摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
中英文对照及英文缩写词表 | 第6-9页 |
1. 引言 | 第9-14页 |
1.1 DC表面的模式识别受体 | 第9-10页 |
1.2 MGL的发现及成员 | 第10-11页 |
1.3 MGL的分布、分子结构及配体 | 第11-12页 |
1.4 MGL的功能 | 第12-13页 |
1.4.1 MGL对DC迁移的影响 | 第12页 |
1.4.2 MGL的识别和内化功能 | 第12-13页 |
1.4.3 MGL对T细胞的影响 | 第13页 |
1.5 研究的内容和意义 | 第13-14页 |
2. 材料与方法 | 第14-22页 |
2.1 试剂和实验材料 | 第14-17页 |
2.1.1 抗体及试剂 | 第14-15页 |
2.1.2 实验材料 | 第15-17页 |
2.2 实验仪器 | 第17-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-22页 |
2.3.1 单核细胞衍生的DC诱导 | 第18页 |
2.3.2 流式细胞术 | 第18页 |
2.3.3 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第18-19页 |
2.3.4 PCR及产物回收 | 第19-20页 |
2.3.5 重组子连接及转化实验 | 第20页 |
2.3.6 质粒提取及双酶切实验 | 第20页 |
2.3.7 融合蛋白的诱导表达 | 第20-21页 |
2.3.8 融合蛋白的亲和纯化方法 | 第21页 |
2.3.9 Western blot | 第21-22页 |
3. 实验结果 | 第22-39页 |
3.1 从iDC的cDNA中扩增获得MGL的cds基因片段 | 第22-25页 |
3.2 MGL胞外区的两种原核表达载体的构建及蛋白表达形式分析 | 第25-30页 |
3.3 MGL全长的两种原核表达载体的构建及蛋白纯化与验证 | 第30-36页 |
3.4 真核表达载体pcDNA3.1(+)-MGL和pWPXLd-MGL的构建 | 第36-39页 |
4. 讨论 | 第39-41页 |
4.1 原核表达载体类型及目的蛋白长度影响MGL蛋白的表达形式 | 第39页 |
4.2 构建两种真核表达载体的设计思路 | 第39-41页 |
5. 总结 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
致谢 | 第46页 |