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干预Wip1基因对人宫颈癌细胞系HeLa辐射敏感性的影响研究

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
英文缩写表第15-17页
第1章 绪论第17-35页
    1.1 肿瘤的的辐射抗性第17-26页
        1.1.1 肿瘤放射治疗的历史和现状第18-19页
        1.1.2 肿瘤放射治疗的生物学效应第19-20页
        1.1.3 肿瘤放射抗性的影响因素第20-22页
        1.1.4 宫颈癌辐射抗性的相关分子生物学研究第22-26页
    1.2 野生型P53诱导的磷酸酶 1(WIP1)第26-31页
        1.2.1 Wip1结构与功能第26-27页
        1.2.2 Wip1作用的下游靶点第27-29页
        1.2.3 Wip1在肿瘤发生、发展中的作用第29-30页
        1.2.4 Wip1异常表达与恶性肿瘤的关系第30-31页
    1.3 WIP1与肿瘤辐射抗性第31-33页
    1.4 立题依据第33-35页
第2章 材料与方法第35-53页
    2.1 主要试剂及耗材第35-37页
        2.1.1 试剂第35-36页
        2.1.2 耗材第36-37页
    2.2 主要仪器第37-38页
    2.3 主要实验材料和方法第38-53页
        2.3.1 细胞培养第38-40页
        2.3.2 蛋白质免疫印记法(Western Blot)第40-46页
        2.3.3 mRNA提取第46页
        2.3.4 Quantitative real-time (qRT-PCR)第46-47页
        2.3.5 照射条件第47页
        2.3.6 Wip1基因及其siRNA设计及载体的构建第47-48页
        2.3.7 沉默Wip1表达的HeLa细胞模型的建立第48-49页
        2.3.8 细胞增殖检测第49页
        2.3.9 细胞凋亡检测第49-50页
        2.3.10 平板克隆形成实验第50页
        2.3.11 彗星实验第50-51页
        2.3.12 统计学方法第51-53页
第3章 实验结果第53-65页
    3.1 WIP1与宫颈癌HELA细胞辐射敏感性的相关性研究第53-54页
        3.1.1 Wip1在不同宫颈癌细胞株中的表达第53页
        3.1.2 γ-射线辐射对不同宫颈癌细胞株增殖的影响第53-54页
    3.2 稳定的沉默WIP1表达宫颈癌细胞系的建立第54-57页
        3.2.1 根据siRNA设计原则,构建siRNA-Wip1和pcDNA3.1 –Wip1质粒第54页
        3.2.2 载体测序结果第54-55页
        3.2.3 实时定量PCR验证转染前后Wip1 mRNA水平变化第55-56页
        3.2.4 western blot验证转染前后Wip1蛋白表达水平变化第56-57页
    3.3 沉默WIP1基因对宫颈癌HELA细胞的辐射增敏作用第57-59页
        3.3.1 沉默Wip1表达对宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响第57页
        3.3.2 沉默Wip1表达联合 γ-射线辐射对宫颈癌HeLa细胞克隆形成的影响第57-58页
        3.3.3 沉默Wip1表达联合 γ-射线辐射对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响第58-59页
    3.4 沉默WIP1表达对宫颈癌HELA细胞的辐射增敏作用的分子机制研究第59-65页
        3.4.1 沉默Wip1表达对辐射造成的宫颈癌HeLa细胞DNA损伤修复的影响第59-60页
        3.4.2 Wip1降低宫颈癌细胞系HeLa细胞中p38MAPK信号通路相关蛋白的表达第60-61页
        3.4.3 SB203580逆转沉默Wip1表达提高的p38MAPK通路蛋白表达第61-62页
        3.4.4 SB203580逆转沉默Wip1表达增加了HeLa细胞辐射敏感性第62-65页
第4章 讨论第65-71页
    4.1 WIP1在宫颈癌细胞株中高表达的意义第66-67页
    4.2 稳定沉默WIP1的HELA细胞系的建立第67页
    4.3 沉默WIP1表达对HELA细胞辐射敏感性的影响第67-68页
    4.4 沉默WIP1表达对HELA细胞DNA损伤修复的影响第68-69页
    4.5 WIP1通过激活P38MAPK信号通路增强HELA细胞辐射敏感性第69-71页
第5章 结论第71-73页
参考文献第73-99页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第99-101页
致谢第101页

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