| 摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 第一章 前言 | 第18-29页 |
| 1.1 药物代谢在新药研发中的意义 | 第18-19页 |
| 1.2 药物代谢部位和药物代谢酶 | 第19-20页 |
| 1.2.1 药物的代谢部位 | 第19页 |
| 1.2.2 药物代谢酶 | 第19-20页 |
| 1.3 体外药物代谢研究内容 | 第20-25页 |
| 1.3.1 药物代谢机制研究 | 第20-21页 |
| 1.3.2 药物-药物相互作用 | 第21-25页 |
| 1.4 药物代谢体外研究的研究体系 | 第25-26页 |
| 1.4.1 与CYP450相关的研究体系 | 第25-26页 |
| 1.4.2 P-gp介导的药物相互作用体外研究体系 | 第26页 |
| 1.5 β2-受体激动剂研究概况 | 第26-27页 |
| 1.5.1 β2受体激动剂的作用机制 | 第26-27页 |
| 1.5.2 β2受体激动剂研究现状 | 第27页 |
| 1.6 川丁特罗简介及立题依据 | 第27-29页 |
| 第二章 川丁特罗体外代谢研究 | 第29-50页 |
| 2.1 药品、试剂及仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 实验条件 | 第30-32页 |
| 2.3 大鼠肝微粒体(RLM)的制备 | 第32页 |
| 2.4 大鼠肝脏、肾脏、肺及小肠S9组分的制备 | 第32页 |
| 2.5 RLM和各组织S9组分蛋白浓度及RLM中CYP450含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.6 川丁特罗在大鼠体内代谢部位的考察 | 第33-34页 |
| 2.7 川丁特罗在大鼠体内的代谢实验 | 第34页 |
| 2.8 川丁特罗在RLM及人肝微粒体(HLM)中的代谢实验 | 第34-35页 |
| 2.9 实验结果 | 第35-48页 |
| 2.9.1 RLM蛋白浓度及CYP450浓度 | 第35-36页 |
| 2.9.2 测定S9组分中川丁特罗的HPLC法分析方法验证 | 第36-39页 |
| 2.9.3 川丁特罗在大鼠肝脏、肾脏、肺和小肠S9组分中代谢量的比较 | 第39-40页 |
| 2.9.4 川丁特罗在大鼠尿样中的代谢物结构推断 | 第40-45页 |
| 2.9.5 川丁特罗在HLM和RLM孵育液中的代谢物分析 | 第45-48页 |
| 2.10 讨论 | 第48-50页 |
| 2.10.1 RLM制备方法 | 第48页 |
| 2.10.2 川丁特罗在大鼠体内的代谢部位 | 第48页 |
| 2.10.3 川丁特罗在大鼠体内外代谢及在RLM和HLM中代谢的比较 | 第48-50页 |
| 第三章 催化川丁特罗羰基化代谢的CYP450同工酶研究 | 第50-70页 |
| 3.1 药品、试剂和仪器 | 第50页 |
| 3.2 实验条件 | 第50-52页 |
| 3.3 化学抑制剂法研究催化川丁特罗羰基化代谢的CYP450同工酶 | 第52-54页 |
| 3.3.1 川丁特罗在HLM中酶促反应动力学参数的测定 | 第52-53页 |
| 3.3.2 孵育条件的考察 | 第53页 |
| 3.3.3 HLM中川丁特罗羰基化代谢物浓度的测定 | 第53-54页 |
| 3.4 人重组酶法研究催化川丁特罗羰基化代谢的CYP450同工酶 | 第54-55页 |
| 3.4.1 孵育体系组成 | 第54页 |
| 3.4.2 川丁特罗在人重组酶中的代谢实验 | 第54页 |
| 3.4.3 人重组酶中M1生成速率测定孵育条件的考察 | 第54-55页 |
| 3.5 实验结果 | 第55-67页 |
| 3.5.1 测定HLM中川丁特罗的HPLC法分析方法验证 | 第55-56页 |
| 3.5.2 测定HLM中M1的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第56-58页 |
| 3.5.3 测定人重组酶中M1的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第58-60页 |
| 3.5.4 川丁特罗消除及M1生成的酶促反应动力学实验孵育条件 | 第60-61页 |
| 3.5.5 川丁特罗在HLM中酶促反应动力学参数 | 第61-62页 |
| 3.5.6 特异性化学抑制剂对M1生成量的影响 | 第62-63页 |
| 3.5.7 CYP2E1和CYP3A4/5对川丁特罗的代谢 | 第63-65页 |
| 3.5.8 M1在HLM和CYP2E1中的酶促反应动力学参数 | 第65-67页 |
| 3.6 讨论 | 第67-70页 |
| 3.6.1 催化川丁特罗羰基化代谢的CYP450同工酶表型的确认 | 第67-68页 |
| 3.6.2 反应条件的选择 | 第68-70页 |
| 第四章 催化川丁特罗叔丁基羟基化代谢的CYP450同工酶研究 | 第70-81页 |
| 4.1 药品、试剂和仪器 | 第70页 |
| 4.2 实验条件 | 第70页 |
| 4.3 化学抑制剂法研究催化川丁特罗叔丁基羟基化代谢的CYP450同工酶 | 第70-71页 |
| 4.3.1 M2在HLM中生成量测定孵育条件的考察 | 第70页 |
| 4.3.2 HLM中川丁特罗叔丁基羟基化代谢物浓度的半定量测定 | 第70-71页 |
| 4.4 人重组酶法研究催化川丁特罗叔丁基羟基化代谢的CYP450同工酶 | 第71-72页 |
| 4.4.1 孵育体系组成 | 第71页 |
| 4.4.2 川丁特罗在人重组酶中的代谢实验 | 第71页 |
| 4.4.3 M2在人重组酶中生成量测定孵育条件的考察 | 第71-72页 |
| 4.5 实验结果 | 第72-80页 |
| 4.5.1 测定HLM及人重组酶中M2的UPLC-MS/MS半定量法分析方法验证 | 第72-73页 |
| 4.5.2 孵育时间、HLM蛋白浓度及酶浓度对M2生成量的影响 | 第73-75页 |
| 4.5.3 特异性化学抑制剂对M2生成量的影响 | 第75-76页 |
| 4.5.4 CYP2E1、CYP2D6、CYP2C19和CYP3A4/5对川丁特罗的代谢 | 第76-79页 |
| 4.5.5 M2在CYP2C 19和CYP3A4/5中的生成速率 | 第79-80页 |
| 4.6 讨论 | 第80-81页 |
| 第五章 川丁特罗对大鼠和人肝中主要CYP450酶活性的抑制及诱导作用研究 | 第81-115页 |
| 5.1 药品、试剂及仪器设备 | 第81-82页 |
| 5.2 实验条件 | 第82-87页 |
| 5.3 川丁特罗对大鼠体内主要CYP450酶活性的影响 | 第87-89页 |
| 5.3.1 实验动物及给药方案 | 第87页 |
| 5.3.2 RLM的制备、蛋白浓度的测定及CYP450含量测定 | 第87-88页 |
| 5.3.3 体外孵育法研究川丁特罗对RLM中主要CYP450酶的抑制作用 | 第88-89页 |
| 5.3.4 大鼠给予川丁特罗后对RLM中主要CYP450酶活性的影响 | 第89页 |
| 5.4 川丁特罗对HLM中主要CYP450酶活性的抑制作用研究 | 第89页 |
| 5.5 川丁特罗对原代人肝细胞中CYP1A2和CYP3A4/5的诱导作用研究 | 第89-90页 |
| 5.6 实验结果 | 第90-113页 |
| 5.6.1 同时测定RLM中五种CYP450酶活性的HPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第90-94页 |
| 5.6.2 同时测定HLM中五种CYP450酶活性的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第94-98页 |
| 5.6.3 测定HLM中6β-羟基睾酮的UPLC-MS法分析方法验证 | 第98-100页 |
| 5.6.4 同时测定原代人肝细胞中CYP1A2和CYP3A4/5酶活性的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第100-103页 |
| 5.6.5 探针底物在RLM和HLM中的孵育条件 | 第103-104页 |
| 5.6.6 川丁特罗对大鼠和人肝中主要CYP450酶的抑制作用评价 | 第104-108页 |
| 5.6.7 川丁特罗在体内对大鼠肝脏中蛋白浓度、CYP450含量及主要代谢酶活性的影响 | 第108-110页 |
| 5.6.8 川丁特罗对人肝中CYP1A2和CYP3A4/5活性的诱导作用评价 | 第110-113页 |
| 5.7 讨论 | 第113-115页 |
| 5.7.1 研究方法的选择 | 第113-114页 |
| 5.7.2 川丁特罗对大鼠和人肝中主要CYP450酶活性的影响 | 第114-115页 |
| 第六章 川丁特罗在Caco-2细胞模型中的转运及对P-糖蛋白的调控作用研究 | 第115-132页 |
| 6.1 实验材料和仪器 | 第115-116页 |
| 6.2 实验条件 | 第116-118页 |
| 6.3 细胞培养 | 第118页 |
| 6.4 MTT实验 | 第118-119页 |
| 6.5 川丁特罗在Caco-2细胞中的转运实验 | 第119页 |
| 6.6 川丁特罗对P-gp的诱导作用研究 | 第119-120页 |
| 6.7 川丁特罗对P-gp的抑制作用研究 | 第120页 |
| 6.8 样品处理方法 | 第120页 |
| 6.9 数据分析与处理 | 第120页 |
| 6.10 实验结果 | 第120-130页 |
| 6.10.1 测定转运液中川丁特罗的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第120-122页 |
| 6.10.2 测定转运液中P-gp特异性底物地高辛的UPLC-MS/MS法分析方法验证 | 第122-123页 |
| 6.10.3 川丁特罗对Caco-2细胞安全浓度范围 | 第123-124页 |
| 6.10.4 川丁特罗在Caco-2细胞中的转运机制 | 第124-127页 |
| 6.10.5 川丁特罗对P-gp的诱导作用和抑制作用评价 | 第127-130页 |
| 6.11 讨论 | 第130-132页 |
| 6.11.1 川丁特罗在Caco-2细胞中的转运 | 第130-131页 |
| 6.11.2 川丁特罗对Caco-2细胞中P-gp的影响 | 第131-132页 |
| 第七章 结论 | 第132-136页 |
| 参考文献 | 第136-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 个人简历 | 第146-147页 |
| 学位论文自愿预先检测申请表 | 第147页 |
