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旋毛虫Nudix水解酶的克隆表达与功能鉴定

摘要第5-10页
abstract第10-15页
英文缩略词第19-21页
第一部分 旋毛虫Nudix水解酶的分子鉴定及其免疫保护作用的研究第21-63页
    1 材料与方法第21-40页
        1.1 实验所使用的主要仪器第21-22页
        1.2 实验所使用的主要试剂第22-23页
        1.3 生物材料第23-24页
        1.4 主要试剂配制第24-29页
        1.5 主要方法第29-40页
    2 结果第40-61页
        2.1 TsNd基因结构识别结果第40-41页
        2.2 TsNd蛋白系列分析结果第41-46页
        2.3 TsNd基因的引物设计第46页
        2.4 提取旋毛虫肌幼虫总RNA第46-47页
        2.5 TsNd基因RT-PCR的扩增产物第47页
        2.6 PCR产物的单酶切验证第47-48页
        2.7 TsNd基因PCR产物与简易载体pGEM-T链接及重组菌的PCR鉴定第48页
        2.8 重组克隆载体的酶切鉴定第48-49页
        2.9 重组质粒的测序鉴定序列分析第49-51页
        2.10 表达载体pMAL-c2X与TsNd基因的链接、转化及PCR鉴定第51-52页
        2.11 rTsNd的诱导表达第52-53页
        2.12 rTsNd的可溶性分析第53页
        2.13 rTsNd的纯化第53-54页
        2.14 rTsNd及TsNd天然蛋白抗原性的Western blot分析结果第54页
        2.15 旋毛虫TsNd基因RT-PCR扩增及qPCR验证转录时相第54-55页
        2.16 旋毛虫TsNd在虫体定位第55-58页
        2.17 间接ELISA法检测小鼠血清抗体滴度第58页
        2.18 TsNd引起的免疫反应类型的检测第58-59页
        2.19 旋毛虫肌幼虫攻击感染 rTsNd 免疫小鼠的减虫率检测第59-61页
    3 讨论第61-62页
    4 小结第62-63页
第二部分 rTsNd的功能分析及对旋毛虫病血清学诊断的潜在价值第63-86页
    1 材料与方法第64-70页
        1.1 实验所使用的主要仪器第64页
        1.2 实验所使用的主要试剂第64页
        1.3 相关生物材料来源第64页
        1.4 主要试剂配制第64-65页
        1.5 主要方法第65-70页
    2 结果第70-84页
        2.1 rTsNd的酶活性分析第70页
        2.2 HPLC优化酶作用条件及分析酶的动力学参数第70-72页
        2.3 BHK对旋毛虫侵入敏感性的研究第72-73页
        2.4 免疫荧光鉴定rTsNd与IECs结合的特异性第73-75页
        2.5 鉴定rTsNd与正常小鼠小肠的结合情况第75页
        2.6 Far Western鉴定旋毛虫rTsNd与IECs结合第75-76页
        2.7 rTsNd对旋毛虫感染性幼虫体外侵入IECs的影响第76-77页
        2.8 抗rTsNd血清体外对旋毛虫感染性幼虫侵入IECs的影响第77-78页
        2.9 体外ADCC试验第78-81页
        2.10 ELISA法检测rTsNd特异性及敏感性第81-82页
        2.11 rTsNd-ELISA and ES-ELISA对旋毛虫感染小鼠早期诊断的比较第82-84页
    3 讨论第84-85页
    4 小结第85-86页
第三部分 rTsNd在DSS诱导的结肠炎中的免疫保护作用第86-97页
    1 材料与方法第86-89页
        1.1 主要仪器第86-87页
        1.2 主要试剂第87页
        1.3 实验动物第87页
        1.4 主要试剂配制第87-88页
        1.5 主要方法第88-89页
    2 结果第89-95页
        2.1 rTsNd对小鼠DSS诱导结肠炎的的免疫保护第89-91页
        2.2 rTsNd体外抑制巨噬细胞炎症因子的产生第91-92页
        2.3 rTsNd诱导小鼠产生Th2型抗体第92-93页
        2.4 急性炎症细胞的免疫荧光检测第93页
        2.5 rTsNd抑制促炎因子的产生第93-95页
    3 讨论第95-96页
    4 小结第96-97页
参考文献第97-103页
全文结论第103-104页
综述第104-119页
    参考文献第113-119页
个人简历、博士期间发表的学术论文第119-121页
致谢第121-122页

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