中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第14-42页 |
1 水稻抗褐飞虱基因与褐飞虱生物型概况 | 第14-16页 |
1.1 水稻抗褐飞虱基因研究进展 | 第14-15页 |
1.2 褐飞虱生物型 | 第15-16页 |
2 植物对昆虫的先天免疫 | 第16-18页 |
3 褐飞虱与水稻的相互作用的分子机制 | 第18-20页 |
4 植物次生代谢物质 | 第20-23页 |
4.1 芥子油苷 | 第20-21页 |
4.2 生物碱 | 第21页 |
4.3 酚类物质 | 第21-22页 |
4.4 水杨酸与水杨酸甲酯 | 第22页 |
4.5 萜烯类化合物,倍半萜与甾醇化合物 | 第22-23页 |
4.6 植物抗毒素 | 第23页 |
5 P450在昆虫与植物互作中的作用 | 第23-30页 |
5.1 细胞色素P450简介 | 第23-25页 |
5.2 植物P450参与次生代谢物合成 | 第25-26页 |
5.3 昆虫细胞色素P450对植物次生代谢物的代谢作用 | 第26-29页 |
5.4 外源化合物对昆虫P450的诱导作用 | 第29页 |
5.5 昆虫P450与植物协同进化 | 第29-30页 |
6 蛋白异源表达系统 | 第30-32页 |
6.1 肠杆菌表达系统 | 第31页 |
6.2 酵母表达系统 | 第31页 |
6.3 病毒介导昆虫细胞表达系统 | 第31-32页 |
7 分子标记简介 | 第32-34页 |
7.1 Southern杂交技术为核心的分子标记 | 第32页 |
7.2 以PCR技术为核心的分子标记 | 第32-34页 |
7.2.1 RAPD标记 | 第32-33页 |
7.2.2 SSR标记 | 第33页 |
7.2.3 AFLP标记 | 第33-34页 |
7.3 以DNA序列技术为核心的分子标记 | 第34页 |
8 分子标记在昆虫分子遗传学中的应用 | 第34-36页 |
8.1 分子标记在昆虫抗性中的研究 | 第34页 |
8.2 基因、基因组与QTL作图 | 第34-35页 |
8.3 分子标记在昆虫与植物互作中的研究 | 第35-36页 |
9 遗传连锁图与QTL定位 | 第36-38页 |
9.1 遗传连锁定义 | 第36页 |
9.2 基因定位 | 第36-37页 |
9.3 QTL定位的基本原理与方法 | 第37-38页 |
10 代谢组学研究 | 第38-41页 |
10.1 代谢组成分常用分析手段 | 第39-41页 |
11 本研究目的与意义 | 第41-42页 |
第二章 褐飞虱生物型Y致害性基因的QTL定位研究 | 第42-66页 |
1 引言 | 第42页 |
2 材料与方法 | 第42-48页 |
2.1 材料 | 第42-43页 |
2.2 作图群体构建 | 第43页 |
2.3 表型记录 | 第43页 |
2.4 褐飞虱基因组DNA提取 | 第43-44页 |
2.5 SSR标记PCR扩增 | 第44页 |
2.6 PCR产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测 | 第44-46页 |
2.7 连锁图谱构建与QTL定位分析 | 第46-48页 |
3 结果与分析 | 第48-63页 |
3.1 多态性标记筛选 | 第48页 |
3.2 PCR扩增基因型分析 | 第48-49页 |
3.3 遗传图谱构建 | 第49-57页 |
3.4 褐飞虱在YHY15上存活率与生长率QTL定位 | 第57-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
第三章 褐飞虱与水稻互作的代谢组学研究 | 第66-97页 |
1 引言 | 第66页 |
2 材料与方法 | 第66-69页 |
2.1 材料 | 第66页 |
2.2 褐飞虱取食处理 | 第66-67页 |
2.3 水稻叶鞘代谢物提取 | 第67页 |
2.4 褐飞虱蜜露收集 | 第67页 |
2.5 代谢物的衍生化处理 | 第67-68页 |
2.6 GC-MS分析条件 | 第68页 |
2.7 统计分析方法 | 第68-69页 |
3 结果与分析 | 第69-90页 |
3.1 基于GC-MS水稻叶鞘应答褐飞虱取食的代谢组学研究 | 第69-82页 |
3.2 基于GC-MS的生物型1与生物型Y褐飞虱蜜露代谢组学研究 | 第82-90页 |
4 讨论 | 第90-97页 |
4.1 褐飞虱取食促进了TN1糖异生和GABA旁路,同时激活了SA介导的防御反应 | 第91页 |
4.2 褐飞虱取食促进了TN1的p氧化和乙醛酸循环途径 | 第91页 |
4.3 褐飞虱促进了YHY15糖酵解与莽草酸途径 | 第91-92页 |
4.4 TN1与YHY15的对褐飞虱响应机制的区别 | 第92-94页 |
4.5 褐飞虱生物型1与生物型Y取食YHY15后蜜露中代谢物的变化. | 第94-97页 |
第四章 褐飞虱P450研究 | 第97-145页 |
1 引言 | 第97页 |
2 材料与方法 | 第97-107页 |
2.1 褐飞虱单头虫RNA提取 | 第97-98页 |
2.2 cDNA第一链的合成 | 第98页 |
2.3 目的产物PCR扩增与检测 | 第98-99页 |
2.4 DNA琼脂糖胶回收 | 第99-100页 |
2.5 dsRNA合成 | 第100-101页 |
2.6 dsRNA的酚氯仿抽提 | 第101页 |
2.7 dsRNA显微注射 | 第101-102页 |
2.8 定量PCR | 第102-105页 |
2.9 含水稻叶鞘乙醇提取物的人工饲料配制 | 第105页 |
2.10 人工饲料装置 | 第105页 |
2.11 基于乙醇提取物直接进样的GC-MS分析 | 第105页 |
2.12 褐飞虱增重与蜜露排量测定 | 第105-106页 |
2.13 刺探电位图(Essential of electrical penetration graph,EPG)记录褐飞虱取食行为 | 第106-107页 |
3 结果与分析 | 第107-142页 |
3.1 生物型1与生物型Y褐飞虱饲养在加入乙醇提取物的人工饲料上存活率比较 | 第107-108页 |
3.2 基于GC-MS的YHY15叶鞘乙醇提取物成分分析 | 第108-112页 |
3.3 RNAi沉默褐飞虱细胞色素P450氧化还原酶基因(Cytochrome P450 Reductase,CPR)对褐飞虱取食影响 | 第112-120页 |
3.4 取食YHY15后对褐飞虱P450家族基因的诱导 | 第120-127页 |
3.5 RNAi沉默CYP6AX1、CYP6AY1与CYP4C61基因后对褐飞虱取食的影响 | 第127-135页 |
3.6 CYP4C61在褐飞虱中肠、脂肪体、唾液腺组织表达模式 | 第135-136页 |
3.7 CYP4C61序列分析 | 第136-142页 |
4 讨论 | 第142-145页 |
第五章 CYP4C61与N1CPR蛋白异源表达 | 第145-155页 |
1 引言 | 第145页 |
2 材料与方法 | 第145-150页 |
2.1 目的产物PCR扩增与载体构建 | 第145-146页 |
2.2 重组质粒转化感受态细胞 | 第146-147页 |
2.3 质粒提取 | 第147页 |
2.4 IPTG诱导表达 | 第147页 |
2.5 PAGE胶制作与考染 | 第147-148页 |
2.8 Western Blot | 第148-150页 |
3 结果与分析 | 第150-154页 |
4 讨论 | 第154-155页 |
第六章 总讨论 | 第155-158页 |
参考文献 | 第158-175页 |
博士在读期间已经发表和准备发表的论文 | 第175-176页 |
致谢 | 第176页 |