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干扰素诱导跨膜蛋白3在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖的影响

摘要第4-8页
abstract第8-11页
绪论第17-21页
第一章 文献综述第21-37页
    1.1 干扰素诱导跨膜蛋白家族第21-32页
        1.1.1 IFITM的发现和相关基因产物第21-23页
        1.1.2 IFITM分子特点及IFITM的调控第23-24页
        1.1.3 IFITM的主要功能第24-32页
    1.2 乳腺癌的研究进展第32-37页
        1.2.1 乳腺癌的基本概况第32-33页
        1.2.2 乳腺癌常见分子标记物第33-34页
        1.2.3 乳腺癌与IFITM的研究进展第34-37页
第二章 材料与方法第37-55页
    2.1 实验材料第37-42页
        2.1.1 主要试剂第37-38页
        2.1.2 仪器与设备第38-39页
        2.1.3 试剂配制第39-41页
        2.1.4 引物及抗体信息第41-42页
        2.1.5 组织与细胞第42页
    2.2 主要实验方法第42-53页
        2.2.1 免疫组化染色第42-44页
        2.2.2 细胞培养第44页
        2.2.3 Real-time PCR第44-46页
        2.2.4 Western Blot第46-47页
        2.2.5 针对IFITM3的短发夹sh RNA序列设计、合成及慢病毒载体质粒的构建第47页
        2.2.6 慢病毒的包装第47-49页
        2.2.7 确定MOI值第49页
        2.2.8 慢病毒感染细胞第49-50页
        2.2.9 MTT比色法检测沉默IFITM3后细胞的增殖第50页
        2.2.10 Brd U掺入实验检测沉默IFITM3后细胞的增殖第50-51页
        2.2.11 流式细胞仪检测沉默IFITM3后细胞周期第51页
        2.2.12 平板克隆形成实验观察沉默IFITM3后克隆形成能力第51-52页
        2.2.13 细胞划痕实验检测沉默IFITM3后细胞迁徙能力第52页
        2.2.14 Transwell侵袭实验沉默IFITM3后细胞侵袭能力第52-53页
    2.3 统计学分析第53-55页
第三章 结果第55-75页
    3.1 IFITM3蛋白在乳腺癌组织中的表达及相关临床意义第55-62页
        3.1.1 乳腺癌及其癌旁组织IFITM3的表达第55-56页
        3.1.2 乳腺导管内原位癌组内IFITM3的强阳性表达与临床特征的关系第56-57页
        3.1.3 乳腺浸润性导管癌组内IFITM3强阳性表达与临床资料之间的关系第57-62页
    3.2 乳腺癌细胞内IFITM3的m RNA表达第62页
    3.3 慢病毒感染MCF-7 和MDA-MB-231 细胞抑制IFITM3表达第62-65页
        3.3.1 慢病毒质粒转染 293T细胞第62-63页
        3.3.2 慢病毒滴度测定第63页
        3.3.3 慢病毒感染MCF-7 和MDA-MB-231 细胞第63-64页
        3.3.4 Real-time PCR检测sh RNA慢病毒感染乳腺癌细胞后IFITM3基因表达第64页
        3.3.5 Western Blot检测sh RNA慢病毒感染乳腺癌细胞后IFITM3蛋白表达第64-65页
    3.4 沉默IFITM3抑制乳腺癌细胞增殖和克隆形成第65-70页
        3.4.1 MTT法检测细胞增殖第65-66页
        3.4.2 Brd U掺入实验检测细胞增殖第66-67页
        3.4.3 流式细胞检测细胞周期第67-68页
        3.4.4 平板克隆实验检测克隆形成能力第68-69页
        3.4.5 沉默IFITM3对周期相关蛋白表达的影响第69-70页
    3.5 沉默IFITM3抑制乳腺癌细胞迁徙和侵袭能力第70-73页
        3.5.1 细胞划痕实验检测细胞迁徙能力第70-71页
        3.5.2 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力第71-72页
        3.5.3 沉默IFITM3后对MMP-9 表达的影响第72-73页
    3.6 雌激素及雌激素受体拮抗剂对MCF-7 的IFITM3表达影响第73-75页
第四章 讨论第75-81页
    4.1 IFITM3在乳腺癌组织内的表达的意义第75-76页
    4.2 慢病毒沉默乳腺癌细胞IFITM3的表达改变第76-77页
    4.3 慢病毒沉默IFITM3的表达改变乳腺癌细胞的增殖能力第77-78页
    4.4 慢病毒沉默IFITM3的表达改变乳腺癌细胞的迁移、侵袭能力第78-79页
    4.5 雌激素及雌激素受体拮抗剂对乳腺癌MCF-7 内IFITM3的影响第79-81页
结论第81-83页
参考文献第83-97页
学期间所取得的科研成果第97-99页
致谢第99页

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