中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第10-14页 |
材料和方法 | 第14-28页 |
1.实验材料 | 第14-16页 |
1.1.试验蚊 | 第14页 |
1.2.细胞系 | 第14页 |
1.3.主要试剂 | 第14-15页 |
1.4.主要仪器设备 | 第15-16页 |
2.实验方法 | 第16-28页 |
2.1.淡色库蚊总RNA的提取与鉴定 | 第16页 |
2.2.靶基因的荧光定量PCR分析 | 第16-17页 |
2.3.microRNA实时荧光定量PCR分析 | 第17-19页 |
2.4.miR-92a与靶基因相互作用的验证 | 第19-26页 |
2.5.显微注射验证miR-92a与靶基因的相互作用 | 第26-27页 |
2.6.CDC接触瓶法验证miR-92a与蚊虫抗药性的关系 | 第27-28页 |
结果 | 第28-41页 |
1.预测调控表皮蛋白基因CPCPR4的microRNA | 第28-30页 |
1.1.淡色库蚊RNA的提取电泳 | 第28页 |
1.2.淡色库蚊RNA浓度测定 | 第28-29页 |
1.3.荧光定量PCR验证表皮蛋白基因CPCPR4的表达水平 | 第29页 |
1.4.预测调控表皮蛋白基因CpCPR4的miR-92a | 第29-30页 |
1.5.荧光定量PCR验证miR-92a表达水平 | 第30页 |
2.双荧光报告检测系统验证miR-92a对CPCPR4的直接调控作用 | 第30-37页 |
2.1.CPCPR4的 3’UTR部分序列扩增及测序鉴定 | 第30-32页 |
2.2.双荧光报告载体构建 | 第32-36页 |
2.3.双荧光报告系统检测mi R-92a对表皮蛋白基因CPCPR4的调控 | 第36-37页 |
3.体内水平验证miR-92a与表皮蛋白基因CPCPR4与抗药性的相互作用 | 第37-41页 |
3.1.敏感品系蚊体内显微注射miR-92a mimic | 第37-38页 |
3.2.抗性品系蚊体内显微注射miR-92a inhibitor | 第38-39页 |
3.3.CDC接触瓶生物测定miR-92a及CPCPR4与淡色库蚊抗药性的关系 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
蚊拟除虫菊酯抗性机制研究及环境因子对其的影响 | 第52-68页 |
参考文献 | 第59-68页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |