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马铃薯黑痣病菌系统发育分析及融合群快速鉴定

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 引言第9-17页
    1.1 马铃薯黑痣病的危害第9-10页
    1.2 马铃薯黑痣病病菌的分类地位第10-11页
        1.2.1 立枯丝核菌的分类特征第10页
        1.2.2 菌丝融合群在立枯丝核菌上的应用第10-11页
    1.3 核酸技术应用于立枯丝核菌分类研究第11-13页
        1.3.1 DNA 中 G+C mol%含量分析用于立枯丝核菌种群鉴定第11页
        1.3.2 核酸杂交用于融合群划分第11页
        1.3.3 DNA 指纹技术用于立枯丝核菌分类学研究第11-12页
        1.3.4 特异性 PCR 扩增对立枯丝核菌的鉴定第12页
        1.3.5 直接测序法鉴定融合群第12-13页
    1.4 立枯丝核菌分子进化研究第13-14页
        1.4.1 ITS 序列在立枯丝核菌系统发育中的应用第13-14页
        1.4.2 TEF 序列在立枯丝核菌系统发育中的应用第14页
        1.4.3 其它基因片段在立枯丝核菌系统发育中的应用第14页
    1.5 立枯丝核菌融合群特异性检测第14-15页
        1.5.1 rDNA-ITS 在立枯丝核菌分子检测中的应用第15页
        1.5.2 线粒体细胞色素 b 用于真菌鉴定第15页
    1.6 立枯丝核菌致病力研究第15-16页
    1.7 本研究的目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-24页
    2.1 试验材料第17-19页
        2.1.1 供试菌株第17-19页
        2.1.2 菌丝融合群标准菌株第19页
        2.1.3 供试培养基第19页
    2.2 供试试剂及仪器第19-20页
        2.2.1 供试主要试剂第19页
        2.2.2 供试主要仪器第19-20页
    2.3 试验方法第20-24页
        2.3.0 马铃薯黑痣病菌的采集及菌株的分离与鉴定第20页
        2.3.1 菌丝融合群测定第20页
        2.3.2 营养亲和群测定第20页
        2.3.3 供试菌株 DNA 的提取第20-21页
        2.3.4 马铃薯黑痣病菌的 ITS 区序列分析第21-22页
        2.3.5 马铃薯黑痣病菌 TEF 序列分析第22-23页
        2.3.6 马铃薯黑痣病融合群快速检测第23页
        2.3.7 马铃薯黑痣病的致病力测定第23-24页
3 结果与分析第24-37页
    3.1 黑痣病菌不同融合群的营养亲和群测定第24-26页
        3.1.1 不同融合群菌株之间的营养亲和现象第24页
        3.1.2 各营养亲和群的出现频率及分布第24-26页
    3.2 马铃薯黑痣病菌不同融合群室内致病力测定第26-28页
    3.3 马铃薯黑痣病菌的 ITS 区序列分析第28-31页
        3.3.1 马铃薯黑痣病菌不同融合群菌株的 ITS 扩增结果第28-29页
        3.3.2 ITS 区序列长度和变异信息第29页
        3.3.3 AG4 三个亚群的 ITS 差异分析第29-30页
        3.3.4 基于 ITS 序列的立枯丝核菌系统发育分析第30页
        3.3.5 AG4 和 AG9 融合群菌株异质性分析第30-31页
    3.4 马铃薯黑痣病菌 TEF 序列分析第31-34页
        3.4.1 马铃薯黑痣病不同融合群菌株 TEF-1α基因扩增第31页
        3.4.2 序列测定第31页
        3.4.3 TEF-1α序列遗传多态性分析第31-32页
        3.4.4 基于 TEF-1α序列的立枯丝核菌系统发育分析第32-33页
        3.4.5 各融合群的 TEF-1α氨基酸序列分析第33-34页
    3.5 利用基因 Cytb 快速鉴定马铃薯黑痣病菌常见融合群第34-37页
        3.5.1 5 个融合群及亚群 Cytb 基因扩增结果第34-35页
        3.5.2 AG2-1 和 AG4HGⅡ两个融合群 Cytb 序列分析第35页
        3.5.3 马铃薯黑痣病菌融合群部分 Cytb 基因序列分析第35-37页
4 讨论第37-39页
    4.1 马铃薯黑痣病菌 ITS 序列和 TEF 序列存在异质性第37页
    4.2 Cytb 在病原真菌检测中的优势第37页
    4.3 马铃薯黑痣病主要致病类群第37-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-45页
作者简历第45-46页
致谢第46-47页

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