| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Summary | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第9-17页 |
| 1.1 玉米瘤黑粉病概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 玉米瘤黑粉病的危害 | 第9-10页 |
| 1.1.2 玉米瘤黑粉病发病症状 | 第10-11页 |
| 1.1.3 玉米瘤黑粉病的发病规律 | 第11页 |
| 1.1.4 玉米瘤黑粉病的发病条件 | 第11-12页 |
| 1.1.5 玉米瘤黑粉病的防治 | 第12页 |
| 1.2 玉米黑粉菌概述 | 第12-15页 |
| 1.2.1 玉米黑粉菌的特征特性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 玉米黑粉菌的生长周期 | 第13-14页 |
| 1.2.3 玉米黑粉菌的冬孢子的生物学特性 | 第14页 |
| 1.2.4 玉米黑粉菌的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 玉米黑粉菌 znf9 基因过表达菌株形态观察 | 第17-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2 主要试剂和工具酶 | 第17页 |
| 2.3 仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.4 主要溶液和培养基的配制 | 第18-19页 |
| 2.4.1 主要溶液及配制方法 | 第18-19页 |
| 2.4.2 主要培养基及配制方法 | 第19页 |
| 2.5 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.5.1 查找目的基因 crg1 启动子的 DNA 序列 | 第19-20页 |
| 2.5.2 引物的设计与合成 | 第20页 |
| 2.5.3 从 Ustilago maydis 中提取 DNA | 第20-21页 |
| 2.5.4 PCR 扩增目的基因 crg1 启动子 | 第21-22页 |
| 2.5.5 PCR 产物回收 | 第22-23页 |
| 2.5.6 电泳产物回收 | 第23页 |
| 2.5.7 制备线性载体 PHD3-znf9-N 与目的片段 crg1-N | 第23-24页 |
| 2.5.8 目的片段 crg1-N 与线性载体 PHD3-znf9-N 连接 | 第24-25页 |
| 2.5.9 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第25-26页 |
| 2.5.10 热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26页 |
| 2.5.11 质粒 PHD3-znf9- crg1 的提取 | 第26-27页 |
| 2.5.12 阳性质粒 PHD3-znf9- crg1 的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 2.5.13 阳性质粒 PHD3-znf9- crg1 线性化 | 第28-29页 |
| 2.5.14 SG200 原生质体的制备 | 第29-30页 |
| 2.5.15 SG200 原生质体转化 | 第30页 |
| 2.5.16 菌株保存 | 第30-31页 |
| 2.5.17 在培养液中观察孢子形态 | 第31页 |
| 2.6 实验结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.6.1 目的基因序列的克隆 | 第31-32页 |
| 2.6.2 酶切目的基因 crg1 启动子和质粒 PHD3-znf9 | 第32-33页 |
| 2.6.3 阳性质粒 PHD3-znf9- crg1 酶切验证 | 第33-34页 |
| 2.6.4 阳性质粒 PHD3-znf9- crg1 线性化 | 第34-35页 |
| 2.6.5 原生质体转化 | 第35页 |
| 2.6.6 原生质体转化后提取 DNA 验证 | 第35页 |
| 2.6.7 观察菌液中孢子形态的实验 | 第35-37页 |
| 第三章 玉米黑粉菌 znf9 基因过表达侵染实验 | 第37-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.2 主要试剂和工具酶 | 第37页 |
| 3.3 仪器设备 | 第37页 |
| 3.4 主要溶液和培养基的配制 | 第37页 |
| 3.5 实验方法 | 第37-43页 |
| 3.5.1 查找目的基因 mig2-5 启动子的 DNA 序列 | 第37页 |
| 3.5.2 引物的设计与合成 | 第37-38页 |
| 3.5.3 从 U.maydis 中提取 DNA | 第38页 |
| 3.5.4 以 um521 为模板，PCR 扩增目的基因 | 第38页 |
| 3.5.5 PCR 产物纯化回收 | 第38页 |
| 3.5.6 电泳产物回收 | 第38页 |
| 3.5.7 酶切目的基因 mig2-5 启动子及质粒 PHD3-znf9-crg1 | 第38-40页 |
| 3.5.8 目的片段 mig2-5-N 与载体 PHD3-znf9-N1 连接 | 第40页 |
| 3.5.9 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第40页 |
| 3.5.10 热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第40页 |
| 3.5.11 质粒 PHD3-znf9- mig2-5 的提取 | 第40页 |
| 3.5.12 阳性质粒 PHD3-znf9- mig2-5 的酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 3.5.13 阳性质粒 PHD3-znf9- mig2-5 线性化 | 第41页 |
| 3.5.14 SG200 原生质体的制备 | 第41页 |
| 3.5.15 SG200 原生质体转化 | 第41-42页 |
| 3.5.16 菌株保存 | 第42页 |
| 3.5.17 玉米植株侵染 | 第42-43页 |
| 3.6 实验结果与分析 | 第43-48页 |
| 3.6.1 目的基因序列的克隆 | 第43页 |
| 3.6.2 酶切目的片段 mig2-5 启动子和质粒 PHD3-znf9-crg1 | 第43-44页 |
| 3.6.3 阳性质粒 PHD3-znf9- mig2-5 酶切验证 | 第44-45页 |
| 3.6.4 阳性质粒 PHD3-znf9- mig2-5 线性化 | 第45-46页 |
| 3.6.5 原生质体转化 | 第46页 |
| 3.6.6 原生质体转化后提取 DNA 验证 | 第46页 |
| 3.6.7 玉米植株侵染实验 | 第46-48页 |
| 第四章 实验结论与讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
