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工程大肠杆菌生产酪醇葡萄糖苷

摘要第4-5页
abstract第5-6页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 红景天苷药理活性第11-13页
        1.1.1 红景天苷的结构第11-12页
        1.1.2 对神经系统的保护第12页
        1.1.3 保护心血管第12页
        1.1.4 抗癌活性第12-13页
        1.1.5 抗缺氧、抗疲劳以及抗衰老作用第13页
    1.2 红景天苷的市场应用第13-15页
        1.2.1 在保健品方面的应用第14页
        1.2.2 在药品方面的应用第14页
        1.2.3 在化妆品方面的应用第14-15页
    1.3 红景天苷制备方法第15-17页
        1.3.1 从红景天植物中提取制备红景天苷第15页
        1.3.2 化学合成制备红景天苷第15-16页
        1.3.3 生物酶法制备红景天苷第16页
        1.3.4 重组微生物合成红景天苷第16-17页
    1.4 酪醇的生物合成第17-18页
        1.4.1 酪氨酸脱羧途径合成酪醇第17-18页
        1.4.2 酪氨酸转氨途径合成酪醇第18页
    1.5 UDP-葡萄糖代谢工程改造第18-19页
        1.5.1 增强UDP-葡萄糖合成途径第18页
        1.5.2 阻断竞争及降解途径第18-19页
    1.6 人工合成混菌体系优化代谢途径第19-20页
        1.6.1 大肠杆菌-大肠杆菌混菌体系第19-20页
        1.6.2 大肠杆菌-酿酒酵母混菌体系第20页
    1.7 本文的主要研究内容以及意义第20-22页
        1.7.1 主要研究内容第20-21页
        1.7.2 研究意义第21-22页
第二章 大肠杆菌合成酪醇途径的构建与优化第22-47页
    2.1 实验材料第22-27页
        2.1.1 实验所用菌株与质粒第22-24页
        2.1.2 实验所用试剂与仪器第24-25页
        2.1.3 实验所用引物第25-26页
        2.1.4 培养基第26-27页
    2.2 实验方法第27-34页
        2.2.1 PCR反应扩增目的基因第27页
        2.2.2 重叠延伸PCR扩增敲除整合片段第27-28页
        2.2.3 碱法提取质粒第28-29页
        2.2.4 酶切连接反应第29-30页
        2.2.5 转化第30页
        2.2.6 菌落PCR第30页
        2.2.7 质粒电击转化方法第30-31页
        2.2.8 密码子优化第31页
        2.2.9 酮基脱羧酶表达载体构建第31-32页
        2.2.10 λ-red同源重组方法第32-33页
        2.2.11 摇瓶发酵检测第33-34页
    2.3 结果与讨论第34-45页
        2.3.1 酮基脱羧酶基因的筛选与表达第34-38页
        2.3.2 IPTG浓度对酪醇产量的影响第38-39页
        2.3.3 乙醇脱氢酶基因的过表达第39-41页
        2.3.4 高产酪醇菌株的构建第41-45页
    2.4 本章小结第45-47页
第三章 UDP-葡萄糖的合成途径改造第47-63页
    3.1 实验材料第47-50页
        3.1.1 实验所用菌株与质粒第47-48页
        3.1.2 实验所用试剂与仪器第48-49页
        3.1.3 实验所用引物第49-50页
    3.2 实验方法第50-54页
        3.2.1 密码子优化第50-51页
        3.2.2 糖基转移酶表达载体构建第51页
        3.2.3 红景天苷转化底盘菌株构建第51-53页
        3.2.4 摇瓶发酵检测第53-54页
    3.3 结果与分析第54-61页
        3.3.1 糖基转移酶基因的筛选与表达第54-58页
        3.3.2 酪醇糖苷转化底盘菌株的构建第58-61页
        3.3.3 BMS11合成酪醇糖苷的性能第61页
    3.4 本章小结第61-63页
第四章 大肠杆菌混合培养发酵生产酪醇糖苷第63-72页
    4.1 实验材料第63-64页
        4.1.1 菌株与质粒第63-64页
        4.1.2 实验所用试剂及仪器第64页
        4.1.3 实验所用引物第64页
    4.2 实验方法第64-65页
        4.2.1 表达载体构建第64-65页
        4.2.2 发酵检测第65页
        4.2.3 菌株生长状况表征第65页
    4.3 结果与分析第65-71页
        4.3.1 大肠杆菌-大肠杆菌共培养体系设计第65-66页
        4.3.2 共培养系统中菌群比例优化第66-69页
        4.3.3 共培养系统中碳源比例优化第69-70页
        4.3.4 分批补料发酵生产酪醇糖苷第70-71页
    4.4 本章小结第71-72页
第五章 结论与展望第72-74页
    5.1 主要结论第72-73页
    5.2 展望第73-74页
参考文献第74-79页
发表论文和参加科研情况说明第79-80页
致谢第80-81页

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