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TRPC3调控PLCγ/PKC/CPI-17信号通路在感染性早产中的作用及机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-17页
第一部分 TRPC3在分娩发动中的作用及其对钙离子通道的影响第17-31页
    1 前言第17-19页
    2 材料与方法第19-25页
        2.1 主要试剂及仪器第19-20页
            2.1.1 主要试剂第19页
            2.1.2 主要仪器第19-20页
        2.2 研究对象及分组第20页
        2.3 研究方法第20-25页
            2.3.1 Real-timePCR第21-22页
            2.3.2 蛋白免疫印迹Westernblot第22-25页
            2.3.3 统计分析第25页
    3 结果第25-29页
        3.1 TRPC3在各组孕妇子宫平滑肌组织中的表达第25-27页
            3.1.1 Real-timePCR检测TRPC3基因在孕妇子宫平滑肌表达,提示感染性早产组中TRPC3基因表达增加第25-26页
            3.1.2 Westernblot检测TRPC3蛋白在孕妇子宫平滑肌表达,提示感染性早产组中TRPC3蛋白表达增加第26-27页
        3.2 Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2在各组孕妇子宫平滑肌组织中的表达第27-29页
            3.2.1 Real-timePCR检测Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2基因在孕妇子宫平滑肌表达,提示足月进入产程组中其基因表达最高第27-28页
            3.2.2 Westernblot检测Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2蛋白在孕妇子宫平滑肌表达,提示足月进入产程组中其蛋白表达增加第28-29页
    4 讨论第29-30页
    5 结论第30-31页
第二部分 TRPC3在孕鼠模型中对PLCγ/PKC/CPI-17信号通路的影响第31-42页
    1 前言第31-32页
    2 材料与方法第32-35页
        2.1 主要试剂及仪器第32-33页
            2.1.1 主要试剂第32-33页
            2.1.2 主要仪器第33页
        2.2 研究对象及分组第33-34页
        2.3 研究方法第34-35页
            2.3.1 Real-timePCR第34页
            2.3.2 蛋白免疫印迹Westernblot第34-35页
            2.3.3 统计分析第35页
    3 结果第35-39页
        3.1 TRPC3与L型、T型钙离子通道蛋白在各组小鼠子宫平滑肌组织中的表达第35-37页
            3.1.1 Real-timePCR检测TRPC3、Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2基因在小鼠子宫平滑肌表达,提示感染性早产组中TRPC3在基因水平明显高于早产组第35-36页
            3.1.2 Westernblot检测TRPC3、Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2蛋白在小鼠子宫平滑肌表达,提示感染性早产组中TRPC3在基因水平明显高于早产组第36-37页
        3.2 PLCγ/PKC/CPI-17信号通路相关指标在各组小鼠子宫平滑肌组织中的表达第37-39页
            3.2.1 Real-timePCR检测PLCγ、PKC、CPI-17基因在小鼠子宫平滑肌表达。第37-38页
            3.2.2 Westernblot检测PLCγ、PKC、CPI-17基因在小鼠子宫平滑肌表达第38-39页
    4 讨论第39-41页
    5 结论第41-42页
第三部分 TRPC3调控PLCγ/PKC/CPI-17信号通路在子宫平滑肌细胞中的作用机制第42-59页
    1 前言第42-43页
    2 材料及方法第43-48页
        2.1 主要试剂及仪器第43-44页
            2.1.1 主要试剂第43-44页
            2.1.2 主要仪器第44页
        2.2 研究对象及分组第44页
        2.3 研究方法第44-48页
            2.3.1 孕小鼠子宫平滑肌细胞原代分离和培养第44-45页
            2.3.2 孕小鼠子宫平滑肌原代细胞鉴定(细胞荧光)第45-46页
            2.3.3 制作LPS孕鼠子宫平滑肌细胞第46页
            2.3.4 TRPC3SiRNA转染第46-47页
            2.3.5 细胞免疫荧光第47页
            2.3.6 Real-timePCR第47-48页
            2.3.7 蛋白免疫印迹Westernblot第48页
            2.3.8 统计分析第48页
    3 结果第48-55页
        3.1 孕小鼠子宫平滑肌原代细胞培养和鉴定第48页
        3.2 转染TRPC3SiRNA的细胞鉴定第48-49页
            3.2.1 转染TRPC3SiRNA的小鼠子宫平滑肌细胞免疫荧光结果第49页
            3.2.2 转染TRPC3siRNA的小鼠子宫平滑肌细胞Westernblot结果第49页
        3.3 TRPC3与Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2在小鼠各组细胞中的表达第49-52页
            3.3.1 应用Real-timePCR方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中TRPC3、Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2基因表达情况第50页
            3.3.2 应用Westernblot方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中TRPC3、Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2蛋白表达情况第50-51页
            3.3.3 应用免疫荧光方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中TRPC3、Cav1.2、Cav3.1及Cav3.2蛋白表达情况第51-52页
        3.4 PLCγ/PKC/CPI-17信号通路各指标在小鼠各组细胞中的表达第52-55页
            3.4.1 应用Real-timePCR方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中PLCγ、PKC及CPI-17基因表达情况第53页
            3.4.2 应用Westernblot方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中PLCγ、PKC及CPI-17蛋白表达情况第53-54页
            3.4.3 应用免疫荧光方法,检测四组孕鼠子宫平滑肌细胞中PLCγ、PKC及CPI-17蛋白表达情况第54-55页
    4 讨论第55-58页
    5 结论第58-59页
本研究创新性的自我评价第59-60页
参考文献第60-67页
综述第67-76页
    参考文献第72-76页
攻读学位期间取得的研究成果第76-78页
致谢第78-79页
个人简介第79页

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