| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 红斑丹毒丝菌与猪丹毒概述 | 第13-15页 |
| 1.1 红斑丹毒丝菌 | 第13-14页 |
| 1.2 猪丹毒 | 第14-15页 |
| 2 猪丹毒杆菌的防控 | 第15-17页 |
| 2.1 药物治疗 | 第15页 |
| 2.2 疫苗预防 | 第15-16页 |
| 2.3 环境控制 | 第16-17页 |
| 3 噬菌体 | 第17-23页 |
| 3.1 噬菌体概述 | 第17页 |
| 3.2 噬菌体的发现历史 | 第17页 |
| 3.3 噬菌体分类 | 第17-18页 |
| 3.4 噬菌体宿主谱的确定 | 第18-19页 |
| 3.5 噬菌体与细菌共同进化史 | 第19-20页 |
| 3.5.1 噬菌体感染对宿主菌造成的不利影响 | 第19-20页 |
| 3.5.2 宿主菌从噬菌体感染中获得的利益 | 第20页 |
| 3.6 噬菌体治疗:抗生素耐药性的潜在解决方案 | 第20-22页 |
| 3.6.1 抗生素应用的现状 | 第20页 |
| 3.6.2 噬菌体治疗较抗生素治疗的优势 | 第20-21页 |
| 3.6.3 噬菌体治疗的临床应用 | 第21-22页 |
| 3.7 噬菌体未来发展的前景 | 第22-23页 |
| 4 噬菌体裂解酶 | 第23-25页 |
| 4.1 裂解酶概述 | 第23页 |
| 4.2 裂解酶的应用 | 第23页 |
| 4.3 裂解酶可能存在的问题及研究现状 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-33页 |
| 第二章 猪丹毒杆菌噬菌体分离、鉴定 | 第33-55页 |
| 1 材料和方法 | 第34-38页 |
| 1.1 材料 | 第34页 |
| 1.2 细菌分离与鉴定 | 第34页 |
| 1.3 噬菌体分离与纯化 | 第34-35页 |
| 1.3.1 噬菌体分离 | 第34页 |
| 1.3.2 噬菌体纯化 | 第34-35页 |
| 1.4 噬菌体扩增及效价测定 | 第35页 |
| 1.4.1 噬菌体效价测定 | 第35页 |
| 1.4.2 噬菌体扩增 | 第35页 |
| 1.5 噬菌体宿主谱 | 第35页 |
| 1.6 电镜观察噬菌体形态 | 第35页 |
| 1.7 噬菌体基因组提取、纯化及酶切分析 | 第35-36页 |
| 1.7.1 噬菌体基因组提取 | 第35-36页 |
| 1.7.2 噬菌体基因组纯化 | 第36页 |
| 1.7.3 噬菌体基因组酶切分析 | 第36页 |
| 1.8 高通量测序及分析 | 第36-37页 |
| 1.8.1 基因组测序 | 第36-37页 |
| 1.8.2 基因组分析 | 第37页 |
| 1.8.3 基因功能注释 | 第37页 |
| 1.9 液相色谱与质谱联用分析噬菌体主要蛋白 | 第37-38页 |
| 1.9.1 噬菌体颗粒纯化-蔗糖密度梯度离心 | 第37页 |
| 1.9.2 SDS-PAGE及质谱分析噬菌体蛋白 | 第37-38页 |
| 1.9.3 猪丹毒杆菌噬菌体同源性分析 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-50页 |
| 2.1 细菌培养特性和形态特征 | 第38-39页 |
| 2.2 猪丹毒杆菌噬菌体分离与纯化结果 | 第39页 |
| 2.3 猪丹毒杆菌噬菌体扩增-最佳扩增MOI结果 | 第39-40页 |
| 2.4 猪丹毒杆菌噬菌体宿主谱结果 | 第40-41页 |
| 2.5 电镜观察结果 | 第41页 |
| 2.6 猪丹毒杆菌噬菌体基因组纯化及酶切分析结果 | 第41-43页 |
| 2.6.1 基因组纯化结果 | 第41-42页 |
| 2.6.2 基因组酶切结果 | 第42-43页 |
| 2.7 高通量测序及基因注释结果 | 第43-48页 |
| 2.8 噬菌体颗粒纯化及质谱分析结果 | 第48-50页 |
| 2.9 噬菌体同源性分析结果 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第三章 噬菌体动物实验 | 第55-63页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| 1.1 六周龄ICR小鼠半数致死量(LD_(50))测定 | 第56页 |
| 1.2 噬菌体注射部位选择 | 第56页 |
| 1.3 噬菌体注射时间选择 | 第56页 |
| 1.4 噬菌体注射剂量选择 | 第56-57页 |
| 1.5 菌血症动态变化-菌落计数 | 第57页 |
| 1.6 噬菌体在小鼠体内分布检测 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-59页 |
| 2.1 六周龄ICR小鼠半数致死量结果 | 第57-58页 |
| 2.2 噬菌体治疗条件的优化 | 第58-59页 |
| 2.3 菌血症动态变化-菌落计数结果 | 第59页 |
| 2.4 猪丹毒杆菌噬菌体在小鼠体内的分布结果 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 第四章 猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶作用条件优化 | 第63-75页 |
| 1 材料和方法 | 第64-66页 |
| 1.1 材料 | 第64页 |
| 1.2 猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶同源性分析 | 第64页 |
| 1.3 重组质粒的构建与鉴定 | 第64-65页 |
| 1.4 重组蛋白的表达 | 第65页 |
| 1.5 重组蛋白表达的鉴定 | 第65页 |
| 1.6 裂解酶Ely裂解活性评价 | 第65页 |
| 1.7 裂解酶蛋白裂菌条件优化-作用温度 | 第65页 |
| 1.8 裂解酶蛋白裂菌条件优化-pH | 第65-66页 |
| 1.9 裂解酶蛋白裂菌条件优化-最适离子筛选 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-71页 |
| 2.1 基于裂解酶蛋白Ely同源性分析 | 第66-67页 |
| 2.2 裂解酶基因的克隆和重组质粒pET-28a(+)-Ely的构建与鉴定 | 第67页 |
| 2.3 重组蛋白的原核表达及Western blot鉴定 | 第67-68页 |
| 2.4 裂解酶蛋白裂解细菌活性验证及其与剂量的关系 | 第68-69页 |
| 2.5 裂解酶最佳作用温度筛选结果 | 第69-70页 |
| 2.6 裂解酶最佳作用pH筛选结果 | 第70-71页 |
| 2.7 裂解酶蛋白裂菌条件优化-最适离子筛选 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
