摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
第一部分 前言 | 第9-16页 |
1.1 水稻及其基因组学简介 | 第9-10页 |
1.2 水稻基因组学的主要研究方法 | 第10页 |
1.3 TAIL-PCR与hiTAIL-PCR的原理和应用 | 第10-12页 |
1.3.1 TAIL-PCR | 第10-12页 |
1.3.2 hiTAIL-PCR结合利用普通TAIL-PCR和抑制PCR的原理 | 第12页 |
1.4 T-DNA插入技术进展 | 第12-16页 |
1.4.1 T-DNA插入标签技术介绍 | 第12-13页 |
1.4.2 T-DNA标签的应用 | 第13-14页 |
1.4.3 DNA直接导入的转基因技术 | 第14-16页 |
第二部分 材料与方法 | 第16-26页 |
2.1 材料 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-24页 |
2.2.1 水稻种植 | 第16页 |
2.2.2 水稻营养液培养 | 第16-17页 |
2.2.3 水稻生理实验分析 | 第17页 |
2.2.4 半薄切片 | 第17-18页 |
2.2.5 新CTAB法提取水稻基因组DNA | 第18-19页 |
2.2.6 引物设计 | 第19页 |
2.2.7 hiTAIL-PCR | 第19-22页 |
2.2.8 拟南芥转化 | 第22-23页 |
2.2.9 农杆菌介导的水稻转化过程 | 第23-24页 |
2.3 农杆菌介导的拟南芥转基因植株分析 | 第24-26页 |
2.3.1 重组质粒转化农杆菌 | 第24页 |
2.3.2 拟南芥的转化 | 第24页 |
2.3.3 转基因植株筛选 | 第24-26页 |
第三部分 结果与分析 | 第26-35页 |
3.1 一个T-DNA插入突变体367的表型鉴定 | 第26-28页 |
3.2 367 表皮细胞观察 | 第28-29页 |
3.3 突变体367的T-DNA插入验证 | 第29页 |
3.4 水稻突变体367基因初步克隆 | 第29-30页 |
3.5 OsPIPE转化拟南芥植株以及水稻中RNAi植株的分析 | 第30-35页 |
3.5.1 OsPIPE转化拟南芥植株 | 第30-32页 |
3.5.2 水稻RNAi的转基因体系 | 第32-35页 |
第四部分 讨论 | 第35-38页 |
4.1 突变体367的高度增加、茎节增长 | 第35页 |
4.2 367 突变基因的克隆 | 第35-36页 |
4.3 OsPIPE转基因植株的鉴定,以及水稻RNAi植株的获得 | 第36-37页 |
4.4 农杆菌介导的水稻转化 | 第37-38页 |
小结 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
致谢 | 第42页 |