| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略简表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| 1 前言 | 第16页 |
| 2 昆虫滞育的概况 | 第16-18页 |
| 3 滞育准备期研究进展 | 第18-22页 |
| 3.1 内分泌调控-保幼激素 | 第19页 |
| 3.2 营养物质积累-能量储备 | 第19-20页 |
| 3.3 抗逆能力调节 | 第20-22页 |
| 4 大猿叶虫及其滞育研究进展 | 第22-24页 |
| 5 论文设计 | 第24-26页 |
| 5.1 研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 5.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 大猿叶虫转录组Unigene数据库构建和实时定量PCR内参基因筛选 | 第26-57页 |
| 1 前言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第27-28页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 样品收集 | 第29页 |
| 2.4 Illumina测序和序列组装 | 第29-31页 |
| 2.5 Unigene功能注释和分类 | 第31页 |
| 2.6 候选内参基因选择和引物设计 | 第31页 |
| 2.7 总RNA提取和cDNA合成 | 第31-32页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR分析 | 第32页 |
| 2.9 候选内参基因表达稳定性分析 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-54页 |
| 3.1 Illumina测序和de novo组装 | 第33-36页 |
| 3.2 蛋白注释和同源性分析 | 第36-38页 |
| 3.3 基因聚类分析 | 第38-46页 |
| 3.4 候选内参基因的鉴定 | 第46页 |
| 3.5 候选内参基因的表达分析 | 第46页 |
| 3.6 ge Norm分析基因表达稳定性 | 第46-47页 |
| 3.7 NormFinder分析基因表达稳定性 | 第47-49页 |
| 3.8 BestKeeper分析基因表达稳定性 | 第49页 |
| 3.9 RefFinder分析基因表达稳定性 | 第49-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 第三章 大猿叶虫滞育准备起始期差异蛋白鉴定和FABP功能分析 | 第57-77页 |
| 1 前言 | 第57-58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-65页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第58-59页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第59页 |
| 2.3 样品收集 | 第59-60页 |
| 2.4 蛋白提取和浓度测定 | 第60页 |
| 2.5 蛋白酶解和iTRAQ标记 | 第60页 |
| 2.6 SCX分离和LC-ESI-MS/MS分析 | 第60-61页 |
| 2.7 蛋白鉴定和定量统计分析 | 第61-62页 |
| 2.8 差异蛋白转录水平验证 | 第62-63页 |
| 2.9 蛋白功能聚类 | 第63-64页 |
| 2.10 RNA干扰大猿叶虫FABP | 第64页 |
| 2.11 沉默FABP后脂肪体形态分析 | 第64-65页 |
| 2.12 数据分析 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-73页 |
| 3.1 大猿叶虫滞育准备起始期蛋白鉴定 | 第65-66页 |
| 3.2 蛋白定量统计分析和qRT-PCR验证 | 第66页 |
| 3.3 差异蛋白的功能分析 | 第66-68页 |
| 3.4 FABP沉默对脂肪体膨大、脂质积累和Hsps基因表达的影响 | 第68-73页 |
| 4 讨论 | 第73-77页 |
| 第四章 JH信号调节大猿叶虫滞育准备的营养代谢基因转录 | 第77-99页 |
| 1 前言 | 第77-78页 |
| 2 材料与方法 | 第78-87页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第78页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第78页 |
| 2.3 样品收集 | 第78页 |
| 2.4 RNA-Seq测序用总RNA提取和纯化 | 第78-79页 |
| 2.5 RNA-Seq文库制备和Illumina测序 | 第79-80页 |
| 2.6 DEGs的功能聚类分析 | 第80-81页 |
| 2.7 qRT-PCR验证分析 | 第81页 |
| 2.8 JH类似物处理和RNA干扰Met | 第81-87页 |
| 3 结果 | 第87-96页 |
| 3.1 Illumina测序文库数据分析 | 第87页 |
| 3.2 大猿叶虫滞育准备期和产卵前期DEGs的鉴定 | 第87-88页 |
| 3.3 DEGs聚类分析 | 第88页 |
| 3.4 代谢通路的表达模式分析 | 第88-91页 |
| 3.5 JH调控滞育准备期营养代谢基因的表达 | 第91-96页 |
| 4 讨论 | 第96-99页 |
| 第五章 FAS2调节大猿叶虫滞育准备期的脂质积累和抗逆基因表达 | 第99-120页 |
| 1 前言 | 第99-100页 |
| 2 材料与方法 | 第100-108页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第100页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第100页 |
| 2.3 序列克隆和分析 | 第100页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR分析 | 第100-101页 |
| 2.5 RNA干扰大猿叶虫FAS2 | 第101-102页 |
| 2.6 沉默FAS2后脂肪体形态分析 | 第102页 |
| 2.7 沉默FAS2后含水量测定 | 第102页 |
| 2.8 沉默FAS2后滞育准备持续期和滞育发生率的观察 | 第102页 |
| 2.9 JH-Met信号对FAS2的转录调控 | 第102-108页 |
| 2.10 数据分析 | 第108页 |
| 3 结果 | 第108-114页 |
| 3.1 FAS序列分析 | 第108-109页 |
| 3.2 FAS表达模式分析 | 第109-110页 |
| 3.3 注定滞育雌成虫沉默FAS2后的脂质累积 | 第110-111页 |
| 3.4 注定滞育雌成虫沉默FAS2后的抗逆基因表达和含水量变化 | 第111-112页 |
| 3.5 注定滞育雌成虫沉默FAS2后的滞育准备持续期和滞育发生 | 第112-113页 |
| 3.6 JH-Met信号调控FAS2的转录表达 | 第113-114页 |
| 4 讨论 | 第114-120页 |
| 第六章 总结与展望 | 第120-124页 |
| 1 总结 | 第120-122页 |
| 2 创新点 | 第122页 |
| 3 展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 附录 | 第139-141页 |
