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enJSRV及其受体HYAL2在蒙古绵羊子宫和胚胎中的表达与定位

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
1 引言第14-35页
   ·内源性反转录病毒的研究进展第14页
   ·enJSRV 基因结构特点(与外源性绵羊肺腺瘤逆转录病毒相比较)第14-16页
   ·绵羊肺腺瘤病(OPA)概述第16-20页
     ·绵羊肺腺瘤病的病原学和流行病学第17-18页
     ·OPA 的临床症状和病理变化第18页
     ·OPA 的诊断和防治第18-19页
     ·OPA 的发病机理第19-20页
   ·enJSRV 在 OPA 发生过程中的作用第20-21页
   ·enJSRV 在染色体中的分布第21-22页
   ·enJSRV 对胎盘形成的影响第22-23页
   ·母羊年龄和机体状况对enJSRV 表达的影响第23页
   ·孕酮及 IFN-τ对enJSRV 表达的调节作用第23页
   ·enJSRV 在宿主细胞中的进化第23-24页
   ·妊娠过程中子宫内膜、绒毛膜、胎盘和胚胎的变化第24-33页
     ·子宫内膜的形成及妊娠期的变化第24-26页
     ·绒毛膜的形成及妊娠期的变化第26-28页
     ·胎盘的形成及妊娠期的变化第28-30页
     ·胚胎的形成及妊娠期的变化第30-33页
   ·研究的目的及意义第33-35页
2 试验一 enJSRV 及其受体在蒙古绵羊子宫和胚胎组织中的表达第35-42页
   ·材料与方法第35-38页
     ·试验动物及组织第35页
     ·主要仪器及试剂第35-36页
     ·PCR 引物的设计及合成第36页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的提取及检测第36-37页
     ·RT-PCR 反应第37页
     ·RT-PCR 产物的回收与序列测定第37-38页
   ·结果与分析第38-40页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胎盘组织总 RNA 的检测结果第38页
     ·enJSRV 及其受体基因 RT-PCR 扩增结果第38-39页
     ·enJSRV 及其受体 HYAL2 基因 RT-PCR 产物序列测定的分析第39-40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
3 试验二 enJSRV 在不同妊娠时期蒙古绵羊子宫和胚胎组织的定量表达第42-55页
   ·材料与方法第42-48页
     ·试验动物及组织第42页
     ·主要仪器及试剂第42页
     ·PCR 引物和探针的设计与合成第42-43页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的提取第43页
     ·Taq Man 探针实时荧光定量 RT-PCR 反应第43-44页
     ·荧光定量 PCR 稳定性和重复性的检测第44-45页
     ·标准曲线的建立第45页
     ·妊娠蒙古绵羊各时期子宫和胚胎组织enJSRV 基因表达水平的检测第45页
     ·enJSRV 基因cDNA 的克隆与鉴定第45-46页
     ·试验数据处理第46-48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的检测结果第48页
     ·荧光定量 PCR 的稳定性和重复性第48-49页
     ·enJSRV 和β-actin 实时荧光定量 PCR 扩增曲线分析第49-50页
     ·enJSRV 基因相对表达水平的检测第50-51页
     ·实时荧光定量 PCR 扩增片段的鉴定结果第51-52页
     ·荧光定量 PCR 产物克隆测序的结果第52-53页
   ·讨论第53-54页
   ·小结第54-55页
4 试验三 受体 HYAL2 在不同妊娠时期蒙古绵羊子宫和胚胎组织的定量表达第55-63页
   ·材料与方法第55-56页
     ·试验动物及组织第55页
     ·主要仪器及试剂第55页
     ·PCR 引物和探针的设计与合成第55-56页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织cDNA 的复检第56页
     ·Taq Man 探针实时荧光定量 PCR 反应的建立第56页
     ·妊娠蒙古绵羊各时期子宫和胚胎组织 HYAL2 基因表达水平的检测第56页
     ·HYAL2 cDNA 的克隆与鉴定第56页
     ·试验数据处理第56页
   ·结果与分析第56-60页
     ·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织cDNA 的复检结果第56-57页
     ·HYAL2 和β-actin 实时荧光定量 PCR 扩增曲线分析第57页
     ·HYAL2 基因相对表达水平的检测第57-58页
     ·实时荧光定量 PCR 扩增片段的鉴定结果第58-59页
     ·荧光定量 PCR 产物克隆测序的结果第59-60页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-63页
5 试验四 enJSRV 及其受体在蒙古绵羊子宫和胚胎组织中的空间定位第63-78页
   ·材料与方法第64-70页
     ·试验动物及其组织第64页
     ·主要仪器和试剂第64页
     ·主要试剂的配制第64-65页
     ·SP 正、反义 RNA 探针的制备及检测第65-69页
     ·原位杂交第69-70页
   ·结果与分析第70-75页
     ·SP 正、反义 RNA 探针的制备及检测结果第70-71页
     ·原位杂交检测结果第71-75页
   ·讨论第75-76页
     ·原位杂交技术的优化及影响因素第75页
     ·enJSRV 及其受体 HYAL2 mRNAs 在蒙古绵羊子宫和胚胎中的定位第75-76页
   ·小结第76-78页
6 总体结论与创新点第78-80页
   ·总体结论第78页
   ·创新点第78-80页
致谢第80-81页
参考文献第81-90页
作者简介第90页

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