| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 抗菌脂肽的研究背景 | 第10-12页 |
| 1.1.1 抗菌脂肽简介 | 第10页 |
| 1.1.2 抗菌脂肽产生菌 | 第10-11页 |
| 1.1.3 海洋枯草芽孢杆菌产活性物质的优势 | 第11页 |
| 1.1.4 B.subtilis产抗菌脂肽分类 | 第11-12页 |
| 1.2 B.subtilis产抗菌脂肽的结构和性质 | 第12-16页 |
| 1.2.1 Iturin家族 | 第12-13页 |
| 1.2.2 Surfactin家族 | 第13-14页 |
| 1.2.3 Fengycin家族 | 第14-15页 |
| 1.2.4 B.subtilis产抗菌脂肽的分子量 | 第15-16页 |
| 1.3 抗菌脂肽的分离纯化 | 第16-19页 |
| 1.3.1 超滤 | 第16-17页 |
| 1.3.2 吸附法 | 第17页 |
| 1.3.3 色谱法 | 第17-19页 |
| 1.3.4 泡沫分离法 | 第19页 |
| 1.3.5 液膜分离法 | 第19页 |
| 1.4 抗菌脂肽的分析技术 | 第19-22页 |
| 1.4.1 脂肽定性分析 | 第19-21页 |
| 1.4.2 脂肽结构分析 | 第21-22页 |
| 1.5 B.subtilis抗菌脂肽的应用 | 第22页 |
| 1.6 研究内容及技术路线 | 第22-25页 |
| 1.6.1 菌株HS-A38发酵液所产抗菌脂肽的成分研究 | 第23页 |
| 1.6.2 菌株HS-A38粗提物具有广谱活性单组分制备及成分分析 | 第23-24页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 菌株HS-A38抗菌脂肽的基因检测 | 第25-38页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.2.1 菌株 | 第25页 |
| 2.2.2 培养基 | 第25页 |
| 2.2.3 主要药品 | 第25-26页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2.5 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.6 辅助器材 | 第27页 |
| 2.3 方法与步骤 | 第27-33页 |
| 2.3.1 活化菌株HS-A38 | 第27页 |
| 2.3.2 细菌基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3 细菌基因组DNA鉴定回收 | 第28页 |
| 2.3.4 引物设计 | 第28-29页 |
| 2.3.5 抗菌脂肽目的基因的扩增 | 第29-30页 |
| 2.3.6 抗菌脂肽目的基因扩增的优化 | 第30-32页 |
| 2.3.7 确定菌株HS-A38基因合成的抗菌脂肽 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.4.1 菌株HS-A38基因组DNA提取 | 第33页 |
| 2.4.2 抗菌脂肽目的基因的扩增 | 第33-34页 |
| 2.4.3 抗菌脂肽目的基因扩增的优化 | 第34-36页 |
| 2.4.4 初步确定菌株HS-A38基因合成的抗菌脂肽 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 菌株HS-A38脂肽粗提物制备及初步分离纯化的成分研究 | 第38-65页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第38-40页 |
| 3.2.1 菌株 | 第38页 |
| 3.2.2 培养基 | 第38-39页 |
| 3.2.3 主要药品试剂 | 第39页 |
| 3.2.4 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.2.5 辅助器材 | 第40页 |
| 3.3 方法与步骤 | 第40-47页 |
| 3.3.1 菌株HS-A38培养 | 第40-41页 |
| 3.3.2 发酵生产优化 | 第41页 |
| 3.3.3 抗菌肽类粗提物的制备及产率计算 | 第41-42页 |
| 3.3.4 粗提物LP的抑菌谱测定 | 第42页 |
| 3.3.5 TLC对粗提物LP组分的初步鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3.6 RP-HPLC对粗提物LP组分的初步分离纯化分析 | 第43-46页 |
| 3.3.7 UPLC-LTQ Orbitrap Elite串联质谱对纯化组分分析 | 第46-47页 |
| 3.4 结果与分析 | 第47-63页 |
| 3.4.1 发酵生产优化粗提物的制备及产率计算 | 第47页 |
| 3.4.2 粗提物LP的抑菌谱测定 | 第47-48页 |
| 3.4.3 粗提物LP的薄层色谱分析 | 第48-49页 |
| 3.4.4 粗提物LP的反相高效液相色谱分析 | 第49-50页 |
| 3.4.5 粗提物LP的反相高效液相色谱优化 | 第50-54页 |
| 3.4.6 粗提物LP纯化的各峰质谱检测 | 第54-63页 |
| 3.5 本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 菌株HS-A38产抗菌脂肽Bacillomycin D的制备及成分分析 | 第65-76页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第65-66页 |
| 4.3 方法与步骤 | 第66-68页 |
| 4.3.1 制备型硅胶板分离粗提物LP与抑菌测定 | 第66-67页 |
| 4.3.2 硅胶柱层析分离广谱抑菌活性组分LP3 | 第67页 |
| 4.3.3 组分LP3的液相色谱分析与分离 | 第67页 |
| 4.3.4 组分LP3纯化峰的MALDI-TOF质谱检测 | 第67-68页 |
| 4.4 结果与分析 | 第68-75页 |
| 4.4.1 制备型硅胶板分离粗提物LP与抑菌测定 | 第68-70页 |
| 4.4.2 硅胶柱层析分离广谱抑菌活性组分LP3 | 第70页 |
| 4.4.3 组分LP3的液相色谱分析与分离 | 第70-72页 |
| 4.4.4 组分LP3纯化峰的MALDI-TOF质谱检测 | 第72-75页 |
| 4.5 本章小结 | 第75-76页 |
| 第五章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
