| 致谢 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 引言 | 第14页 |
| 1 文献综述 | 第14-21页 |
| 1.1 经典BMP信号通路 | 第14-17页 |
| 1.1.1 BMP信号通路基本元件 | 第15-17页 |
| 1.1.2 BMP信号的调控 | 第17页 |
| 1.2 BMP信号通路与间充质干细胞分化 | 第17-19页 |
| 1.2.1 BMP信号促进成骨分化 | 第18-19页 |
| 1.2.2 BMP信号抑制肌肉分化 | 第19页 |
| 1.3 BMP信号的终止调控 | 第19-21页 |
| 1.3.1 核内的磷酸酶 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Smad1/5/8的核质穿梭 | 第20页 |
| 1.3.3 潜在的调控Smad核质穿梭的蛋白 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-41页 |
| 2.1 材料 | 第21-33页 |
| 2.1.1 细胞,菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 siRNA序列 | 第21页 |
| 2.1.3 质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.4 抗体 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第23-27页 |
| 2.1.6 仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.1.7 常规试剂配制 | 第28-32页 |
| 2.1.8 qPCR primer | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第33-41页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第33页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第33-34页 |
| 2.2.3 免疫荧光 | 第34页 |
| 2.2.4 siRNA敲减 | 第34页 |
| 2.2.5 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| 2.2.6 体外蛋白表达与纯化 | 第35页 |
| 2.2.7 体外蛋白转录与翻译 | 第35-36页 |
| 2.2.8 GST-Pulldown | 第36页 |
| 2.2.9 慢病毒包装以及稳转细胞系的构建 | 第36页 |
| 2.2.10 荧光素酶报告基因检测 | 第36页 |
| 2.2.11 细胞RNA的提取以及逆转录 | 第36-37页 |
| 2.2.12 Real-Time PCR | 第37-38页 |
| 2.2.13 碱性磷酸酶ALP染色 | 第38页 |
| 2.2.14 小鼠骨髓间充质干细胞的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.15 小鼠骨髓间充质干细胞的成骨诱导 | 第39页 |
| 2.2.16 茜素红染色 | 第39页 |
| 2.2.17 C2C12细胞成肌诱导 | 第39页 |
| 2.2.18 体外出核实验 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-75页 |
| 3.1 RanBP3L抑制Smad1/5/8介导的转录活性 | 第41-46页 |
| 3.2 RanBP3L不影响Smad2/3介导的TGF-β信号 | 第46-48页 |
| 3.3 RanBP3L抑制C2C12细胞的成骨分化 | 第48-52页 |
| 3.4 RanBP3L抑制小鼠骨髓来源间充质干细胞的成骨分化 | 第52-56页 |
| 3.5 RanBP3L促进C2C12细胞的成肌分化 | 第56-59页 |
| 3.6 RanBP3L和Smad1/5/8相互作用 | 第59-63页 |
| 3.7 RanBP3L在核内结合去磷酸化的Smad1 | 第63-65页 |
| 3.8 RanBP3L以Ran蛋白依赖的方式介导Smad1出核转运 | 第65-71页 |
| 3.9 RanBP3L特异性调控BMP下游的Smads | 第71-75页 |
| 4 结论与讨论 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 作者简历 | 第88-89页 |
