| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表（ABBREVIATION） | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 埃博拉病毒病的流行病学 | 第12-14页 |
| ·埃博拉病毒病的流行特征 | 第12-13页 |
| ·埃博拉的传播 | 第13-14页 |
| 2 埃博拉病毒的分子生物学特性 | 第14-17页 |
| ·埃博拉病毒的病原性 | 第14页 |
| ·埃博拉病毒基因组的结构和功能 | 第14-16页 |
| ·埃博拉病毒的理化特性 | 第16页 |
| ·埃博拉病毒的入侵致病机理和病理变化 | 第16-17页 |
| 3 埃博拉病的临床表现 | 第17-18页 |
| 4 埃博拉病的诊断 | 第18-19页 |
| ·血清学检测 | 第18-19页 |
| ·病毒分离检测 | 第19页 |
| ·分子生物学检测 | 第19页 |
| 5 埃博拉病的防治及疫苗研究现状 | 第19-21页 |
| ·传统疫苗 | 第20页 |
| ·新型疫苗研究概况 | 第20-21页 |
| 6 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 埃博拉病毒GP蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第23-49页 |
| 1 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·质粒、菌株、病毒、细胞系和实验动物 | 第23页 |
| ·主要药品、试剂和仪器 | 第23-24页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第24页 |
| ·主要缓冲液（溶液）及其配制 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·GP基因抗原表位软件分析 | 第26页 |
| ·截短GP蛋白引物的设计 | 第26-27页 |
| ·截短GP蛋白基因的扩增 | 第27页 |
| ·DNA片段的回收纯化 | 第27-28页 |
| ·限制性内切酶反应 | 第28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·pKG-GP-300的诱导表达 | 第29页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第29页 |
| ·表达产物pKG-GP-300的SDS-PAGE分析 | 第29页 |
| ·表达产物pKG-GP-300的Western Blot分析 | 第29-30页 |
| ·pKG-GP-300蛋白的包涵体纯化及定量 | 第30-31页 |
| ·动物免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第31页 |
| ·间接ELISA法检测小鼠的免疫效价 | 第31-32页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞的准备 | 第32页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第32页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·细胞融合 | 第33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体计数 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第34页 |
| ·单克隆抗体效价的检测 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体的IFA分析 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的Western Blot分析 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-47页 |
| ·GP蛋白抗原表位软件分析 | 第36页 |
| ·GP基因截短片段PCR扩增及原核表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·pKG-GP-300蛋白的表达及纯化 | 第38-40页 |
| ·pKG-GP-300蛋白最佳抗原包被浓度的测定 | 第40-41页 |
| ·小鼠免疫效价的检测 | 第41-42页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞遗传稳定性的分析 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第43页 |
| ·单克隆抗体效价的检测 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体的IFA检测 | 第45页 |
| ·单克隆抗体的Western Blot分析 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 埃博拉病毒GP蛋白在杆状病毒中的表达及其免疫原性研究 | 第49-69页 |
| 1.材料与方法 | 第49-60页 |
| ·实验材料 | 第49-52页 |
| ·质粒、菌株、病毒、细胞系和实验动物 | 第49页 |
| ·主要药品、试剂和仪器 | 第49-50页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第50页 |
| ·主要缓冲液（溶液）及其配制 | 第50-52页 |
| ·实验方法 | 第52-60页 |
| ·GP基因和M13引物的设计 | 第52-53页 |
| ·EBOV-bac-GP基因的扩增 | 第53页 |
| ·DNA片段的回收纯化 | 第53页 |
| ·限制性内切酶反应 | 第53-54页 |
| ·连接反应 | 第54页 |
| ·连接产物的转化 | 第54页 |
| ·重组质粒的提取 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55页 |
| ·重组穿梭质粒的构建 | 第55页 |
| ·重组穿梭质粒的提取 | 第55-56页 |
| ·重组穿梭质粒的鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组杆状病毒BEBOV-GP的获得 | 第57页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的扩增 | 第57页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的毒价测定 | 第57页 |
| ·重组蛋白Bacmid-EBOV-GP的IFA分析 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白Bacmid-EBOV-GP的Western Blot分析 | 第58页 |
| ·重组蛋白Bacmid-EBOV-GP表达特性分析 | 第58页 |
| ·重组蛋白Bacmid-EBOV-GP的免疫原性分析 | 第58-60页 |
| ·免疫原的制备 | 第58页 |
| ·动物实验 | 第58-59页 |
| ·血清特异性抗体效价检测 | 第59页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第59-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-67页 |
| ·EBOV GP基因片段PCR扩增及重组质粒的鉴定 | 第60-61页 |
| ·重组穿梭质粒bacmid的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的获得 | 第62页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的毒价测定 | 第62页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的IFA分析 | 第62-63页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的Western Blot分析 | 第63-64页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid-EBOV-GP的表达特性分析 | 第64-65页 |
| ·血清特异性抗体效价检测 | 第65-66页 |
| ·淋巴细胞增殖反应 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
