| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 缩略语对照表 | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 MEP途径概述 | 第11-17页 |
| 1.1.2 MEP途径中的关键酶 | 第13-16页 |
| 1.1.3 MEP途径是潜在的药物靶点 | 第16-17页 |
| 1.2 MEP途径中的DRL酶 | 第17-19页 |
| 1.2.1 BaDRL的发现 | 第17-18页 |
| 1.2.2 BaDRL的晶体结构 | 第18-19页 |
| 1.3 利用DRL的细菌 | 第19-21页 |
| 1.3.1 巴尔通体 | 第19-20页 |
| 1.3.2 布鲁杆菌 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 IPTG诱导BaDRL的表达、纯化及酶学表征 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 溶液配方 | 第24-26页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.2.1 菌株的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.2 BaDRL的IPTG诱导表达 | 第28页 |
| 2.2.3 BaDRL的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.4 BaDRL的SDS-PAGE检测 | 第29-30页 |
| 2.2.5 BaDRL的浓度测定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 BaDRL的活性鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.7 BaDRL的稳态动力学参数测定 | 第33-35页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第35-39页 |
| 2.3.1 菌株的构建结果 | 第35页 |
| 2.3.2 BaDRL的IPTG诱导表达结果 | 第35页 |
| 2.3.3 BaDRL的纯化与SDS-PAGE检测结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 BaDRL的浓度测定结果 | 第36-37页 |
| 2.3.5 BaDRL的活性鉴定结果 | 第37-38页 |
| 2.3.6 BaDRL的稳态动力学参数测定结果 | 第38-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-41页 |
| 第三章 自诱导BaDRL的表达、纯化及酶学表征 | 第41-55页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.1 菌株 | 第41页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.3 主要溶液配方 | 第42页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.3.1 BaDRL的自诱导表达 | 第42-43页 |
| 3.3.2 BaDRL的纯化 | 第43页 |
| 3.3.3 BaDRL的SDS-PAGE鉴定 | 第43页 |
| 3.3.4 BaDRL的浓度测定 | 第43页 |
| 3.3.5 BaDRL的反应条件优化 | 第43-45页 |
| 3.3.6 BaDRL稳态动力学参数测定 | 第45-46页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第46-52页 |
| 3.4.1 BaDRL的自诱导表达结果 | 第46-47页 |
| 3.4.2 BaDRL的纯化与SDS-PAGE鉴定结果 | 第47页 |
| 3.4.3 DRL的浓度测定结果 | 第47-48页 |
| 3.4.4 BaDRL反应条件优化结果 | 第48-51页 |
| 3.4.5 BaDRL动力学参数测定结果 | 第51-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-55页 |
| 第四章 BaDRL催化机制的初步探索 | 第55-69页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第55-57页 |
| 4.2.1 菌株 | 第55页 |
| 4.2.2 试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.3 主要溶液配方 | 第56页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第56-57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-62页 |
| 4.3.1 EcDXS和EcDXR的表达纯化和活性鉴定 | 第57页 |
| 4.3.2 DXP的合成 | 第57-59页 |
| 4.3.3 ~(18)O标记MEP的合成 | 第59-60页 |
| 4.3.4 ~(13)C标记DXP的合成 | 第60-62页 |
| 4.3.5 标记底物DXP和MEP结构鉴定 | 第62页 |
| 4.4 实验结果 | 第62-66页 |
| 4.4.1 DXP的合成结果 | 第62-63页 |
| 4.4.2 ~(18)O标记MEP的合成结果 | 第63-64页 |
| 4.4.3 ~(13)C标记DXP的合成结果 | 第64-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第81页 |
