| 本论文创新点 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 本论文缩略词表 | 第14-16页 |
| 1 引言 | 第16-36页 |
| 1.1 侧根的生长发育及其调控机制 | 第16-30页 |
| 1.1.1 根的结构 | 第16-17页 |
| 1.1.2 侧根的发生 | 第17-19页 |
| 1.1.3 影响侧根发生的因素 | 第19-30页 |
| 1.2 植物对盐胁迫的应答反应 | 第30-33页 |
| 1.3 bHLH家族的研究进展 | 第33-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-56页 |
| 2.1 材料及培养条件 | 第36页 |
| 2.2 本研究中使用的bHLH112序列相关引物及载体上引物 | 第36-37页 |
| 2.3 RNA的提取和mRNA的反转录 | 第37-39页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第37-39页 |
| 2.3.2 mRNA的反转录 | 第39页 |
| 2.4 基因组DNA提取 | 第39-40页 |
| 2.5 大肠杆菌的感受态制备及转化 | 第40页 |
| 2.6 农杆菌的感受态制备及转化 | 第40-42页 |
| 2.7 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第42页 |
| 2.8 重组质粒的构建及转基因株系的筛选 | 第42-48页 |
| 2.8.1 小量质粒提取 | 第42-43页 |
| 2.8.2 DNA片段凝胶纯化回收 | 第43页 |
| 2.8.3 线性载体去磷酸化 | 第43-44页 |
| 2.8.4 pbHLH112::GUS转基因株系的构建 | 第44-45页 |
| 2.8.5 35S::bHLH112-GFP转基因株系的构建 | 第45-46页 |
| 2.8.6 bHLH112基因过量表达株系的构建 | 第46-48页 |
| 2.9 bHLH112功能缺失突变体的获得 | 第48-49页 |
| 2.10 GUS染色 | 第49页 |
| 2.11 半定量PCR检测 | 第49-50页 |
| 2.12 定量PCR检测基因的表达量 | 第50-53页 |
| 2.12.1 荧光定量PCR | 第50-51页 |
| 2.12.2 本研究中使用的定量PCR引物 | 第51-53页 |
| 2.13 激光扫描共聚焦显微镜观察GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第53页 |
| 2.14 地上部分鲜重和主根长的统计 | 第53页 |
| 2.15 侧根数目及侧根原基的观察统计 | 第53-54页 |
| 2.16 bHLH112过量表达株系与生长素标记株系DR5::GUS的杂交 | 第54页 |
| 2.17 sos3-1 bhlh112-2双突变的获得 | 第54-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-86页 |
| 3.1 AtbHLH112表达模式研究 | 第56-62页 |
| 3.1.1 半定量结果显示bHLH112基因在拟南芥各组织中表达情况 | 第56页 |
| 3.1.2 bHLH112基因的启动子融合GUS基因显示bHLH112表达模式 | 第56-59页 |
| 3.1.3 各种激素和非生物胁迫处理条件下bHLH112基因的表达变化 | 第59-60页 |
| 3.1.4 bHLH112蛋白亚细胞定位 | 第60-62页 |
| 3.2 bHLH112过量表达株系和功能缺失突变体的获得及表型分析 | 第62-68页 |
| 3.2.1 bHLH112基因过量表达株系的鉴定 | 第62-63页 |
| 3.2.2 bHLH112基因功能缺失突变体的鉴定 | 第63-64页 |
| 3.2.3 bHLH112基因过量表达株系的表型分析 | 第64-68页 |
| 3.2.4 bHLH112基因功能缺失突变体的表型分析 | 第68页 |
| 3.3 bHLH112通过影响生长素信号调节侧根发育 | 第68-78页 |
| 3.3.1 过量表达株系bHLH112ox-1中DR5::GUS的染色结果 | 第69-71页 |
| 3.3.2 外源施加IAA对bHLH112过量表达株系及功能缺失突变体主根根长的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.3 外源施加IAA能够回复bHLH112过量表达株系少侧根表型 | 第72-73页 |
| 3.3.4 外源施加IAA能够回复bHLH112过量表达株系侧根原基附近DR5::GUS的染色 | 第73-74页 |
| 3.3.5 外源施加IAA对bHLH112功能缺失突变体侧根密度的影响 | 第74页 |
| 3.3.6 bHLH112过量表达株系中生长素途径相关基因的表达情况 | 第74-77页 |
| 3.3.7 生长素处理对CWR基因表达水平的影响 | 第77-78页 |
| 3.4 bHLH112参与拟南芥对盐胁迫的应答 | 第78-86页 |
| 3.4.1 bHLH112过量表达株系及功能缺失突变体盐胁迫处理条件下的表型 | 第78-81页 |
| 3.4.2 盐胁迫处理条件下过量表达株系中盐胁迫相关基因的表达情况 | 第81-83页 |
| 3.4.3 sos3-1突变体在盐胁迫条件下bHLH112的表达情况以及sos3-1bhlh112-2双突变的表型 | 第83-86页 |
| 4 讨论 | 第86-95页 |
| 4.1 bHLH112的表达受到胁迫及胁迫相关激素的诱导 | 第86-87页 |
| 4.2 过量表达bHLH112抑制拟南芥幼苗的生长 | 第87-88页 |
| 4.3 bHLH112抑制侧根发育通过影响生长素信号 | 第88-90页 |
| 4.4 bHLH112参与了拟南芥对盐胁迫的应答 | 第90-92页 |
| 4.5 结论与展望 | 第92-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 在读期间发表及投稿论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
