摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩写表 | 第15-17页 |
第1章 绪论 | 第17-35页 |
1.1 肿瘤的的辐射抗性 | 第17-26页 |
1.1.1 肿瘤放射治疗的历史和现状 | 第18-19页 |
1.1.2 肿瘤放射治疗的生物学效应 | 第19-20页 |
1.1.3 肿瘤放射抗性的影响因素 | 第20-22页 |
1.1.4 宫颈癌辐射抗性的相关分子生物学研究 | 第22-26页 |
1.2 野生型P53诱导的磷酸酶 1(WIP1) | 第26-31页 |
1.2.1 Wip1结构与功能 | 第26-27页 |
1.2.2 Wip1作用的下游靶点 | 第27-29页 |
1.2.3 Wip1在肿瘤发生、发展中的作用 | 第29-30页 |
1.2.4 Wip1异常表达与恶性肿瘤的关系 | 第30-31页 |
1.3 WIP1与肿瘤辐射抗性 | 第31-33页 |
1.4 立题依据 | 第33-35页 |
第2章 材料与方法 | 第35-53页 |
2.1 主要试剂及耗材 | 第35-37页 |
2.1.1 试剂 | 第35-36页 |
2.1.2 耗材 | 第36-37页 |
2.2 主要仪器 | 第37-38页 |
2.3 主要实验材料和方法 | 第38-53页 |
2.3.1 细胞培养 | 第38-40页 |
2.3.2 蛋白质免疫印记法(Western Blot) | 第40-46页 |
2.3.3 mRNA提取 | 第46页 |
2.3.4 Quantitative real-time (qRT-PCR) | 第46-47页 |
2.3.5 照射条件 | 第47页 |
2.3.6 Wip1基因及其siRNA设计及载体的构建 | 第47-48页 |
2.3.7 沉默Wip1表达的HeLa细胞模型的建立 | 第48-49页 |
2.3.8 细胞增殖检测 | 第49页 |
2.3.9 细胞凋亡检测 | 第49-50页 |
2.3.10 平板克隆形成实验 | 第50页 |
2.3.11 彗星实验 | 第50-51页 |
2.3.12 统计学方法 | 第51-53页 |
第3章 实验结果 | 第53-65页 |
3.1 WIP1与宫颈癌HELA细胞辐射敏感性的相关性研究 | 第53-54页 |
3.1.1 Wip1在不同宫颈癌细胞株中的表达 | 第53页 |
3.1.2 γ-射线辐射对不同宫颈癌细胞株增殖的影响 | 第53-54页 |
3.2 稳定的沉默WIP1表达宫颈癌细胞系的建立 | 第54-57页 |
3.2.1 根据siRNA设计原则,构建siRNA-Wip1和pcDNA3.1 –Wip1质粒 | 第54页 |
3.2.2 载体测序结果 | 第54-55页 |
3.2.3 实时定量PCR验证转染前后Wip1 mRNA水平变化 | 第55-56页 |
3.2.4 western blot验证转染前后Wip1蛋白表达水平变化 | 第56-57页 |
3.3 沉默WIP1基因对宫颈癌HELA细胞的辐射增敏作用 | 第57-59页 |
3.3.1 沉默Wip1表达对宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响 | 第57页 |
3.3.2 沉默Wip1表达联合 γ-射线辐射对宫颈癌HeLa细胞克隆形成的影响 | 第57-58页 |
3.3.3 沉默Wip1表达联合 γ-射线辐射对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响 | 第58-59页 |
3.4 沉默WIP1表达对宫颈癌HELA细胞的辐射增敏作用的分子机制研究 | 第59-65页 |
3.4.1 沉默Wip1表达对辐射造成的宫颈癌HeLa细胞DNA损伤修复的影响 | 第59-60页 |
3.4.2 Wip1降低宫颈癌细胞系HeLa细胞中p38MAPK信号通路相关蛋白的表达 | 第60-61页 |
3.4.3 SB203580逆转沉默Wip1表达提高的p38MAPK通路蛋白表达 | 第61-62页 |
3.4.4 SB203580逆转沉默Wip1表达增加了HeLa细胞辐射敏感性 | 第62-65页 |
第4章 讨论 | 第65-71页 |
4.1 WIP1在宫颈癌细胞株中高表达的意义 | 第66-67页 |
4.2 稳定沉默WIP1的HELA细胞系的建立 | 第67页 |
4.3 沉默WIP1表达对HELA细胞辐射敏感性的影响 | 第67-68页 |
4.4 沉默WIP1表达对HELA细胞DNA损伤修复的影响 | 第68-69页 |
4.5 WIP1通过激活P38MAPK信号通路增强HELA细胞辐射敏感性 | 第69-71页 |
第5章 结论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-99页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第99-101页 |
致谢 | 第101页 |