摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-11页 |
绪论 | 第17-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-37页 |
1.1 干扰素诱导跨膜蛋白家族 | 第21-32页 |
1.1.1 IFITM的发现和相关基因产物 | 第21-23页 |
1.1.2 IFITM分子特点及IFITM的调控 | 第23-24页 |
1.1.3 IFITM的主要功能 | 第24-32页 |
1.2 乳腺癌的研究进展 | 第32-37页 |
1.2.1 乳腺癌的基本概况 | 第32-33页 |
1.2.2 乳腺癌常见分子标记物 | 第33-34页 |
1.2.3 乳腺癌与IFITM的研究进展 | 第34-37页 |
第二章 材料与方法 | 第37-55页 |
2.1 实验材料 | 第37-42页 |
2.1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第38-39页 |
2.1.3 试剂配制 | 第39-41页 |
2.1.4 引物及抗体信息 | 第41-42页 |
2.1.5 组织与细胞 | 第42页 |
2.2 主要实验方法 | 第42-53页 |
2.2.1 免疫组化染色 | 第42-44页 |
2.2.2 细胞培养 | 第44页 |
2.2.3 Real-time PCR | 第44-46页 |
2.2.4 Western Blot | 第46-47页 |
2.2.5 针对IFITM3的短发夹sh RNA序列设计、合成及慢病毒载体质粒的构建 | 第47页 |
2.2.6 慢病毒的包装 | 第47-49页 |
2.2.7 确定MOI值 | 第49页 |
2.2.8 慢病毒感染细胞 | 第49-50页 |
2.2.9 MTT比色法检测沉默IFITM3后细胞的增殖 | 第50页 |
2.2.10 Brd U掺入实验检测沉默IFITM3后细胞的增殖 | 第50-51页 |
2.2.11 流式细胞仪检测沉默IFITM3后细胞周期 | 第51页 |
2.2.12 平板克隆形成实验观察沉默IFITM3后克隆形成能力 | 第51-52页 |
2.2.13 细胞划痕实验检测沉默IFITM3后细胞迁徙能力 | 第52页 |
2.2.14 Transwell侵袭实验沉默IFITM3后细胞侵袭能力 | 第52-53页 |
2.3 统计学分析 | 第53-55页 |
第三章 结果 | 第55-75页 |
3.1 IFITM3蛋白在乳腺癌组织中的表达及相关临床意义 | 第55-62页 |
3.1.1 乳腺癌及其癌旁组织IFITM3的表达 | 第55-56页 |
3.1.2 乳腺导管内原位癌组内IFITM3的强阳性表达与临床特征的关系 | 第56-57页 |
3.1.3 乳腺浸润性导管癌组内IFITM3强阳性表达与临床资料之间的关系 | 第57-62页 |
3.2 乳腺癌细胞内IFITM3的m RNA表达 | 第62页 |
3.3 慢病毒感染MCF-7 和MDA-MB-231 细胞抑制IFITM3表达 | 第62-65页 |
3.3.1 慢病毒质粒转染 293T细胞 | 第62-63页 |
3.3.2 慢病毒滴度测定 | 第63页 |
3.3.3 慢病毒感染MCF-7 和MDA-MB-231 细胞 | 第63-64页 |
3.3.4 Real-time PCR检测sh RNA慢病毒感染乳腺癌细胞后IFITM3基因表达 | 第64页 |
3.3.5 Western Blot检测sh RNA慢病毒感染乳腺癌细胞后IFITM3蛋白表达 | 第64-65页 |
3.4 沉默IFITM3抑制乳腺癌细胞增殖和克隆形成 | 第65-70页 |
3.4.1 MTT法检测细胞增殖 | 第65-66页 |
3.4.2 Brd U掺入实验检测细胞增殖 | 第66-67页 |
3.4.3 流式细胞检测细胞周期 | 第67-68页 |
3.4.4 平板克隆实验检测克隆形成能力 | 第68-69页 |
3.4.5 沉默IFITM3对周期相关蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
3.5 沉默IFITM3抑制乳腺癌细胞迁徙和侵袭能力 | 第70-73页 |
3.5.1 细胞划痕实验检测细胞迁徙能力 | 第70-71页 |
3.5.2 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第71-72页 |
3.5.3 沉默IFITM3后对MMP-9 表达的影响 | 第72-73页 |
3.6 雌激素及雌激素受体拮抗剂对MCF-7 的IFITM3表达影响 | 第73-75页 |
第四章 讨论 | 第75-81页 |
4.1 IFITM3在乳腺癌组织内的表达的意义 | 第75-76页 |
4.2 慢病毒沉默乳腺癌细胞IFITM3的表达改变 | 第76-77页 |
4.3 慢病毒沉默IFITM3的表达改变乳腺癌细胞的增殖能力 | 第77-78页 |
4.4 慢病毒沉默IFITM3的表达改变乳腺癌细胞的迁移、侵袭能力 | 第78-79页 |
4.5 雌激素及雌激素受体拮抗剂对乳腺癌MCF-7 内IFITM3的影响 | 第79-81页 |
结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-97页 |
学期间所取得的科研成果 | 第97-99页 |
致谢 | 第99页 |