中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
引言 | 第16-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-36页 |
1.1 激活素及其功能 | 第18-22页 |
1.1.1 激活素的来源 | 第18页 |
1.1.2 激活素的结构及分类 | 第18页 |
1.1.3 激活素A调节卵泡颗粒细胞的分化 | 第18页 |
1.1.4 激活素A在炎症中的作用 | 第18-19页 |
1.1.5 激活素A参与创伤修复 | 第19页 |
1.1.6 激活素A在肝脏中的作用 | 第19页 |
1.1.7 激活素A在神经系统中的作用 | 第19-20页 |
1.1.8 激活素A在呼吸系统中的作用 | 第20页 |
1.1.9 激活素A在肿瘤中的作用 | 第20-22页 |
1.2 激活素的传导及调节 | 第22-23页 |
1.2.1 激活素的受体及传导 | 第22页 |
1.2.2 激活素受体下游的信号分子Smads | 第22-23页 |
1.2.3 卵泡抑素及卵泡抑素相关蛋白 | 第23页 |
1.3 大肠癌的发病机制及研究进展 | 第23-31页 |
1.3.1 大肠癌的发生 | 第23-27页 |
1.3.2 大肠癌的分子分型 | 第27-28页 |
1.3.3 其他与大肠癌相关的基因 | 第28页 |
1.3.4 大肠癌的转移 | 第28-31页 |
1.4 激活素A在大肠组织中的表达及其可能的作用 | 第31-33页 |
1.5 大肠癌的筛查 | 第33-34页 |
1.5.1 粪便检查 | 第33页 |
1.5.2 内镜和放射线检查 | 第33-34页 |
1.6 主要研究思路及研究特色 | 第34-36页 |
1.6.1 研究思路 | 第34页 |
1.6.2 本研究的特色 | 第34-36页 |
第二章 材料与方法 | 第36-48页 |
2.1 组织材料 | 第36页 |
2.1.1 大肠癌、大肠良性息肉组织及血清标本 | 第36页 |
2.1.2 细胞 | 第36页 |
2.2 试剂的配制 | 第36-39页 |
2.2.1 磷酸盐缓冲液的配制 | 第36页 |
2.2.2 抗体稀释液的配制 | 第36-37页 |
2.2.3 洗液的制备 | 第37页 |
2.2.4 DAB贮液的配制 | 第37页 |
2.2.5 PVDF膜封闭液的配制 | 第37页 |
2.2.6 分离胶的配制 | 第37-38页 |
2.2.7 上样缓冲液(2×Loading buffer)的配制 | 第38页 |
2.2.8 洗液(TBST)的配制: | 第38页 |
2.2.9 封闭液的配制: | 第38-39页 |
2.2.10 抗体稀释液的配制 | 第39页 |
2.3 主要仪器及设备 | 第39-40页 |
2.4 实验方法 | 第40-46页 |
2.4.1 RT-PCR | 第40-41页 |
2.4.2 ELISA | 第41-42页 |
2.4.3 免疫组织化学染色 | 第42-43页 |
2.4.4 Western blotting | 第43-45页 |
2.4.5 SW480细胞表达激活素A检测 | 第45页 |
2.4.6 流式细胞术 | 第45页 |
2.4.7 吉姆萨染色 | 第45页 |
2.4.8 MTT法测定细胞活力 | 第45-46页 |
2.4.9 SW480细胞瞬时转染Smad3 shRNA表达质粒及Smad3过表达质粒 | 第46页 |
2.5 统计学分析 | 第46-48页 |
第三章 结果 | 第48-70页 |
3.1 大肠癌患者血清及组织中的激活素A水平变化 | 第48-54页 |
3.1.1 健康对照者及患者临床资料分析 | 第48-49页 |
3.1.2 健康对照者、大肠良性息肉患者及大肠癌患者血清激活素A水平 | 第49页 |
3.1.3 大肠癌及大肠息肉患者血清激活素A的ROC曲线 | 第49-50页 |
3.1.4 激活素A与癌胚抗原对大肠癌检测的敏感度及特异度对比 | 第50-51页 |
3.1.5 大肠癌患者术前与术后血清激活素A水平比较 | 第51页 |
3.1.6 不同分期的大肠癌患者血清激活素A水平比较 | 第51-52页 |
3.1.7 大肠癌组织及大肠良性息肉组织中激活素A mRNA水平 | 第52页 |
3.1.8 大肠癌及大肠良性息肉组织中激活素A蛋白的表达 | 第52-53页 |
3.1.9 激活素A在大肠癌组织中的表达 | 第53-54页 |
3.2 激活素A对大肠癌细胞系SW480的作用 | 第54-61页 |
3.2.1 SW480细胞系中激活素A的表达水平 | 第54-56页 |
3.2.2 激活素A对大肠癌细胞系SW480细胞活力的影响 | 第56-57页 |
3.2.3 SW480细胞吉姆萨染色 | 第57页 |
3.2.4 激活素A诱导大肠癌细胞系SW480细胞凋亡 | 第57-59页 |
3.2.5 激活素II型受体及信号分子Smad3在SW480细胞的表达 | 第59-61页 |
3.3 Smad3敲低对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 | 第61-66页 |
3.3.1 Smad3基因敲低效果检测 | 第61-63页 |
3.3.2 Smad3基因敲低对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 | 第63-66页 |
3.4 Smad3过表达对激活素A诱导的SW480细胞凋亡的作用 | 第66-70页 |
3.4.1 Smad3基因过表达效果检测 | 第66-68页 |
3.4.2 Smad3过表达对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 | 第68-70页 |
第四章 讨论 | 第70-76页 |
4.1 本研究的必要性 | 第70页 |
4.2 激活素A在大肠癌患者体内的表达 | 第70-73页 |
4.3 激活素A在大肠癌中的作用 | 第73-74页 |
4.4 激活素A对大肠癌作用的信号转导 | 第74-76页 |
结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-101页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |