP蛋白在正常组、ARMs组以及MSCs+ARMs组大鼠胚胎腰骶髓中的定量表达 | 第107-108页 |
| 15.6 Synapsin和GFAP蛋白在正常组、ARMs组以及MSCs+ARMs组大鼠胚胎腰骶髓组织中的表达情况 | 第108-111页 |
| 16 讨论 | 第111-113页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 综述 | 第122-130页 |
| 参考文献 | 第127-130页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 个人简历 | 第134页 |
