| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| 1.1 细菌天然产物的研究进展 | 第12-20页 |
| 1.1.1 细菌天然产物的结构分类 | 第12-18页 |
| 1.1.2 PKS/NRPS类化合物的异源表达研究 | 第18-20页 |
| 1.2 Red/ET同源重组技术 | 第20-30页 |
| 1.2.1 Red/ET重组技术中各元件的功能 | 第24-25页 |
| 1.2.2 Red/ET重组系统的选择 | 第25-26页 |
| 1.2.3 Red/ET同源重组的应用 | 第26-29页 |
| 1.2.4 直接克隆技术 | 第29-30页 |
| 1.3 立题依据和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 Myxochromide S基因簇的克隆和异源表达 | 第32-51页 |
| 2.1 前言 | 第32-34页 |
| 2.2 材料和方法 | 第34-42页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第34-38页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 2.3.1 MchS基因簇的亚克隆 | 第42-44页 |
| 2.3.2 TetR启动子替代MchS基因簇原始启动子 | 第44-45页 |
| 2.3.3 Mchs基因簇转入异源表达宿主农杆菌 | 第45-46页 |
| 2.3.4 Mchs基因簇的异源表达分析 | 第46-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-51页 |
| 2.4.1 PKS/NRPS类表达克隆载体选择的影响因素 | 第47-48页 |
| 2.4.2 异源表达启动子的选择影响 | 第48-49页 |
| 2.4.3 异源表达宿主菌的选择 | 第49-51页 |
| 第三章 埃博霉素基因簇的修饰和异源表达 | 第51-69页 |
| 3.1 前言 | 第51-53页 |
| 3.2 材料和方法 | 第53-59页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第53-56页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 3.3 结果与分析 | 第59-66页 |
| 3.3.1 埃博霉素基因簇的直接克隆 | 第59-61页 |
| 3.3.2 p15A-oriV-apra-Tn5-neo-Epo表达载体的构建 | 第61页 |
| 3.3.3 p15A-apra-P_(syr)-Tn5-epo-IR-Tpase-BSD-oriT载体的构建 | 第61-64页 |
| 3.3.4 epo基因簇整合至恶臭假单胞菌基因组 | 第64-65页 |
| 3.3.5 epo基因簇转入异源表达宿主农杆菌 | 第65页 |
| 3.3.6 epo基因簇的异源表达分析 | 第65-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-69页 |
| 3.4.1 直接克隆 | 第66-67页 |
| 3.4.2 替换epoK启动子的影响 | 第67-69页 |
| 第四章 syl基因簇的直接克隆与异源表达 | 第69-91页 |
| 4.1 前言 | 第69-71页 |
| 4.2 材料和方法 | 第71-79页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第71-76页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第76-79页 |
| 4.3 结果与分析 | 第79-90页 |
| 4.3.1 syl基因簇的直接克隆 | 第79-80页 |
| 4.3.2 链霉素P_(snpA)替代syl基因簇原始启动子 | 第80-81页 |
| 4.3.3 syl基因簇整合进异源宿主菌 | 第81-82页 |
| 4.3.4 syl基因簇的异源表达分析 | 第82-90页 |
| 4.4 讨论 | 第90-91页 |
| 4.4.1 链霉菌作为异源表达宿主的优越性 | 第90页 |
| 4.4.2 syringolin衍生物化合物生物活性 | 第90-91页 |
| 第五章 研究结论与展望 | 第91-92页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第91页 |
| 5.2 下一步研究设想 | 第91-92页 |
| 5.2.1 寻找新生物活性化合物基因簇,加快新药开发研究 | 第91页 |
| 5.2.2 优化Red/ET重组系统,提高直接克隆效率 | 第91页 |
| 5.2.3 基因簇改造,提高异源表达菌产素水平 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 论文发表情况 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 本论文感谢以下基金项目的资助 | 第110-111页 |
