| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1 木霉促生研究现状 | 第13-15页 |
| 1.1 木霉帮助增强植物对非生物胁迫的抗性 | 第13-15页 |
| 1.1.1 营养元素缺乏胁迫 | 第13页 |
| 1.1.2 盐离子和干旱、酸碱等非营养物质胁迫 | 第13-15页 |
| 1.1.3 嗜铁素 | 第15页 |
| 2 钙调磷酸酶研究现状 | 第15-17页 |
| 2.1 钙调磷酸酶简介 | 第15-17页 |
| 2.2 钙调磷酸酶与真菌逆境生长 | 第17页 |
| 3 立题依据 | 第17-18页 |
| 4 研究内容 | 第18-20页 |
| 5 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 盐胁迫对棘孢木霉产嗜铁素及与钙调磷酸酶基因表达的影响 | 第21-34页 |
| 1.1 材料 | 第21-24页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 1.1.2 培养基 | 第21-22页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.4 引物 | 第23-24页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 1.2.1 不同浓度的氯化钠盐胁迫下棘孢木霉T6的生长 | 第24页 |
| 1.2.2 不同浓度的氯化钠盐胁迫下棘孢木霉T6的产孢 | 第24-25页 |
| 1.2.3 不同浓度的氯化钠盐胁迫棘孢木霉T6嗜铁素的产生 | 第25页 |
| 1.2.4 不同浓度的氯化钠胁迫下棘孢木霉T6细胞中钙调磷酸酶基因(CNA)的表达 | 第25-28页 |
| 1.3 结果分析 | 第28-32页 |
| 1.3.1 不同浓度氯化钠盐胁迫对棘孢木霉T6生长的影响 | 第28-29页 |
| 1.3.2 不同浓度氯化钠盐胁迫对棘孢木霉T6产孢的影响 | 第29-31页 |
| 1.3.3 不同浓度氯化钠盐胁迫对棘孢木霉T6嗜铁素合成的影响 | 第31-32页 |
| 1.3.4 不同浓度氯化钠盐胁迫棘孢木霉T6细胞中钙调磷酸酶基因半定量表达 | 第32页 |
| 1.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 酸碱度对棘孢木霉T6生长、产孢及嗜铁素的影响 | 第34-42页 |
| 1.1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第34页 |
| 1.1.2 培养基 | 第34页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 1.2.1 不同pH条件下棘孢木霉T6的生长 | 第35页 |
| 1.2.2 不同pH条件下棘孢木霉T6的产孢 | 第35页 |
| 1.2.3 不同pH条件下棘孢木霉T6嗜铁素的产量 | 第35-36页 |
| 1.3 结果分析 | 第36-40页 |
| 1.3.1 酸碱度对棘孢木霉T6生长的影响 | 第36-38页 |
| 1.3.2 酸碱度对棘孢木霉T6产孢的影响 | 第38-40页 |
| 1.3.3 酸碱度对棘孢木霉T6胞外嗜铁素产量的影响 | 第40页 |
| 1.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 缺碳和缺氮胁迫对棘孢木霉T6嗜铁素及钙调磷酸酶基因表达的影响 | 第42-55页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第42页 |
| 1.1.2 主要培养基 | 第42页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第42-43页 |
| 1.1.4 PCR体系引物 | 第43页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第43页 |
| 1.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 1.2.1 缺碳条件和缺氮条件下棘孢木霉T6的生长 | 第43-44页 |
| 1.2.1.1 缺碳条件下棘孢木霉T6的生长 | 第43页 |
| 1.2.1.2 缺氮条件下棘孢木霉T6的生长 | 第43-44页 |
| 1.2.2 缺碳条件和缺氮条件下棘孢木霉T6的产孢 | 第44页 |
| 1.2.3 缺碳条件和缺氮条件下棘孢木霉T6的嗜铁素产量 | 第44-45页 |
| 1.2.4 缺氮胁迫下棘孢木霉T6细胞中钙调磷酸酶基因(CNA)的表达 | 第45页 |
| 1.3 结果分析 | 第45-53页 |
| 1.3.1 缺碳胁迫对棘孢木霉T6生长的影响 | 第45-46页 |
| 1.3.2 缺氮胁迫对木霉生长的影响 | 第46-48页 |
| 1.3.3 缺碳胁迫和缺氮胁迫对棘孢木霉T6产孢的影响 | 第48-50页 |
| 1.3.4 缺碳胁迫和缺氮胁迫对棘孢木霉T6嗜铁素产量的影响 | 第50-52页 |
| 1.3.4.1 缺碳胁迫对棘孢木霉T6产嗜铁素的影响 | 第50-51页 |
| 1.3.4.2 缺氮胁迫对棘孢木霉T6产嗜铁素的影响 | 第51-52页 |
| 1.3.5 缺氮胁迫对棘孢木霉T6细胞中钙调磷酸酶催化亚基基因(CNA)表达的影响 | 第52-53页 |
| 1.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 过氧化氢胁迫对棘孢木霉T6生长、产孢和嗜铁素的影响 | 第55-62页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第55页 |
| 1.1.2 主要培养基 | 第55页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第55页 |
| 1.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 1.2.1 过氧化氢氧胁迫下棘孢木霉T6的生长 | 第55-56页 |
| 1.2.2 过氧化氢氧胁迫下棘孢木霉T6的产孢 | 第56页 |
| 1.2.3 过氧化氢胁迫下棘孢木霉T6嗜铁素的产生 | 第56页 |
| 1.3 结果分析 | 第56-61页 |
| 1.3.1 过氧化氢胁迫对棘孢木霉T6生长影响测定 | 第56-58页 |
| 1.3.2 过氧化氢胁迫对棘孢木霉T6产孢影响测定 | 第58-59页 |
| 1.3.3 过氧化氢胁迫对棘孢木霉T6嗜铁素产量影响测定 | 第59-60页 |
| 1.3.4 环孢菌素A(CsA)对嗜铁素的影响 | 第60-61页 |
| 1.4 讨论 | 第61-62页 |
| 第六章 钙调磷酸酶催化亚基基因(CNA)敲除突变体的构建 | 第62-77页 |
| 1.1 材料 | 第62-66页 |
| 1.1.0 供试菌株 | 第62页 |
| 1.1.1 主要培养基 | 第62-63页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第63-65页 |
| 1.1.3 引物 | 第65页 |
| 1.1.4 主要实验软件 | 第65-66页 |
| 1.1.5 主要实验仪器 | 第66页 |
| 1.2 方法 | 第66-71页 |
| 1.2.1 棘孢木霉钙调磷酸酶催化亚基基因(CNA)结构分析及引物设计 | 第66页 |
| 1.2.2 棘孢木霉T6单孢菌株的分离和活化 | 第66-67页 |
| 1.2.3 棘孢木霉T6基因组DNA的提取 | 第67页 |
| 1.2.4 棘孢木霉T6钙调磷酸酶基因上下游A、B片段及潮霉素基因的PCR扩增 | 第67-68页 |
| 1.2.5 钙调磷酸酶基因敲除载体的构建 | 第68-69页 |
| 1.2.6 原生质体制备和转化 | 第69-70页 |
| 1.2.7 转化子的PCR验证 | 第70-71页 |
| 1.3 实验仪器 | 第71页 |
| 1.4 结果与分析 | 第71-75页 |
| 1.4.1 钙调磷酸酶催化亚基蛋白序列 | 第71页 |
| 1.4.2 钙调磷酸酶催化亚基蛋白结构域SMART分析 | 第71页 |
| 1.4.3 基因敲除PCR验证结果 | 第71-74页 |
| 1.4.4 对产孢影响结果测定 | 第74页 |
| 1.4.5 对菌丝形态影响测定 | 第74-75页 |
| 1.5 讨论 | 第75-77页 |
| 全文总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
