摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一章 绪论 | 第12-19页 |
·细胞黏附蛋白的研究现状 | 第13-15页 |
·研究方法 | 第15-18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 LR克隆技术及其克隆质粒的验证 | 第19-36页 |
·引言 | 第19页 |
·GATEWAY克隆技术简介 | 第19-21页 |
·实验方法 | 第21-31页 |
·LR克隆反应 | 第21-23页 |
·大肠杆菌扩大培养和质粒小提 | 第23-24页 |
·酶切和琼脂糖凝胶电泳验证 | 第24-26页 |
·蛋白验证 | 第26-31页 |
·HEK293T细胞PEI转染 | 第26-27页 |
·提取全蛋白 | 第27-28页 |
·蛋白质印迹法 | 第28-31页 |
·实验结果 | 第31-34页 |
·酶切结果 | 第31-32页 |
·蛋白印迹鉴定结果 | 第32-34页 |
·结果分析 | 第34-36页 |
第三章 突触后膜细胞黏附蛋白的筛选 | 第36-53页 |
·引言 | 第36页 |
·高内涵细胞成像分析系统简介 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-42页 |
·乳鼠海马组织神经细胞培养 | 第37-39页 |
·乳鼠海马组织神经元提取 | 第37-38页 |
·第一天神经细胞换神经元生长培养液 | 第38页 |
·第四天神经细胞换含4微摩尔阿糖胞苷的神经元培养液 | 第38-39页 |
·第九天神经细胞换含4微摩尔阿糖胞苷的神经元培养液 | 第39页 |
·HEK293T细胞转染 | 第39-40页 |
·第七天实验用HEK293T细胞培养 | 第39-40页 |
·第八天HEK293T细胞PEI转染 | 第40页 |
·第九天共培养 | 第40-41页 |
·第十一天突触免疫荧光染色 | 第41-42页 |
·实验结果 | 第42-51页 |
·HEK293T细胞过量表达NL2也可以引起突触聚集 | 第42-43页 |
·C.I.计算方法统计突触聚集程度 | 第43-44页 |
·高内涵细胞成像系统图像采集 | 第44-45页 |
·细胞共培养时间分析 | 第45页 |
·转染质粒质量分析 | 第45-47页 |
·突触蛋白筛选流程与结果分析 | 第47-50页 |
·X1可以引起突触聚集现象 | 第50-51页 |
·X1突触聚集数据分析 | 第51页 |
·结果分析 | 第51-53页 |
第四章 结论与展望 | 第53-56页 |
·LR克隆及其验证 | 第53-54页 |
·细胞黏附蛋白筛选 | 第54页 |
·展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第60-61页 |
附录B 实验所需试剂的配置方法 | 第61-64页 |