| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 简单节杆菌的概述和研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 简单节杆菌的概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 甾体C1,2脱氢反应的工艺概述 | 第11页 |
| 1.2 微生物有机溶剂抗逆机制概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 细胞生理特性水平上的抗逆行为 | 第11-12页 |
| 1.2.2 细胞形态水平上的抗逆行为 | 第12页 |
| 1.2.3 细胞膜脂水平上的抗逆行为 | 第12页 |
| 1.2.4 溶剂泵出机制 | 第12-13页 |
| 1.2.5 溶剂的转化和降解 | 第13页 |
| 1.3 抗逆行为相关基因和蛋白的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.3.1 热激蛋白的概述和研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.2 DNA损伤修复相关蛋白的概述和研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3.3 氧化应激蛋白的概述和研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 本论文的目的、意义和主要研究内容 | 第17-19页 |
| 1.4.1 本论文的目的和意义 | 第17页 |
| 1.4.2 本论文的主要研究内容 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 相关溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 简单节杆菌菌体的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.2 目的基因的克隆 | 第24-28页 |
| 2.2.3 目标蛋白的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.4 目标基因的同源性比对、系统发育树构建和生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.2.5 脉冲场凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.2.6 细胞内活性氧簇(ROS)含量的测定 | 第30页 |
| 2.2.7 过氧化氢酶活力的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.8 超氧化物歧化酶活力测定 | 第31-32页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第32-35页 |
| 2.2.10 简单节杆菌中抗逆相关基因表达对大肠杆菌性能的影响 | 第35-38页 |
| 3 结果与讨论 | 第38-81页 |
| 3.1 简单节杆菌中抗逆相关基因的克隆、表达和生物信息学分析 | 第38-69页 |
| 3.1.1 简单节杆菌总DNA的提取 | 第38页 |
| 3.1.2 groEL基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第38-43页 |
| 3.1.3 dnaK基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第43-49页 |
| 3.1.4 recA基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第49-54页 |
| 3.1.5 uvrD基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第54-59页 |
| 3.1.6 katG基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第59-64页 |
| 3.1.7 SOD基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第64-69页 |
| 3.2 对数初期添加乙醇对简单节杆菌存活、DNA损伤、活性氧簇水平、抗逆相关基因转录水平的影响 | 第69-73页 |
| 3.2.1 对数初期添加乙醇对简单节杆菌存活的影响 | 第69-70页 |
| 3.2.2 对数初期添加乙醇对简单节杆菌DNA损伤的影响 | 第70-71页 |
| 3.2.3 对数初期添加乙醇对简单节杆菌活性氧簇水平的影响 | 第71-73页 |
| 3.3 对数中后期添加乙醇对简单节杆菌存活、DNA损伤、活性氧簇水平、抗逆相关基因转录水平的影响 | 第73-76页 |
| 3.3.1 对数中后期添加乙醇对简单节杆菌存活影响 | 第73页 |
| 3.3.2 对数中后期添加乙醇对简单节杆菌DNA损伤的影响 | 第73-74页 |
| 3.3.3 对数中后期添加乙醇加入对简单节杆菌活性氧簇水平的影响 | 第74-76页 |
| 3.3.4 对数中后期添加乙醇对菌体抗逆性相关基因转录水平分析 | 第76页 |
| 3.4 简单节杆菌中抗逆相关基因表达对大肠杆菌性能的影响 | 第76-81页 |
| 3.4.1 热激蛋白GroEL表达对大肠杆菌生长特性的影响 | 第77页 |
| 3.4.2 热激蛋白GroEL表达对大肠杆菌压力冲击条件下存活情况的影响 | 第77-78页 |
| 3.4.3 热激蛋白GroEL表达对大肠杆菌适当压力条件下生长情况的影响 | 第78-81页 |
| 4 结论 | 第81-82页 |
| 5 展望 | 第82-83页 |
| 6 参考文献 | 第83-90页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第90-91页 |
| 8 致谢 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
