| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 选题的背景及目的意义 | 第10页 |
| 1.2 植物miRNA的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.3 植物miR398在环境胁迫中调控作用的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 半定量反转录－聚合酶链反应 | 第13页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR | 第13-17页 |
| 1.6 miRNA表达抑制方法 | 第17-19页 |
| 1.7 发根农杆菌介导的遗传转化的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.8 本研究的主要内容，技术路线和创新点 | 第20-23页 |
| 1.8.1 主要研究内容 | 第20-21页 |
| 1.8.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 1.8.3 研究创新点 | 第22-23页 |
| 第2章 人参miR398在高盐和高铜胁迫中的相对表达水平变化 | 第23-37页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第23-26页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第23-25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.3.1 人参发根总RNA提取 | 第26页 |
| 2.3.2 逆转录合成cDNA | 第26-28页 |
| 2.3.3 人参miR398基因克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.4 人参miR398克隆载体的构建转化和测序 | 第29页 |
| 2.3.5 人参发根的高盐胁迫培养 | 第29页 |
| 2.3.6 人参发根的高铜胁迫培养 | 第29-30页 |
| 2.3.7 人参miR398和靶基因CSD相对表达水平检测 | 第30-32页 |
| 2.4 结果与分析 | 第32-36页 |
| 2.4.1 人参发根总RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.4.2 人参miR398 RT-PCR引物设计 | 第33-34页 |
| 2.4.3 人参miR398测序结果 | 第34页 |
| 2.4.4 miR398和靶基因CSD在高盐高铜胁迫下相对表达水平检测结果 | 第34-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36页 |
| 2.6 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 人参pBI121-398S表达载体和工程菌构建 | 第37-46页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-42页 |
| 3.3.1 表达载体pBI121-398S设计构建 | 第38-40页 |
| 3.3.2 表达载体pBI121-398S的鉴定 | 第40页 |
| 3.3.3 菌种活化和感受态制备 | 第40-41页 |
| 3.3.4 A4工程菌构建 | 第41页 |
| 3.3.5 A4工程菌的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.4.1 398S元件设计构建结果 | 第42-43页 |
| 3.4.2 pBI121-398S重组表达载体鉴定 | 第43页 |
| 3.4.3 工程菌A4-pBI121-398S鉴定 | 第43-45页 |
| 3.5 讨论 | 第45页 |
| 3.6 本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 人参发根体系hairy-pBI121-398S的诱导转化 | 第46-56页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第46-48页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第46-47页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第47-48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.3.1 人参发根的遗传转化 | 第48-49页 |
| 4.3.2 人参发根体系鉴定 | 第49页 |
| 4.3.3 miR389及其靶基因CSD相对表达水平检测 | 第49页 |
| 4.3.4 人参发根生长速度检测 | 第49-50页 |
| 4.3.5 人参发根总皂苷含量检测 | 第50页 |
| 4.4 结果与分析 | 第50-54页 |
| 4.4.1 人参发根体系鉴定 | 第50-51页 |
| 4.4.2 miR389及其靶基因CSD相对表达水平变化 | 第51-52页 |
| 4.4.3 人参发根生长曲线的绘制 | 第52-53页 |
| 4.4.4 人参发根总皂苷含量测定 | 第53-54页 |
| 4.5 讨论 | 第54-55页 |
| 4.6 本章小结 | 第55-56页 |
| 第5章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56-57页 |
| 5.2 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 科研成果及参与项目 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
