| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第14-32页 |
| 1.1 性别决定与性别分化机制 | 第15-22页 |
| 1.1.1 脊椎动物性别决定与性别分化机制 | 第15-18页 |
| 1.1.2 无脊椎动物性别决定与性别分化机制 | 第18-22页 |
| 1.2 内分泌系统在调控性别分化中的作用 | 第22-27页 |
| 1.2.1 脊椎动物内分泌系统在调控性别分化中的作用 | 第22-23页 |
| 1.2.2 无脊椎动物内分泌系统在调控性别分化中的作用 | 第23-27页 |
| 1.3 甲壳动物性别分化调控机制的研究 | 第27-30页 |
| 1.3.1 眼柄神经肽激素CHH家族的研究 | 第27-28页 |
| 1.3.2 促雄性腺激素IAG及其受体的研究 | 第28-29页 |
| 1.3.3 “眼柄-促雄性腺-精巢”内分泌轴与性别分化的关系 | 第29-30页 |
| 1.4 本论文研究的目的、意义及主要研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 对虾促雄性腺激素受体IAGR基因的鉴定及功能研究 | 第32-76页 |
| 2.1 材料和方法 | 第32-60页 |
| 2.1.1 主要试剂及仪器 | 第32页 |
| 2.1.2 实验材料及组织取样 | 第32页 |
| 2.1.3 所用引物 | 第32-36页 |
| 2.1.4 总RNA提取及cDNA合成 | 第36-37页 |
| 2.1.5 基因克隆 | 第37-40页 |
| 2.1.6 序列分析 | 第40-41页 |
| 2.1.7 半定量PCR | 第41-42页 |
| 2.1.8 石蜡切片 | 第42-44页 |
| 2.1.9 原位杂交 | 第44-48页 |
| 2.1.10 荧光共定位 | 第48-54页 |
| 2.1.11 酵母双杂交 | 第54-56页 |
| 2.1.12 双链RNA合成及最佳干扰剂量筛选 | 第56-60页 |
| 2.1.13 实时荧光定量PCR | 第60页 |
| 2.2 结果 | 第60-73页 |
| 2.2.1 FcIAGR基因ORF序列的克隆和序列分析 | 第60-65页 |
| 2.2.2 FcIAGR的多序列比对和聚类分析 | 第65-66页 |
| 2.2.3 FcIAGR基因在雌雄不同组织中的表达分布 | 第66-67页 |
| 2.2.4 FcIAGR基因在精巢和AG组织中的定位 | 第67-68页 |
| 2.2.5 FcIAGR与FcIAGs的荧光共定位分析 | 第68-70页 |
| 2.2.6 FcIAGR与FcIAGs的相互作用的酵母双杂交实验 | 第70-72页 |
| 2.2.7 FcIAGR基因沉默对雄性个体精巢发育的影响 | 第72-73页 |
| 2.3 讨论 | 第73-76页 |
| 第三章 对虾雌雄差异表达眼柄神经肽CHH的鉴定及功能研究 | 第76-106页 |
| 3.1 材料和方法 | 第76-91页 |
| 3.1.1 主要试剂及仪器 | 第76页 |
| 3.1.2 实验材料及组织取样 | 第76页 |
| 3.1.3 所用引物 | 第76-80页 |
| 3.1.4 总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第80页 |
| 3.1.5 基因克隆 | 第80-82页 |
| 3.1.6 序列分析 | 第82-83页 |
| 3.1.7 半定量PCR | 第83-84页 |
| 3.1.8 石蜡切片 | 第84页 |
| 3.1.9 原位杂交 | 第84-85页 |
| 3.1.10 单侧眼柄摘除 | 第85页 |
| 3.1.11 双链RNA合成及最佳干扰剂量筛选 | 第85-86页 |
| 3.1.12 实时荧光定量PCR | 第86页 |
| 3.1.13 重组蛋白的表达和纯化 | 第86-91页 |
| 3.1.14 重组蛋白的注射 | 第91页 |
| 3.2 结果 | 第91-102页 |
| 3.2.1 雌雄个体差异性表达的眼柄神经肽LvCHHs基因的筛选 | 第91-92页 |
| 3.2.2 LvCHH4751、LvCHH4752基因ORF序列的克隆和序列分析 | 第92-94页 |
| 3.2.3 LvCHH4751、LvCHH4752基因的多序列比对和聚类分析 | 第94-96页 |
| 3.2.4 LvCHH4751、LvCHH4752基因在雌雄不同组织中的表达分布 | 第96-97页 |
| 3.2.5 LvCHH4751、LvCHH4752在眼柄组织中的定位 | 第97-98页 |
| 3.2.6 单侧眼柄摘除对LvIAG基因表达的影响 | 第98-99页 |
| 3.2.7 LvCHH4751、LvCHH4752基因沉默对LvIAG基因表达的影响 | 第99-100页 |
| 3.2.8 LvCHH4751、LvCHH4752重组蛋白的注射对LvIAG基因表达的影响 | 第100-102页 |
| 3.3 讨论 | 第102-106页 |
| 第四章 对虾CHH受体LVGC基因的鉴定及功能研究 | 第106-132页 |
| 4.1 材料和方法 | 第106-116页 |
| 4.1.1 主要试剂及仪器 | 第106页 |
| 4.1.2 实验材料及组织取样 | 第106页 |
| 4.1.3 所用引物 | 第106-112页 |
| 4.1.4 不同组织表达谱的检测 | 第112页 |
| 4.1.5 总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第112页 |
| 4.1.6 基因克隆 | 第112页 |
| 4.1.7 序列分析 | 第112-113页 |
| 4.1.8 实时荧光定量PCR | 第113-114页 |
| 4.1.9 亚细胞定位 | 第114-115页 |
| 4.1.10 酵母双杂交 | 第115-116页 |
| 4.1.11 双链RNA合成及最佳干扰剂量筛选 | 第116页 |
| 4.2 结果 | 第116-129页 |
| 4.2.1 LvGCs基因的组织分布 | 第116-119页 |
| 4.2.2 LvCHH4751、LvCHH4752基因沉默后LvGCs基因表达的变化 | 第119-120页 |
| 4.2.3 LvGC基因ORF序列的克隆和序列分析 | 第120-123页 |
| 4.2.4 LvGC基因的多序列比对和聚类分析 | 第123-124页 |
| 4.2.5 LvGC的亚细胞定位 | 第124-125页 |
| 4.2.6 LvCHH4751、LvCHH4752过表达后LvGC基因表达的变化 | 第125-126页 |
| 4.2.7 LvGC与LvCHHs相互作的酵母双杂交实验 | 第126-127页 |
| 4.2.8 LvGC基因的沉默对LvIAG基因表达的影响 | 第127-129页 |
| 4.3 讨论 | 第129-132页 |
| 结论 | 第132-134页 |
| 参考文献 | 第134-150页 |
| 附录Ⅰ 主要试剂 | 第150-152页 |
| 附录Ⅱ 主要仪器 | 第152-154页 |
| 致谢 | 第154-156页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第156页 |
