| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| ·囊泡分泌相关蛋白 | 第11-15页 |
| ·囊泡分泌的核心蛋白 -SNARE复合体 | 第12页 |
| ·Ca~(2+)感受器-Synaptotagmin | 第12-14页 |
| ·Sec1/Munc-18(SM)蛋白 | 第14-15页 |
| ·Complexin蛋白简介 | 第15-18页 |
| ·Complexin蛋白的分类及分布 | 第15-16页 |
| ·Complexin蛋白的结构 | 第16页 |
| ·Complexin蛋白的功能域 | 第16-18页 |
| ·囊泡膜融合及循环机制 | 第18-20页 |
| ·SNARE复合体的形成 | 第19页 |
| ·SNARE复合体的解聚 | 第19-20页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 实验原理和研究方法 | 第21-27页 |
| ·RNA干扰技术 | 第21-23页 |
| ·慢病毒侵染 | 第23-24页 |
| ·膜片钳技术 | 第24-25页 |
| ·单囊泡融合技术 | 第25-27页 |
| 第3章 Complexin蛋白的C末端在囊泡膜融合中的作用 | 第27-36页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·试剂,耗材 | 第27-28页 |
| ·常用溶液配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·蛋白表达 | 第29-30页 |
| ·诱导表达蛋白样的处理 | 第30页 |
| ·蛋白纯化 | 第30-31页 |
| ·蛋白重组 | 第31页 |
| ·单囊泡融合技术 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-35页 |
| ·Cpx-1 的C末端在囊泡融合中的作用 | 第32-33页 |
| ·Cpx~(1-86)的浓度对囊泡融合的影响 | 第33-34页 |
| ·Cpx与优先与突触囊泡膜结合 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第4章 Complexin的C末端的分子作用机制 | 第36-48页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-39页 |
| ·菌株,细胞株 | 第36页 |
| ·试剂,耗材 | 第36-37页 |
| ·常用溶液配制 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·质粒构建 | 第39-40页 |
| ·HEK293T细胞培养 | 第40页 |
| ·HEK293T细胞包装病毒 | 第40-41页 |
| ·常规离心浓缩慢病毒 | 第41页 |
| ·小鼠海马神经元细胞原代培养 | 第41-42页 |
| ·mini EPSC和evoked EPSC的记录 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-47页 |
| ·Cpx-1~(1-86-CSPα)和Cpx-1~(1-86-CAIM)质粒构建 | 第43-44页 |
| ·克隆蛋白表达鉴定 | 第44页 |
| ·慢病毒侵染神经元 | 第44-45页 |
| ·Cpx-1~(1-86-CSPα) 和Cpx-1~(1-86-CAIM)在自发性膜融合中的作用 | 第45-46页 |
| ·Cpx-1~(1-86-CSPα) 和Cpx-1~(1-86-CAIM)在Ca~(2+)促发的膜融合中的作用 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第5章 总结与展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 已发表的论文目录 | 第56页 |