摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-14页 |
1 引言 | 第14-35页 |
·内源性反转录病毒的研究进展 | 第14页 |
·enJSRV 基因结构特点(与外源性绵羊肺腺瘤逆转录病毒相比较) | 第14-16页 |
·绵羊肺腺瘤病(OPA)概述 | 第16-20页 |
·绵羊肺腺瘤病的病原学和流行病学 | 第17-18页 |
·OPA 的临床症状和病理变化 | 第18页 |
·OPA 的诊断和防治 | 第18-19页 |
·OPA 的发病机理 | 第19-20页 |
·enJSRV 在 OPA 发生过程中的作用 | 第20-21页 |
·enJSRV 在染色体中的分布 | 第21-22页 |
·enJSRV 对胎盘形成的影响 | 第22-23页 |
·母羊年龄和机体状况对enJSRV 表达的影响 | 第23页 |
·孕酮及 IFN-τ对enJSRV 表达的调节作用 | 第23页 |
·enJSRV 在宿主细胞中的进化 | 第23-24页 |
·妊娠过程中子宫内膜、绒毛膜、胎盘和胚胎的变化 | 第24-33页 |
·子宫内膜的形成及妊娠期的变化 | 第24-26页 |
·绒毛膜的形成及妊娠期的变化 | 第26-28页 |
·胎盘的形成及妊娠期的变化 | 第28-30页 |
·胚胎的形成及妊娠期的变化 | 第30-33页 |
·研究的目的及意义 | 第33-35页 |
2 试验一 enJSRV 及其受体在蒙古绵羊子宫和胚胎组织中的表达 | 第35-42页 |
·材料与方法 | 第35-38页 |
·试验动物及组织 | 第35页 |
·主要仪器及试剂 | 第35-36页 |
·PCR 引物的设计及合成 | 第36页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的提取及检测 | 第36-37页 |
·RT-PCR 反应 | 第37页 |
·RT-PCR 产物的回收与序列测定 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-40页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胎盘组织总 RNA 的检测结果 | 第38页 |
·enJSRV 及其受体基因 RT-PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
·enJSRV 及其受体 HYAL2 基因 RT-PCR 产物序列测定的分析 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
3 试验二 enJSRV 在不同妊娠时期蒙古绵羊子宫和胚胎组织的定量表达 | 第42-55页 |
·材料与方法 | 第42-48页 |
·试验动物及组织 | 第42页 |
·主要仪器及试剂 | 第42页 |
·PCR 引物和探针的设计与合成 | 第42-43页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的提取 | 第43页 |
·Taq Man 探针实时荧光定量 RT-PCR 反应 | 第43-44页 |
·荧光定量 PCR 稳定性和重复性的检测 | 第44-45页 |
·标准曲线的建立 | 第45页 |
·妊娠蒙古绵羊各时期子宫和胚胎组织enJSRV 基因表达水平的检测 | 第45页 |
·enJSRV 基因cDNA 的克隆与鉴定 | 第45-46页 |
·试验数据处理 | 第46-48页 |
·结果与分析 | 第48-53页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织总 RNA 的检测结果 | 第48页 |
·荧光定量 PCR 的稳定性和重复性 | 第48-49页 |
·enJSRV 和β-actin 实时荧光定量 PCR 扩增曲线分析 | 第49-50页 |
·enJSRV 基因相对表达水平的检测 | 第50-51页 |
·实时荧光定量 PCR 扩增片段的鉴定结果 | 第51-52页 |
·荧光定量 PCR 产物克隆测序的结果 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
4 试验三 受体 HYAL2 在不同妊娠时期蒙古绵羊子宫和胚胎组织的定量表达 | 第55-63页 |
·材料与方法 | 第55-56页 |
·试验动物及组织 | 第55页 |
·主要仪器及试剂 | 第55页 |
·PCR 引物和探针的设计与合成 | 第55-56页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织cDNA 的复检 | 第56页 |
·Taq Man 探针实时荧光定量 PCR 反应的建立 | 第56页 |
·妊娠蒙古绵羊各时期子宫和胚胎组织 HYAL2 基因表达水平的检测 | 第56页 |
·HYAL2 cDNA 的克隆与鉴定 | 第56页 |
·试验数据处理 | 第56页 |
·结果与分析 | 第56-60页 |
·妊娠蒙古绵羊子宫和胚胎组织cDNA 的复检结果 | 第56-57页 |
·HYAL2 和β-actin 实时荧光定量 PCR 扩增曲线分析 | 第57页 |
·HYAL2 基因相对表达水平的检测 | 第57-58页 |
·实时荧光定量 PCR 扩增片段的鉴定结果 | 第58-59页 |
·荧光定量 PCR 产物克隆测序的结果 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
·小结 | 第61-63页 |
5 试验四 enJSRV 及其受体在蒙古绵羊子宫和胚胎组织中的空间定位 | 第63-78页 |
·材料与方法 | 第64-70页 |
·试验动物及其组织 | 第64页 |
·主要仪器和试剂 | 第64页 |
·主要试剂的配制 | 第64-65页 |
·SP 正、反义 RNA 探针的制备及检测 | 第65-69页 |
·原位杂交 | 第69-70页 |
·结果与分析 | 第70-75页 |
·SP 正、反义 RNA 探针的制备及检测结果 | 第70-71页 |
·原位杂交检测结果 | 第71-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·原位杂交技术的优化及影响因素 | 第75页 |
·enJSRV 及其受体 HYAL2 mRNAs 在蒙古绵羊子宫和胚胎中的定位 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-78页 |
6 总体结论与创新点 | 第78-80页 |
·总体结论 | 第78页 |
·创新点 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-90页 |
作者简介 | 第90页 |