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Complexin蛋白调控囊泡分泌机制研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第1章 绪论第11-21页
   ·囊泡分泌相关蛋白第11-15页
     ·囊泡分泌的核心蛋白 -SNARE复合体第12页
     ·Ca~(2+)感受器-Synaptotagmin第12-14页
     ·Sec1/Munc-18(SM)蛋白第14-15页
   ·Complexin蛋白简介第15-18页
     ·Complexin蛋白的分类及分布第15-16页
     ·Complexin蛋白的结构第16页
     ·Complexin蛋白的功能域第16-18页
   ·囊泡膜融合及循环机制第18-20页
     ·SNARE复合体的形成第19页
     ·SNARE复合体的解聚第19-20页
   ·本文的研究目的和意义第20-21页
第2章 实验原理和研究方法第21-27页
   ·RNA干扰技术第21-23页
   ·慢病毒侵染第23-24页
   ·膜片钳技术第24-25页
   ·单囊泡融合技术第25-27页
第3章 Complexin蛋白的C末端在囊泡膜融合中的作用第27-36页
   ·引言第27页
   ·实验材料第27-29页
     ·菌株第27页
     ·试剂,耗材第27-28页
     ·常用溶液配制第28-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·蛋白表达第29-30页
     ·诱导表达蛋白样的处理第30页
     ·蛋白纯化第30-31页
     ·蛋白重组第31页
     ·单囊泡融合技术第31-32页
   ·实验结果第32-35页
     ·Cpx-1 的C末端在囊泡融合中的作用第32-33页
     ·Cpx~(1-86)的浓度对囊泡融合的影响第33-34页
     ·Cpx与优先与突触囊泡膜结合第34-35页
   ·讨论第35-36页
第4章 Complexin的C末端的分子作用机制第36-48页
   ·引言第36页
   ·实验材料第36-39页
     ·菌株,细胞株第36页
     ·试剂,耗材第36-37页
     ·常用溶液配制第37-39页
   ·实验方法第39-43页
     ·质粒构建第39-40页
     ·HEK293T细胞培养第40页
     ·HEK293T细胞包装病毒第40-41页
     ·常规离心浓缩慢病毒第41页
     ·小鼠海马神经元细胞原代培养第41-42页
     ·mini EPSC和evoked EPSC的记录第42-43页
   ·实验结果第43-47页
     ·Cpx-1~(1-86-CSPα)和Cpx-1~(1-86-CAIM)质粒构建第43-44页
     ·克隆蛋白表达鉴定第44页
     ·慢病毒侵染神经元第44-45页
     ·Cpx-1~(1-86-CSPα) 和Cpx-1~(1-86-CAIM)在自发性膜融合中的作用第45-46页
     ·Cpx-1~(1-86-CSPα) 和Cpx-1~(1-86-CAIM)在Ca~(2+)促发的膜融合中的作用第46-47页
   ·讨论第47-48页
第5章 总结与展望第48-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
附录 已发表的论文目录第56页

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