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猪捷申病毒检测方法的建立及应用

摘要第1-7页
 Abstract第7-14页
第一章 引言第14-20页
   ·猪捷申病毒研究进展第14-18页
     ·病原学第14-15页
     ·流行病学第15-16页
     ·临床症状第16页
     ·病理变化第16页
     ·诊断第16-17页
     ·防制第17-18页
   ·其他能够引起猪繁殖障碍的病毒简介第18页
   ·本研究的目的和意义第18-20页
第二章 检测PTV、CSFV 和PRRSV 的mRT-PCR 方法的建立及应用第20-26页
   ·材料和方法第20-21页
     ·病毒株及主要试剂第20页
     ·引物筛选第20页
     ·病毒标准品制备第20页
     ·单个病毒RT-PCR 反应体系第20-21页
     ·mRT-PCR 方法的建立及反应条件的优化第21页
     ·特异性试验第21页
     ·敏感性试验第21页
     ·临床样本的处理及检测第21页
   ·结果第21-24页
     ·病毒标准品制备第21页
     ·单个病毒RT-PCR第21-22页
     ·mRT-PCR 反应条件的建立与优化第22页
     ·特异性试验第22-23页
     ·敏感性试验第23页
     ·临床样本的检测第23-24页
   ·小结与讨论第24-26页
第三章 检测PTV 和PCV2 的二重PCR 方法的建立及应用第26-31页
   ·材料和方法第26-27页
     ·病毒株、质粒及主要试剂第26页
     ·引物筛选第26页
     ·病毒标准品制备第26页
     ·单个病毒PCR 反应体系第26页
     ·二重PCR 方法的建立及反应条件的优化第26-27页
     ·特异性试验第27页
     ·敏感性试验第27页
     ·临床样本的处理及检测第27页
   ·结果第27-29页
     ·标准品制备第27页
     ·单个病毒PCR第27-28页
     ·二重PCR 反应条件的建立与优化第28页
     ·特异性试验第28页
     ·敏感性试验第28-29页
     ·临床样本的检测第29页
   ·小结与讨论第29-31页
第四章 PTV-8 VP1 蛋白的原核表达、鉴定及纯化第31-39页
   ·材料和方法第31-35页
     ·病毒株、菌株、细胞与血清第31页
     ·主要试剂第31页
     ·引物设计与合成第31页
     ·病毒基因组RNA 的提取第31页
     ·VP1 基因的RT-PCR 扩增与克隆第31-32页
     ·VP1 基因表达载体的构建与鉴定第32页
     ·pET-VP1 重组蛋白的表达、鉴定与条件优化第32-33页
     ·pET-VP1 重组蛋白的纯化及活性检测第33-35页
   ·结果第35-37页
     ·VP1 基因的RT-PCR 扩增与克隆第35-36页
     ·VP1 基因表达载体的构建与鉴定第36页
     ·pET-VP1 重组蛋白的表达、鉴定与条件优化第36页
     ·pET-VP1 重组蛋白的纯化及活性检测第36-37页
   ·小结与讨论第37-39页
第五章 表达蛋白作为抗原的rVP1-ELISA 方法的建立第39-46页
   ·材料和方法第39-41页
     ·病毒株、菌株、细胞与血清第39页
     ·主要试剂第39页
     ·rVP1-ELISA 的操作程序第39页
     ·抗原、血清和酶标二抗最佳工作浓度的确定第39-40页
     ·一抗、二抗作用时间和显色时间的确定第40页
     ·封闭液的确定第40页
     ·判定标准的确定第40页
     ·特异性试验第40页
     ·重复性试验第40-41页
     ·临床血清样品的检测第41页
   ·结果第41-44页
     ·抗原、血清和酶标二抗最佳工作浓度的确定第41页
     ·一抗、二抗作用时间和显色时间的确定第41-42页
     ·封闭液的确定第42页
     ·判定标准的确定第42-43页
     ·特异性试验第43页
     ·敏感性试验第43页
     ·重复性试验第43-44页
     ·临床血清样品的检测第44页
   ·小结与讨论第44-46页
第六章 全文结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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