| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 香蕉概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 香蕉的分类 | 第10页 |
| 1.1.2 香蕉生物学特征 | 第10-11页 |
| 1.1.3 香蕉的地位 | 第11页 |
| 1.2 呼吸跃变型果实成熟的研究概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 乙烯与果实成熟的关系 | 第11-12页 |
| 1.2.2 乙烯的生物合成与基因表达 | 第12-13页 |
| 1.2.2.1 乙烯生物合成途径 | 第12页 |
| 1.2.2.2 ACC合成酶(ACS)及其多基因家族 | 第12-13页 |
| 1.2.2.3 乙烯的反馈调节 | 第13页 |
| 1.3 其它与果实成熟相关的基因 | 第13-14页 |
| 1.3.1 PG酶基因 | 第13页 |
| 1.3.2 EGase基因 | 第13-14页 |
| 1.4 几丁质酶概述 | 第14-16页 |
| 1.4.1 几丁质酶的分类 | 第14-15页 |
| 1.4.2 植物几丁质酶的基因结构 | 第15页 |
| 1.4.3 植物几丁质酶基因的表达和调控 | 第15-16页 |
| 1.4.3.1 植物几丁质酶基因的表达 | 第15-16页 |
| 1.4.4 几丁质酶基因与某些蛋白的关系 | 第16页 |
| 1.5 蛋白质组与蛋白质组学技术 | 第16-19页 |
| 1.5.1 蛋白质提取技术 | 第17页 |
| 1.5.2 双向电泳技术 | 第17-18页 |
| 1.5.3 蛋白质的检测技术 | 第18页 |
| 1.5.4 蛋白质的质谱分析 | 第18-19页 |
| 1.5.5 植物蛋白质组学 | 第19页 |
| 1.6 实时荧光定量PCR技术 | 第19-20页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.8 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 材料的准备 | 第22页 |
| 2.1.1. 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.3 生物信息学软件 | 第22页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第22-34页 |
| 2.2.1 香蕉果皮总蛋白的提取(酚抽提法) | 第22-23页 |
| 2.2.2 蛋白质含量的测定 | 第23页 |
| 2.2.3 蛋白质单向电泳 | 第23-24页 |
| 2.2.4 蛋白质双向电泳 | 第24-27页 |
| 2.2.4.1 第一向电泳 | 第24-25页 |
| 2.2.4.2 胶条平衡 | 第25页 |
| 2.2.4.3 第二向SDS-PAGE电泳 | 第25-27页 |
| 2.2.4.4 凝胶染色 | 第27页 |
| 2.2.4.5 凝胶图像扫描与分析 | 第27页 |
| 2.2.5. 香蕉总DNA的提取及浓度测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5.1 香蕉总DNA的提取(CTAB法) | 第27-28页 |
| 2.2.5.2 香蕉叶片总DNA浓度测定 | 第28页 |
| 2.2.6. 差异蛋白MaCHⅢ基因的克隆 | 第28-31页 |
| 2.2.6.1 差异蛋MaCHⅢ白基因PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.6.2 PCR扩增产物回收 | 第28-29页 |
| 2.2.6.3 目的基因的克隆(连接与转化) | 第29页 |
| 2.2.6.4 重组子的菌液PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.6.5 阳性克隆序列分析 | 第30页 |
| 2.2.6.6 DNA质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.2.7 RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.7.1 香蕉各器官总RNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.7.2 RNA电泳检测 | 第31-32页 |
| 2.2.8 cDNA第一链的合成 | 第32页 |
| 2.2.9 扩增单链cDNA | 第32-33页 |
| 2.2.10 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.2.10.1 扩增引物设计 | 第33页 |
| 2.2.10.2 反应体系和反应条件 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.1 香蕉果皮差异蛋白的分离 | 第34-36页 |
| 3.1.1 香蕉果皮总蛋白提取 | 第34页 |
| 3.1.2 香蕉果皮总蛋白的分离及质谱分析 | 第34-36页 |
| 3.2 香蕉叶片总DNA的提取 | 第36页 |
| 3.3 差异蛋白MaCHⅢ基因的克隆 | 第36-41页 |
| 3.3.1 差异蛋白点MaCHⅢ基因扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.3.2 重组子菌液PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.3 阳性克隆序列分析 | 第38页 |
| 3.3.4 MaCHⅢ基因序列生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 3.3.4.1 开放阅读框分析和基因预测 | 第38-39页 |
| 3.3.4.2 在NCBI数据库进行氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| 3.3.5 香蕉组织总RNA提取 | 第40-41页 |
| 3.3.6 MaCHⅢ基因在香蕉各个器官的转录表达分析 | 第41页 |
| 3.3.6.1 MaCHⅢ基因在各器官中的表达量 | 第41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 5、创新点 | 第42页 |
| 6、讨论 | 第42-45页 |
| 6.1 关于香蕉各组织器官RNA的提取 | 第42-43页 |
| 6.2 实时荧光定量PCR | 第43页 |
| 6.3 MaCHⅢ基因及其在香蕉组织中的表达水平 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 英文缩写词Abbreviatio | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
