| 摘要 | 第2-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 前言综述 | 第16-37页 |
| 1. 运动性心脏肥大的运动生理学研究进展 | 第16-22页 |
| 1.1 运动引起心脏左室肥大的生理学研究进展 | 第17-21页 |
| 1.1.1 向心性心脏肥大 | 第18-19页 |
| 1.1.2 离心性心脏肥大 | 第19-21页 |
| 1.1.3 肥大心脏的功能变化 | 第21页 |
| 1.2 运动引起心脏右室肥大的生理学研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 运动引起左心房肥大的生理学研究进展 | 第22页 |
| 2. 心脏肥大机制的究进展 | 第22-32页 |
| 2.1 内分泌激素在心脏肥大中作用的研究进展 | 第23-27页 |
| 2.1.1 肾素-血管紧张素系统对心脏肥大的调节作用 | 第23-25页 |
| 2.1.2 儿茶酚胺对心脏肥大的调节作用 | 第25页 |
| 2.1.3 心钠素对心脏肥大的调节作用 | 第25-26页 |
| 2.1.4 心肌内皮素对心脏肥大的调节作用 | 第26页 |
| 2.1.5 胰岛素样生长因子对心脏肥大的调节作用 | 第26-27页 |
| 2.1.6 血管内皮生长因子对心脏肥大的调节作用 | 第27页 |
| 2.2 G蛋白偶联受体在心脏肥大中作用的研究进展 | 第27-28页 |
| 2.3 心脏肥大相关信号通路的研究进展 | 第28-32页 |
| 2.3.1 ERK信号通路在运动性心脏肥大中的作用 | 第28-29页 |
| 2.3.2 PI3K/AKT/mTOR信号通路在运动性心脏肥大中的作用 | 第29-32页 |
| 3. miRNA参与心脏肥大调节的研究进展 | 第32-35页 |
| 4. 心脏肥大大鼠模型 | 第35-36页 |
| 5. 展望 | 第36-37页 |
| 实验部分 | 第37-77页 |
| 1. 引言 | 第37-38页 |
| 2. 材料与方法 | 第38-51页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第38-41页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 动物饲养与分组 | 第41页 |
| 2.3 运动训练方案 | 第41页 |
| 2.4 体重测定 | 第41页 |
| 2.5 血压和心率测定 | 第41-42页 |
| 2.6 样本采集 | 第42-43页 |
| 2.7 苏木素伊红染色(HE染色) | 第43-44页 |
| 2.7.1 苏木素染液配制 | 第43页 |
| 2.7.2 伊红染液配制 | 第43页 |
| 2.7.3 冰冻切片机切片 | 第43页 |
| 2.7.4 HE染色步骤 | 第43-44页 |
| 2.8 心肌组织HE染色图片镜下观察及图像分析 | 第44页 |
| 2.9 心肌组织总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 2.9.1 准备工作 | 第44页 |
| 2.9.2 提取总RNA | 第44-45页 |
| 2.9.3 RNA质量和浓度检测 | 第45页 |
| 2.10 miRNA芯片 | 第45-46页 |
| 2.10.1 RNA标记 | 第45页 |
| 2.10.2 芯片杂交 | 第45-46页 |
| 2.10.3 芯片结果分析 | 第46页 |
| 2.11 使用microRNA TaqMan Assay试剂盒检测miRNA的表达量 | 第46-47页 |
| 2.11.1 miRNA反转录 | 第46-47页 |
| 2.11.2 miRNA实时荧光定量PCR | 第47页 |
| 2.12 实时荧光定量PCR测定目的基因mRNA的表达量 | 第47-49页 |
| 2.12.1 引物设计 | 第47-48页 |
| 2.12.2 实时荧光定量反应体系 | 第48页 |
| 2.12.3 实时荧光定量反应条件 | 第48页 |
| 2.12.4 引物扩增效率的计算 | 第48-49页 |
| 2.12.5 实时荧光定量结果的计算 | 第49页 |
| 2.13 蛋白印迹法检测 | 第49-51页 |
| 2.13.1 提取心室组织蛋白 | 第49页 |
| 2.13.2 考马斯亮蓝法检测蛋白含量 | 第49页 |
| 2.13.3 制胶 | 第49-50页 |
| 2.13.4 电泳 | 第50页 |
| 2.13.5 转膜 | 第50页 |
| 2.13.6 免疫杂交与显色 | 第50-51页 |
| 2.14 统计与分析 | 第51页 |
| 3. 结果 | 第51-70页 |
| 3.1 大鼠体重变化 | 第51-52页 |
| 3.2 8周游泳运动对大鼠血压和心率的影响 | 第52-53页 |
| 3.3 提取总RNA的纯度与完整性 | 第53-54页 |
| 3.4 引物扩增效率的检测 | 第54-57页 |
| 3.5 荧光定量PCR的溶解曲线 | 第57-59页 |
| 3.6 8周游泳运动后大鼠心脏肥大的评价 | 第59-60页 |
| 3.7 8周游泳运动对大鼠心肌病理性标志物mRNA表达的影响 | 第60-61页 |
| 3.8 生物芯片分析microRNA表达 | 第61-63页 |
| 3.9 介导运动性心脏肥大的信号通路相关蛋白的表达 | 第63-65页 |
| 3.9.1 EKR和phospho~(Thr202/Tyr204)-ERK1/2的蛋白表达量 | 第63页 |
| 3.9.2 AKT1和phospho~(Ser473)-AKT的蛋白表达量 | 第63-64页 |
| 3.9.3 mTOR和phospho~(Ser2448)-mTOR的蛋白表达量 | 第64-65页 |
| 3.10 miRNA靶点及表达分析 | 第65-67页 |
| 3.10.1 miRNA靶点的生物信息学预测 | 第65页 |
| 3.10.2 miRNA表达的芯片分析 | 第65-66页 |
| 3.10.3 miRNA表达的实时荧光定量PCR分析 | 第66-67页 |
| 3.11 miRNA靶点的表达分析 | 第67-70页 |
| 3.11.1 PI3K(p110α)的表达 | 第67-68页 |
| 3.11.2 PTEN的表达 | 第68页 |
| 3.11.3 TSC2的表达 | 第68-70页 |
| 4. 讨论 | 第70-76页 |
| 5. 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
