| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩写一览表 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 肠出血大肠杆菌O157：H7概况 | 第13-14页 |
| 1.2 肠出血大肠杆菌O157：H7毒力因子 | 第14-22页 |
| 1.2.1 志贺毒素 | 第14-15页 |
| 1.2.2 大质粒pO157 | 第15-16页 |
| 1.2.3 LEE毒力岛 | 第16页 |
| 1.2.4 鞭毛蛋白 | 第16-20页 |
| 1.2.5 溶菌酶抑制剂 | 第20-22页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 大肠杆菌O157：H7鞭毛蛋白及溶菌酶抑制剂蛋白抗原表位的预测分析及合成 | 第24-31页 |
| 1 材料与方法 | 第24页 |
| 1.1 材料 | 第24页 |
| 1.2 方法 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.1 鞭毛蛋白二级结构分析 | 第25页 |
| 2.2 鞭毛蛋白的氨基酸亲水性分析 | 第25-26页 |
| 2.3 鞭毛蛋白的氨基酸柔性区域分析 | 第26页 |
| 2.4 鞭毛蛋白的氨基酸抗原性分析 | 第26页 |
| 2.5 鞭毛蛋白的氨基酸表面可能性分析 | 第26页 |
| 2.6 鞭毛蛋白细胞抗原表位综合分析 | 第26-27页 |
| 2.7 溶菌酶抑制剂二级结构分析 | 第27页 |
| 2.8 溶菌酶抑制剂的氨基酸亲水性分析 | 第27-28页 |
| 2.9 溶菌酶抑制剂的氨基酸柔性区域分析 | 第28页 |
| 2.10 溶菌酶抑制剂的的氨基酸抗原性分析 | 第28页 |
| 2.11 溶菌酶抑制剂的的氨基酸表面可能性分析 | 第28页 |
| 2.12 溶菌酶抑制剂的细胞抗原表位综合分析 | 第28页 |
| 3 结论 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 多肽免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第31-44页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1 主要动物、细胞、菌株 | 第31页 |
| 1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2 主要试剂溶液配制 | 第32-34页 |
| 2.1 ELISA主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2 Western bolt主要试剂 | 第33页 |
| 2.3 细胞培养主要试剂 | 第33-34页 |
| 3 方法 | 第34-37页 |
| 3.1 多肽乳化免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第34页 |
| 3.2 ELISA检测多克隆抗体效价 | 第34-35页 |
| 3.3 Western Bolt检测多克隆抗体特异性 | 第35-36页 |
| 3.4 间接免疫荧光检测抗体反应性 | 第36-37页 |
| 4 结果 | 第37-42页 |
| 4.1 ELISA检测抗体水平 | 第37-38页 |
| 4.2 Western Bolt检测多克隆抗体特异性 | 第38-39页 |
| 4.3 间接免疫荧光反应检测多克隆抗体特异性 | 第39-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 多克隆抗体阻断大肠杆菌O157：H7粘附试验 | 第44-51页 |
| 1 材料 | 第44页 |
| 1.1 细胞、菌株 | 第44页 |
| 1.2 试剂、仪器 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-45页 |
| 2.1 抗体阻断粘附试验 | 第44-45页 |
| 2.2 抗体阻断后免疫荧光试验 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| 3.1 多克隆抗体阻断大肠杆菌O157：H7粘附Hela细胞试验 | 第45-47页 |
| 3.2 抗体阻断后的间接免疫荧光试验 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 大肠杆菌O157：H7感染小鼠模型建立及免疫保护试验 | 第51-61页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-52页 |
| 2.1 建立大肠杆菌O157：H7感染小鼠模型 | 第51-52页 |
| 2.2 免疫攻毒保护试验 | 第52页 |
| 2.3 病理组织切片 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-58页 |
| 3.1 感染模型排菌量及死亡情况 | 第52-53页 |
| 3.2 攻毒保护试验排菌量和保护率 | 第53-54页 |
| 3.3 ELISA检测抗体水平变化 | 第54-55页 |
| 3.4 攻毒后小鼠内脏组织病理学观察 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 第六章 多肽免疫小鼠诱导细胞免疫 | 第61-71页 |
| 1 材料和试剂 | 第61-62页 |
| 1.1 主要材料 | 第61页 |
| 1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-65页 |
| 2.1 脾淋巴细胞增殖试验 | 第62页 |
| 2.2 ELISA测脾淋巴细胞细胞因子变化 | 第62-63页 |
| 2.3 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测细胞因子mRNA变化 | 第63-65页 |
| 3 结果 | 第65-69页 |
| 3.1 脾淋巴细胞增殖试验 | 第65-66页 |
| 3.2 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测细胞因子mRNA变化 | 第66-67页 |
| 3.3 ELISA测脾淋巴细胞上清细胞因子变化 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 第七章 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82-83页 |
| 附件1 细胞因子mRNA表达情况 | 第83-85页 |
| 附录2 感染模型病理组织学观察 | 第85-86页 |
