| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 PRRSV简介 | 第11-13页 |
| 1.2 PRRSV的非结构蛋白及其功能 | 第13-15页 |
| 1.3 PRRSV的结构蛋白及功能 | 第15-18页 |
| 1.4 PRRSV感染与宿主免疫反应 | 第18-19页 |
| 1.5 PRRSV N蛋白与细胞蛋白相互作用的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.6 细胞蛋白PARP-1、DHX9的功能及其与病毒复制的关系 | 第20-21页 |
| 1.7 PRRSV基因组的复制转录机制 | 第21-23页 |
| 1.8 定量质谱技术及其在蛋白互作研究中的应用 | 第23-24页 |
| 1.9 本研究的目的及内容 | 第24-26页 |
| 第二章 PRRSV感染PAMS的差异表达蛋白分析及N蛋白的互作组蛋白分析 | 第26-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.2.1 PRRSV感染PAMs的差异表达蛋白质分析 | 第29-34页 |
| 2.2.2 与N蛋白相互作用的细胞蛋白分析 | 第34-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 PRRSV N蛋白与宿主蛋白PARP-1 的相互作用对病毒增殖的影响 | 第40-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第40页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 3.2 结果与分析 | 第43-48页 |
| 3.2.1 3-AB对细胞活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.2 3-AB对细胞蛋白P ARP-1 的抑制作用 | 第44页 |
| 3.2.3 抑制PARP-1 的功能对病毒滴度的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.4 抑制PARP-1 的功能对病毒感染率的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.5 抑制PARP-1 的功能对病毒蛋白合成的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.6 抑制PARP-1 的功能对病毒RNA合成的影响 | 第47页 |
| 3.2.7 PARP-1 抑制剂具有抗病毒活性 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 PRRSV N蛋白与宿主蛋白DHX9的相互作用对病毒复制的影响 | 第50-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 4.2 结果与分析 | 第55-63页 |
| 4.2.1 免疫共沉淀验证N蛋白与细胞蛋白DHX9的相互作用 | 第55-56页 |
| 4.2.2 coIP验证PRRSV感染过程中N蛋白与内源性DHX9的相互作用 | 第56-57页 |
| 4.2.3 荧光显微镜观察外源表达的N蛋白与DHX9在细胞中的定位 | 第57-58页 |
| 4.2.4 内源性细胞蛋白DHX9与N蛋白互作后进行重新定位 | 第58-59页 |
| 4.2.5 沉默DHX9的表达对PRRSV RNA合成的影响 | 第59-61页 |
| 4.2.6 过量表达DHX9对PRRSV RNA合成的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.7 DHX9表达水平对病毒增殖的影响 | 第62-63页 |
| 4.3 讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 PRRSV N蛋白与RDRP的相互作用及其对病毒复制的影响 | 第65-93页 |
| 5.1 材料与方法 | 第65-70页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第66-70页 |
| 5.2 结果与分析 | 第70-89页 |
| 5.2.1 确定真核表达的PRRSV N蛋白与NSP9间的相互作用 | 第70-71页 |
| 5.2.2 确定NVSL 97-7895毒株NSP9与N蛋白结合的区域 | 第71-75页 |
| 5.2.3 其他PRRSV毒株N蛋白与NSP9间的相互作用及互作区域的鉴定 | 第75-78页 |
| 5.2.4 NSP9与N蛋白相互作用的关键氨基酸位点的确定 | 第78-83页 |
| 5.2.5 N蛋白结合NSP9的关键氨基酸位点 | 第83-86页 |
| 5.2.6 N蛋白与NSP9互作对病毒RNA合成的影响 | 第86-89页 |
| 5.3 讨论 | 第89-93页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第93-95页 |
| 6.1 结论 | 第93页 |
| 6.2 创新点 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-110页 |
| 附录 | 第110-120页 |
| 附录1 质谱数据及本文所用引物 | 第110-115页 |
| 附录2 本论文所构建的质粒图谱 | 第115-119页 |
| 附录3 不同毒株NSP9与N蛋白序列比对结果 | 第119-120页 |
| 缩略词表 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 作者简介 | 第123页 |
