| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| 1.1 气味化合物对昆虫行为的影响 | 第15-17页 |
| 1.1.1 植物挥发物 | 第16页 |
| 1.1.2 昆虫信息素 | 第16页 |
| 1.1.3 桃蛀螟性信息素的研究 | 第16-17页 |
| 1.2 昆虫触角感器及气味传导机制 | 第17-18页 |
| 1.3 昆虫嗅觉相关蛋白的研究 | 第18-29页 |
| 1.3.1 气味结合蛋白 (odorant binding proteins，OBPs) | 第18-21页 |
| 1.3.2 化学感受蛋白(chemosensory proteins，CSPs) | 第21-22页 |
| 1.3.3 化学感受受体 (chemosensory receptors, CRs) | 第22-28页 |
| 1.3.4 气味降解酶 (odorant degrading enzymes，ODEs) | 第28页 |
| 1.3.5 感觉神经元膜蛋白 (sensory neuron membrane proteins, SNMPs) | 第28-29页 |
| 1.4 转录组学概述 | 第29-31页 |
| 1.4.1 转录组学研究的技术与方法 | 第29-30页 |
| 1.4.2 转录组学在昆虫研究的应用 | 第30-31页 |
| 1.5 化学信息素识别的研究方法 | 第31-34页 |
| 1.5.1 触角电位技术 (electroantennogram, EAG) | 第31-32页 |
| 1.5.2 风洞行为试验 | 第32-34页 |
| 1.6 研究思路 | 第34-36页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第34页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 桃蛀螟性信息素结合蛋白CpunPBPs的功能验证 | 第36-51页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-43页 |
| 2.1.1 供试昆虫与试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.2 桃蛀螟触角总RNA提取 | 第37页 |
| 2.1.3 反转录 | 第37页 |
| 2.1.4 目的基因的分子克隆 | 第37-39页 |
| 2.1.5 CpunPBPs基因进化树分析 | 第39页 |
| 2.1.6 表达载体构建 | 第39-40页 |
| 2.1.7 重组质粒诱导表达 | 第40页 |
| 2.1.8 SDS-PAGE电泳检测 | 第40-41页 |
| 2.1.9 蛋白纯化 | 第41-42页 |
| 2.1.10 蛋白脱盐及浓缩 | 第42页 |
| 2.1.11 蛋白浓度测定 | 第42页 |
| 2.1.12 荧光竞争结合试验 | 第42-43页 |
| 2.2 结果分析 | 第43-49页 |
| 2.2.1 桃蛀螟PBPs的蛋白序列分析 | 第43-45页 |
| 2.2.2 桃蛀螟CpunPBPs的表达与纯化 | 第45-46页 |
| 2.2.3 桃蛀螟CpunPBPs的结合特性 | 第46-49页 |
| 2.3 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 桃蛀螟CpunPBPs的表达模式分析 | 第51-58页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.1.1 供试昆虫与试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第52-53页 |
| 3.1.3 触角总RNA的提取 | 第53页 |
| 3.1.4 cDNA的合成 | 第53页 |
| 3.1.5 荧光定量PCR | 第53页 |
| 3.1.6 桃蛀螟CpunPBPs蛋白抗体的制备 | 第53-54页 |
| 3.1.7 桃蛀螟CpunPBPs在触角感器中的免疫定位 | 第54页 |
| 3.2 结果分析 | 第54-56页 |
| 3.2.1 性信息素结合蛋白的表达谱分析 | 第54-55页 |
| 3.2.2 性信息素结合蛋白在触角感器中的表达部位 | 第55-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 桃蛀螟CpunPBP1和CpunPBP2蛋白特异性结合位点的研究 | 第58-70页 |
| 4.1 试验方法 | 第59-61页 |
| 4.1.1 CpunPBP1和CpunPBP2的同源建模 | 第59页 |
| 4.1.2 定点突变基因的克隆 | 第59-61页 |
| 4.1.3 突变体的原核表达与纯化 | 第61页 |
| 4.2 结果与分析 | 第61-68页 |
| 4.2.1 CpunPBP1和CpunPBP2三维结构模拟 | 第61页 |
| 4.2.2 CpunPBP1和CpunPBP2信息素识别位点预测 | 第61-65页 |
| 4.2.3 CpunPBP 1 和CpunPBP2突变体基因的克隆 | 第65-68页 |
| 4.3 讨论 | 第68-70页 |
| 第五章 桃蛀螟的趋性行为研究 | 第70-77页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-71页 |
| 5.1.1 材料 | 第70页 |
| 5.1.2 桃蛀螟雌、雄蛾成虫期求偶及交配行为观察 | 第70-71页 |
| 5.1.3 触角电位测定方法 | 第71页 |
| 5.1.4 风洞行为测试 | 第71页 |
| 5.2 结果与分析 | 第71-76页 |
| 5.2.1 桃蛀螟交配行为观察 | 第71-72页 |
| 5.2.2 桃蛀螟雌、雄蛾对寄主挥发物气味物质和性信息素组分的EAG反应 | 第72-74页 |
| 5.2.3 桃蛀螟雄蛾对不同诱芯的风洞定向行为反应 | 第74-76页 |
| 5.3 讨论 | 第76-77页 |
| 第六章 桃蛀螟嗅觉相关基因的鉴定 | 第77-109页 |
| 6.1 材料与方法 | 第78-83页 |
| 6.1.1 供试昆虫与主要试剂 | 第78页 |
| 6.1.2 触角总RNA的提取 | 第78页 |
| 6.1.3 桃蛀螟触角cDNA文库的构建及库检 | 第78-79页 |
| 6.1.4 基因功能注释 | 第79页 |
| 6.1.5 SSR分析 | 第79页 |
| 6.1.6 气味结合蛋白OBPs基因的鉴定 | 第79-80页 |
| 6.1.7 化学感受蛋白CSPs基因的鉴定 | 第80页 |
| 6.1.8 化学感受受体CRs基因的鉴定 | 第80页 |
| 6.1.9 感觉神经元膜蛋白SNMPs基因的鉴定 | 第80页 |
| 6.1.10 系统进化分析 | 第80页 |
| 6.1.11 桃蛀螟嗅觉相关基因在雌、雄蛾触角中表达差异比较 | 第80页 |
| 6.1.12 桃蛀螟OR基因的表达谱分析 | 第80-83页 |
| 6.2 结果与分析 | 第83-98页 |
| 6.2.1 触角转录组数据统计 | 第83-84页 |
| 6.2.2 雌、雄蛾触角文库中差异基因的比较 | 第84-85页 |
| 6.2.3 基因功能注释 | 第85-89页 |
| 6.2.4 SSR分析 | 第89-90页 |
| 6.2.5 气味结合蛋白OBPs基因的鉴定 | 第90-91页 |
| 6.2.6 化学感受蛋白CSPs基因的鉴定 | 第91-92页 |
| 6.2.7 化学感受受体CR基因的鉴定 | 第92-96页 |
| 6.2.8 感觉神经元膜蛋白SNMP的鉴定 | 第96-97页 |
| 6.2.9 桃蛀螟OR基因在雌、雄蛾触角中差异表达分析 | 第97-98页 |
| 6.3 讨论 | 第98-109页 |
| 第七章 全文结论 | 第109-111页 |
| 7.1 全文结论 | 第109-110页 |
| 7.2 本论文的创新之处 | 第110页 |
| 7.3 展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 作者简历 | 第136页 |
