摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-16页 |
1.1 无角间性山羊的研究背景 | 第9-11页 |
1.1.1 山羊无角间性综合症 | 第9-10页 |
1.1.2 性别鉴定方法 | 第10-11页 |
1.2 PISRT1 和 FOXL2 基因研究进展 | 第11-12页 |
1.2.1 PISRT1 | 第11页 |
1.2.2 FOXL2 | 第11-12页 |
1.2.3 PISRT1 与 FOXL2 作用关系 | 第12页 |
1.3 PIS 区域变异特点 | 第12-13页 |
1.4 启动子研究方法 | 第13-14页 |
1.4.1 启动子结构 | 第13页 |
1.4.2 启动子功能性分析方法 | 第13-14页 |
1.5 主要内容和意义 | 第14-16页 |
1.5.1 研究内容 | 第14-15页 |
1.5.2 研究意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 试验材料 | 第16-19页 |
2.1.1 试验样品及来源 | 第16页 |
2.1.2 常规试剂来源及配制 | 第16-18页 |
2.1.3 试验仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 数据库与数据分析软件 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-27页 |
2.2.1 无角间性奶山羊的遗传学基础鉴定 | 第19-20页 |
2.2.2 PISRT1 基因变异分析 | 第20-21页 |
2.2.3 启动子生物信息学分析 | 第21-22页 |
2.2.4 启动子缺失片段克隆及重组载体构建 | 第22-24页 |
2.2.5 细胞培养及转染 | 第24-25页 |
2.2.6 Luc 报告基因活性检测 | 第25-26页 |
2.2.7 PIS 区域变异分析 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-43页 |
3.1 无角间性奶山羊的遗传学基础鉴定 | 第27-28页 |
3.1.1 基因组的提取结果 | 第27页 |
3.1.2 唐山奶山羊 SRY 基因鉴定 | 第27-28页 |
3.1.3 无角间性山羊外生殖器的观察与分类 | 第28页 |
3.2 PISRT1 基因的变异分析 | 第28-31页 |
3.2.1 序列比对分析 | 第28-29页 |
3.2.2 不同表型基因频率和基因型频率 | 第29-30页 |
3.2.3 遗传多样性及 Hardy‐Weinberg 平衡分析 | 第30-31页 |
3.3 PISRT1 基因启动子研究 | 第31-35页 |
3.3.1 序列的选取及确定 | 第31-32页 |
3.3.2 核心启动子及转录因子预测 | 第32-35页 |
3.4 FOXL2 基因核心启动子分析 | 第35-41页 |
3.4.1 FOXL2 基因启动子全长片段的获得 | 第35页 |
3.4.2 重组质粒 pMD19‐T/ FOXL2‐SA 的鉴定 | 第35-37页 |
3.4.3 FOXL2 基因的生物信息学分析 | 第37-39页 |
3.4.4 缺失启动子片段的克隆及报告基因载体的构建 | 第39页 |
3.4.5 细胞转染 | 第39-40页 |
3.4.6 Luc 报告基因活性分析 | 第40-41页 |
3.5 PISRT1 基因与 FOXL2 基因相互作用分析 | 第41页 |
3.6 PIS 区域变异分析 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 试验结果讨论 | 第43-45页 |
4.1.1 无角间性奶山羊遗传学基础 | 第43页 |
4.1.2 PISRT1 基因 | 第43-44页 |
4.1.3 FOXL2 基因 | 第44-45页 |
4.2 试验操作讨论 | 第45-47页 |
4.2.1 山羊血液 DNA 的提取 | 第45-46页 |
4.2.2 细胞培养操作 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
在读期间发表论文情况 | 第52-53页 |
作者简历 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |