摘要 | 第5-10页 |
abstract | 第10-15页 |
英文缩略词 | 第19-21页 |
第一部分 旋毛虫Nudix水解酶的分子鉴定及其免疫保护作用的研究 | 第21-63页 |
1 材料与方法 | 第21-40页 |
1.1 实验所使用的主要仪器 | 第21-22页 |
1.2 实验所使用的主要试剂 | 第22-23页 |
1.3 生物材料 | 第23-24页 |
1.4 主要试剂配制 | 第24-29页 |
1.5 主要方法 | 第29-40页 |
2 结果 | 第40-61页 |
2.1 TsNd基因结构识别结果 | 第40-41页 |
2.2 TsNd蛋白系列分析结果 | 第41-46页 |
2.3 TsNd基因的引物设计 | 第46页 |
2.4 提取旋毛虫肌幼虫总RNA | 第46-47页 |
2.5 TsNd基因RT-PCR的扩增产物 | 第47页 |
2.6 PCR产物的单酶切验证 | 第47-48页 |
2.7 TsNd基因PCR产物与简易载体pGEM-T链接及重组菌的PCR鉴定 | 第48页 |
2.8 重组克隆载体的酶切鉴定 | 第48-49页 |
2.9 重组质粒的测序鉴定序列分析 | 第49-51页 |
2.10 表达载体pMAL-c2X与TsNd基因的链接、转化及PCR鉴定 | 第51-52页 |
2.11 rTsNd的诱导表达 | 第52-53页 |
2.12 rTsNd的可溶性分析 | 第53页 |
2.13 rTsNd的纯化 | 第53-54页 |
2.14 rTsNd及TsNd天然蛋白抗原性的Western blot分析结果 | 第54页 |
2.15 旋毛虫TsNd基因RT-PCR扩增及qPCR验证转录时相 | 第54-55页 |
2.16 旋毛虫TsNd在虫体定位 | 第55-58页 |
2.17 间接ELISA法检测小鼠血清抗体滴度 | 第58页 |
2.18 TsNd引起的免疫反应类型的检测 | 第58-59页 |
2.19 旋毛虫肌幼虫攻击感染 rTsNd 免疫小鼠的减虫率检测 | 第59-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
4 小结 | 第62-63页 |
第二部分 rTsNd的功能分析及对旋毛虫病血清学诊断的潜在价值 | 第63-86页 |
1 材料与方法 | 第64-70页 |
1.1 实验所使用的主要仪器 | 第64页 |
1.2 实验所使用的主要试剂 | 第64页 |
1.3 相关生物材料来源 | 第64页 |
1.4 主要试剂配制 | 第64-65页 |
1.5 主要方法 | 第65-70页 |
2 结果 | 第70-84页 |
2.1 rTsNd的酶活性分析 | 第70页 |
2.2 HPLC优化酶作用条件及分析酶的动力学参数 | 第70-72页 |
2.3 BHK对旋毛虫侵入敏感性的研究 | 第72-73页 |
2.4 免疫荧光鉴定rTsNd与IECs结合的特异性 | 第73-75页 |
2.5 鉴定rTsNd与正常小鼠小肠的结合情况 | 第75页 |
2.6 Far Western鉴定旋毛虫rTsNd与IECs结合 | 第75-76页 |
2.7 rTsNd对旋毛虫感染性幼虫体外侵入IECs的影响 | 第76-77页 |
2.8 抗rTsNd血清体外对旋毛虫感染性幼虫侵入IECs的影响 | 第77-78页 |
2.9 体外ADCC试验 | 第78-81页 |
2.10 ELISA法检测rTsNd特异性及敏感性 | 第81-82页 |
2.11 rTsNd-ELISA and ES-ELISA对旋毛虫感染小鼠早期诊断的比较 | 第82-84页 |
3 讨论 | 第84-85页 |
4 小结 | 第85-86页 |
第三部分 rTsNd在DSS诱导的结肠炎中的免疫保护作用 | 第86-97页 |
1 材料与方法 | 第86-89页 |
1.1 主要仪器 | 第86-87页 |
1.2 主要试剂 | 第87页 |
1.3 实验动物 | 第87页 |
1.4 主要试剂配制 | 第87-88页 |
1.5 主要方法 | 第88-89页 |
2 结果 | 第89-95页 |
2.1 rTsNd对小鼠DSS诱导结肠炎的的免疫保护 | 第89-91页 |
2.2 rTsNd体外抑制巨噬细胞炎症因子的产生 | 第91-92页 |
2.3 rTsNd诱导小鼠产生Th2型抗体 | 第92-93页 |
2.4 急性炎症细胞的免疫荧光检测 | 第93页 |
2.5 rTsNd抑制促炎因子的产生 | 第93-95页 |
3 讨论 | 第95-96页 |
4 小结 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-103页 |
全文结论 | 第103-104页 |
综述 | 第104-119页 |
参考文献 | 第113-119页 |
个人简历、博士期间发表的学术论文 | 第119-121页 |
致谢 | 第121-122页 |